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    课件:17项肿瘤标志物化学发光检测讲解.ppt

    • 资源ID:17563913       资源大小:1.24MB        全文页数:41页
    • 资源格式: PPT        下载积分:28积分
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    课件:17项肿瘤标志物化学发光检测讲解.ppt

    肿瘤标志物17项 (化学发光免疫分析法),2016-5-26,各种类型肿瘤发生率 (不考虑性别),100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0,27,13,18,75,12,52,12,45,9,70,7,38,4,3,4,75,4,67,肺,乳腺,结直肠,胃,前列腺,卵巢,胰腺,膀胱,宫颈,发生率,5年生存率,数据来自the American Cancer Society,肿瘤诊断方法,1、临床病史、体症 2、辅助物理检查:X光、CT、核磁共振、 B超、 红外扫描 病理 术前:穿刺、刮片、拉网 术后:组织切片 免疫学检查:肿瘤标志物和代谢物测定 分子生物学检查: 核酸分析,在肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞合成、释放、或者是宿主对肿瘤反应产生的一类生化物质。 在血液、体液及组织中肿瘤标志物的定量或定性检测可以作为肿瘤筛查、鉴别诊断、治疗后病情监测及预后判断的标志与依据。 这些物质必须在正常人中不存在或者是在癌症患者中出现的水平显著高于正常人。,肿瘤标志物 【tumor markers TM】,肿瘤标志物的分类(化学特性),癌胚抗原类标志物 糖类抗原标记物 酶类标志物 激素类标志物 癌基因 其他,理想的肿瘤标志物的标准,特异性100% 灵敏度100% 器官特异性 与肿瘤大小或分期有关 能进行疗效观察 与预后有关 可靠的预测价值,然而目前所应用的肿瘤标志物均未达到上述要求,但如 正确合理使用,仍有很大临床价值,关键是要正确评价肿瘤 标志物检测的临床意义。,目前临床应用肿瘤标志物现状,理想形式,特异性100% 真阴性100% 假阳性 0%,健康人,临界值,敏感性100% 真阳性100% 假阴性 0%,肿瘤患者,实际状况,假阴性,假阳性,临界值,敏感性100% 特异性- 60%,健康人,肿瘤患者,特异性100% 敏感性- 50%,敏感性上升,特异性上升,肿瘤标志物参数在健康人和肿瘤患者两组人群间的区别 实际状态:假阴性和假阳性在选择临界值中的作用:特异性越高,敏感性越低,反之亦然,肿瘤标志物的临床应用,正常人群中的筛查 有症状者的辅助诊断 癌症的临床阶段的分期 疾病进程的预后指标 评估治疗方案 判断癌症是否复发 治疗应答的监测,肿瘤标志物的注意事项,定位 TM基本上不能对肿瘤定位。极少数TM如PSA,甲状腺球白等具器官特异性,但不是肿瘤特异性。 确诊 通常不能进行确诊。 分期 大多数TM与疾病分期有关,且浓度与肿瘤大小通常存在关联,但并不能根据个体测得值来判断肿瘤大小,也不能以TM 浓度精确指示各期肿瘤,因为各期肿瘤的TM浓度范围极广,且互相重叠。 预后 术前TM浓度增加,术后降低,表示这些TM对此肿瘤有预后价值。 在病程监测中,TM的浓度增加或降低与疾病的预后密切相关。,TM评价治疗有效性方案 (Beastall, 1991),无效:TM浓度与治疗前相比下降50% 有效:TM浓度与治疗前相比下降90% 显效: TM浓度下降至临界值以下,检测肿瘤标志物的试验方法,放射免疫法(RIA) 免疫放射法(IRMA) ELISA法 斑点法 金标法,荧光免疫法 流式荧光免疫法 时间分辨免疫荧光法 化学发光法(CLIA) 磁微粒化学发光法 电化学发光法(ECLIA) 蛋白芯片技术,化学发光免疫分析,化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或 酶作用于发光底物,进样系统,反应池,PMT,放大器,记录仪,负高压,检测系统,化学发光分析法仪器方框图,PMT:光电倍增管,肿瘤标志物的选择,生化特性: 糖蛋白,4560%糖,电泳迁移率, 抗原决定基 分子量: 180,000 发生部位: 胚胎及胎儿肠黏膜 参考值范围:5ng/ml 临床应用: 监测结直肠癌、胃癌、乳腺癌和支气管癌病程及疗效 影响因素: 5%吸烟者检测值可至2.55ng/ml, 1%至1020ng/ml;肝炎疾病可使CEA 水平短暂升高,(一)癌胚抗原 (CEA),60 50 40 30 20 10 0,肿瘤患者 %,7.0 7.0 4.2 7.0 7.4,临界值 (ng/ml),50,33,28,27,22,在实体肿瘤患者中,CEA特异性为95%时的敏感性,参考值范围:5ng/ml,在实体肿瘤患者中CEA表达状况,生化特性: 糖蛋白,4%糖,电泳-1-迁移率 分子量: 70,000 发生部位: 卵黄囊、胚胎肝 参考值范围:10ng/ml 临床应用: 发现原发性肝细胞癌,监测治疗效果;用于诊断生殖细胞肿瘤 影响因素: 肝炎疾病可使AFP水平短暂升高;AFP可通过胎盘,妊娠3236周可达高峰。,(二)甲胎蛋白(AFP),(三)糖类抗原242 (CA242),生化特性:是一种唾液酸化的新型粘蛋白类糖类肿瘤抗原 临床应用:CA242可作为胰腺癌和结肠癌校好的肿瘤标志物,其灵敏度与CA19-9相仿(70% 92% ),但特异性、诊断效率则优于CA19-9。 参考值: 25U/ml,生化特性: 糖蛋白,由两个单克隆抗体: 1.115D8抗乳脂膜及2.DF3抗乳腺癌 细胞系所证实 分子量: 115D8: 400,000;DF3290,000 发生部位: 乳腺癌细胞和某些上皮细胞 参考值范围:28U/ml 临床应用: 监测乳腺癌疗效 影响因素: 与CEA联合检测,(四)癌抗原15-3 (CA15-3),?,生化特性: 糖脂,Lewis血型决定基半抗原 分子量: 抗原:36,000;粘蛋白:106D 发生部位: 各种肿瘤,在胎儿胃肠道上皮细胞,许多 粘膜细胞 参考值范围:37U/ml 临床应用: 监测胰腺癌疗效 影响因素: 结直肠TM的第二选择,(五)糖类抗原19-9 (CA19-9),生化特性: 糖蛋白,以卵巢癌细胞系免疫所获 单克隆抗体所证实 分子量: 200,000 发生部位: 卵巢癌(膜结合物),胎儿和成人支气 管正常上皮细胞 参考值范围:35U/ml (65U/ml) 临床应用: 监测卵巢癌病程及疗效,透明细胞癌,子宫内膜癌、输卵 管埃及未分化卵巢癌明显升高 影响因素: 来源于体腔上皮细胞衍生物的分化抗原,特异性低;血清浓度轻微升高正常妇女,以及良性卵巢疾患, 怀孕前3个月、行经期、肝硬化、子宫纤维变性、急性输卵 管炎、胸膜炎和心包感染等也稍高。,(六)糖类抗原125 ( CA125),(七)糖类抗原50 (CA50),生化特性:糖类抗原CA50是一种以唾液酸酯和唾液酸糖蛋白为主 的肿瘤标志物 参考范围: 23U/ml 临床意义:糖类抗原CA50是一种非特异性的广谱肿瘤标志物,与癌抗原19-9有一定的交叉抗原性,主要用于胰腺癌、结肠直肠癌、胃癌的辅助诊断,其中胰腺癌病人增高最明显。 增高:见于胰腺癌(阳性率可达87)、结肠直肠癌、胃癌、肺癌。肝癌。卵巢癌、乳腺癌等恶性肿瘤;溃疡性结肠炎、肝硬化、黑色素瘤、淋巴瘤、自身免疫性疾病等也增高,生化特性: 糖蛋白 分子量: 400,000 发生部位: 上皮细胞 参考值范围: 3U/ml 临床应用: 胃癌,卵巢粘液癌 影响因素: 与CEA联合检测胃癌,卵巢癌的第二选择标志物,(八)癌抗原72-4 ( CA72-4),CA72-4临床应用,CA72-4的参考范围高限值为10U/ml,具有高特异性。 在胃癌患者血清中,其水平升高尤为明显。 经过对50例良性胃肠道疾病和197例处于活动期胃癌的研究发现,CA72-4对胃癌的特异性为100%,灵敏度为48%。 CA72-4的测定对胃癌的生长期和治疗效果极为重要,最好联合测定CA72-4和CEA。 CA72-4也见于卵巢癌中。,胃癌单项或联合测定CEA、CA19-9及CA72-4的敏感性,80 60 40 20 0,敏感性(%),27,29,66,40,66,72,CEA(10.1),CA19-9(96),CA72-4(2.4),CA19-9(107) CEA(10.1),CA72-4(2.4) CA19-9(260),CA72-4(2.4) CEA(10.4),胃癌特异性95%情况下,敏感性指标,生化特性: 烯醇化酶二聚体 分子量: 87,000 发生部位: 神经系统的神经元和神经内分泌细胞,红细胞,血小板 参考值范围:15.0ng/ml 临床应用: 增高:见于小细胞肺癌SCLC (最敏感最特异的肿瘤标志物之一) 、神经母细胞瘤、神经内分泌细胞肿瘤(如嗜铬细胞 瘤、胰岛细胞瘤、黑色素瘤)等 影响因素: 不要将血放置太久,否则将出现假高值;1小时内离心;检测SCLC时,与CEA联合应用.,(九)神经特异性烯醇化酶 (NSE),生化特性: 糖蛋白,肿瘤抗原T4 分子量: 48,000 发生部位: 主要存在于子宫颈鳞状细胞癌,正常 鳞状上皮 参考值范围:1.2ng/ml 临床应用: 监测宫颈、耳、鼻、喉、肺和食管鳞 状细胞癌病程及治疗 影响因素: 被皮肤或唾液污染后可导致假性高值,(十)鳞状上皮细胞癌抗原 ( SCC),生化特性: 细胞角蛋白片段19 分子量: 30,000 发生部位:正常及恶性的上皮细胞支架蛋白,已知有20种,存在于许多组织中,特别是肺中 参考值范围: 3.3ng/ml 临床应用: 非小细胞肺癌 影响因素: 被唾液污染后可导致假性高值,(十一)细胞角蛋白组分19 (CYFRA21-1),肺癌中肿瘤标志物的应用,CYFRA21-1,CEA,NSE,治疗前,治疗后复查,组织类型不明确,腺癌,鳞状细胞癌,小细胞肺癌,大细胞肺癌,(十二)前列腺特异抗原 ( t-PSA)和游离前列腺特异性抗原(fPSA),PSA是前列腺的特异性标记物,在正常男性含量小于4 g/L。属于器官特异性抗原,不具备肿瘤特异性 前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎和前列腺损伤都会导致血清PSA升高 游离PSA在正常男性含量小于1g/L,临床应用: 当TPSA在4-10ng/ml之间时,区别良性与恶性前列腺疾病,测定游离PSA(f-PSA)与总PSA(tPSA)的比率更有临床价值。 f-PSAtPSA 大于25%:多为良性病人。 f-PSAtPSA 小于10%:多为前列腺癌。,生化特性: 与IgG分子的重链和轻链的C片段同型,与 HLA共同片段的部分相同 分子量: 11,800 发生部位: 淋巴细胞,巨嗜细胞和一些上皮细胞表面 参考值范围:1.22.5mg/l 临床应用: 多发性骨髓瘤,非何杰金氏淋巴瘤(NHL) 影响因素: 在肾脏疾病诊断中也有重要意义,(十四)2-微球蛋白 ( 2-MG),(十五)人附睾蛋白(HE4),HE4 (Human Epididymis Secretory Protein 4,人附睾分泌蛋白4),是一种酸性蛋白质。 HE4在恶性肿瘤中的高表达多见于卵巢癌、子宫内膜癌,少见于肺腺癌及间皮瘤。 HE4在早期(I期)的卵巢癌中的敏感性及检测卵巢癌总的敏感性均高于CA125,是卵巢癌敏感及特异的标志物,可用于对卵巢癌的早期诊断及辅助监控卵巢癌患者的治疗情况。 英国的一项研究对200,000妇女用30多种肿瘤标记物分别单独或与CA125联合进行卵巢癌筛查,HE4可以使诊断卵巢癌的敏感度和特异度提高 。,HGH又被称为人体生长激素。研究发现人类生长素随着年龄的增长而分泌量趋于减少。 (1)升高: 垂体肿瘤:肢端肥大症、脑垂体性巨人症。 非垂体肿瘤:糖尿病、部分肝病、肾功能不全、胰腺癌。可用抑制试验鉴别非垂体肿瘤所致GH之增高。 (2)降低: 垂体性侏儒症及其他原因所致的垂体前叶功能减低症。 非垂体疾病所致GH值降低:肝硬化、垂体附近的脑肿瘤。,(十六)人生长激素(hGH),检验医学与临床 2008年5期 肿瘤标志物在诊断消化系恶性肿瘤中的应用价值,多指标联合评价有利于提高检测的灵敏度,已成为公认的肿瘤标志物临床应用的原则之一。 肿瘤标志物多指标联合检测技术健康体检普适技术!,多指标联合检测的意义,肿瘤研究与临床 2007年Z1期 三项肿瘤标志物联合检测对卵巢癌的临床应用价值,几种主要TMs联检技术比较,优势,方法学:通俗易懂,与传统酶联免疫法类似,但操作更简单,更加灵敏。 肿瘤标志物覆盖范围广:几乎涵盖了各种肿瘤疾病,联合检测增加敏感度和特异性。在Array-elisa(6项)的基础上任意组合。 操作统一:反应时间、加样模式基本统一。,谢 谢!,资料可以编辑修改使用 学习愉快!,课件仅供参考哦, 实际情况要实际分析哈!,感谢您的观看,

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