欢迎来到人人文库网! | 帮助中心 人人文库renrendoc.com美如初恋!
人人文库网
首页 人人文库网 > 资源分类 > DOC文档下载

人力资源管理论文-自体和异体血液在全血分离实验体系中对免疫细胞因子的影响.doc

  • 资源大小:15.52KB        全文页数:8页
  • 资源格式: DOC        下载权限:游客/注册会员/VIP会员    下载费用:2
游客快捷下载 游客一键下载
会员登录下载
下载资源需要2

邮箱/手机号:
您支付成功后,系统会自动为您创建此邮箱/手机号的账号,密码跟您输入的邮箱/手机号一致,以方便您下次登录下载和查看订单。注:支付完成后需要自己下载文件,并不会自动发送文件哦!

支付方式: 微信支付    支付宝   
验证码:   换一换

友情提示
2、本站资源不支持迅雷下载,请使用浏览器直接下载(不支持QQ浏览器)
3、本站资源下载后的文档和图纸-无水印,预览文档经过压缩,下载后原文更清晰   

人力资源管理论文-自体和异体血液在全血分离实验体系中对免疫细胞因子的影响.doc

人力资源管理论文自体和异体血液在全血分离实验体系中对免疫细胞因子的影响作者夏晓峰郭峰钱宝华花美仙【摘要】目的运用系统血液免疫反应分离实验体系,探讨在抗原激活的情况下异体血细胞对反应体系中细胞因子含量水平影响的变化规律。方法以S180作为激活抗原,加异体血细胞与自体血细胞对比,37℃孵育1H,取上清液用ELISA法测定IL8、TNFΑ、IFNΓ的分泌量。结果IL8的分泌量异体红细胞实验组〔(1339213585)〕与自体红细胞对照组〔(37932774)〕相比明显上升(P005);TNFΑ的分泌量异体红细胞实验组〔(831357)〕与自体红细胞实验组〔(16551038)〕相比明显下降(P005);IFNΓ分泌量无明显差异。结论异体红细胞对自体血液免疫反应细胞因子的分泌具有双向调控作用,提示异体输血对受者的血液免疫反应具有干扰和失平衡的不良影响。【关键词】淋巴细胞;红细胞;抗原;免疫调控;细胞因子EFFECTSOFAUTOGENETICANDALLOGENOUSBLOODONCYTOKINESBYMEANSOFNATURALISOLATEDEXPERIMENTALSYSTEM〔ABSTRACT〕OBJECTIVEAUTOGENETICANDALLOGENOUSERYTHROCYTESREGULATETHEIMMUNOLOGICALREACTIONSACTIVATEDBYANTIGENSBYMEANSOFNATURALISOLATEDEXPERIMENTALSYSTEM,TOOBSERVETHECHANGESOFCYTOKINESMETHODSUSINGINACTIVATEDS180ASACTIVATINGANTIGENANDAUTOLOGOUSPLASMAASREACTIONSUBSTRATUM,AFTERINCUBATIONANHOURIN37℃,SUPERNATEFLUIDISSUSPENDEDANDDETECTEDTHECHANGEOFIL8、TNFΑANDIFNΓBYELISAASSAYRESULTSTHESECRETIONOFIL8OFALLOGENOUSERYTHROCYTESEXPERIMENTALGROUP〔1339213585〕ISMUCHHIGHERTHANTHATOFAUTOGENEICERYTHROCYTESCONTROLGROUP〔37932774〕P005,THELEVELOFTNFΑOFALLOGENOUSERYTHROCYTESEXPERIMENTALGROUP〔831357〕ISMUCHLOWERTHANTHATOFAUTOGENEICERYTHROCYTESEXPERIMENTALGROUP〔16551038〕P005;THEEXPRESSIONOFIFNΓ红细胞在天然免疫防御网络中发挥着重要作用,红细胞在补体系统天然免疫反应的参与下有黏附和调理抗原、清除循环免疫复合物、调控淋巴细胞表达免疫分子和细胞因子等作用。有实验证明在库存血中有多达14种以上炎性细胞因子,中性粒细胞弹性蛋白酶和TNFΑ浓度的增加在临床的异体输血时都可造成免疫功能的不利影响1。结合了补体的病原体可以被红细胞补体受体免疫分子黏附,激发对致病原发生连锁的系统血液天然免疫反应,同时红细胞还可参与相关免疫细胞分泌细胞因子的调节。本实验研究是运用全血分离实验体系2,通过ELISA的方法测定上清液中相关细胞因子IL8、TNFΑ、IFNΓ分泌量在实验体系反应中的变化,探讨其可能存在的临床意义。1材料与方法11材料111酸性枸橼酸钠葡萄糖溶液(ACIDCITRATEDEXTROSE,ACD)抗凝的健康成人新鲜全血由解放军上海血站提供。112磷酸盐缓冲溶液(PHOSPHATEBUFFEREDSOLUTION,PBS)和癌细胞悬液(S180)由解放军上海血站血液免疫研究室自行制备。113红细胞裂解液(10)购于深圳晶美生物公司。114IL8、TNFΑ、IFNΓ酶联免疫反应试剂盒(ELISA法)购于法国DIACLONE公司。12方法121血浆的分离制备采集新鲜的健康成人ACD抗凝全血10ML,室温下2000R/MIN离心5MIN,吸取上层血浆至另一试管备用。122红细胞悬液(RBC)的制备小心吸取沉底红细胞100L,加入2ML生理盐水溶液中洗涤,2000R/MIN离心5MIN,弃上清,全自动血细胞分析仪计数,光学显微镜下观察证实不含白细胞和血小板后,调整红细胞悬液浓度为1108/ML。123白细胞悬液(WBC)的制备取全血细胞悬液16ML加4ML蒸馏水在冰水中轻轻混匀作用不超过1MIN,立即加4ML18氯化钠液混匀,2500R/MIN离心5MIN,弃上清,调整白细胞悬液浓度为1106/ML。13分离实验体系的设计和建立实验共分6只试管,以自体或异体血浆作为反应基质,分离实验组以灭活腹水癌细胞S180作为激活抗原,其对照组加NS作为对照,即(注为加异体血浆组)①01ML异体RBC01MLS18002ML自体WBC03ML异体血浆(加异体血浆)。②01ML异体RBC01MLS18002ML自体WBC03ML自体血浆(加自体血浆)。③01ML异体RBC01MLNS02ML自体WBC03ML异体血浆(加异体血浆)。④01ML异体RBC01MLNS02ML自体WBC03ML自体血浆(加自体血浆)。⑤01ML自体RBC01MLS18002ML自体WBC03ML自体血浆(加自体血浆)。⑥01ML自体RBC01MLNS02ML自体WBC03ML自体血浆(加自体血浆)。将上述6只试管置于37℃水浴箱中温育1H,加盖,中间摇匀2次,间隔20MIN;完成后,2000R/MIN离心5MIN;小心取出上清液约400L装入安瓿管中,编号,置于20℃冰箱中冷藏待测。14上清液细胞因子IL8、TNFΑ、IFNΓ的检测实验前20MIN从冰箱中取出试剂盒和待测样品,平衡至室温(25℃),96孔板用包被缓冲液稀释的试剂,每孔加100L,4℃过夜,洗板3次;加100L待检样品上清液于已包被的反应孔中(同时做空白、阴性及阳性孔对照),37℃孵育1H,洗板3次;于反应孔中加入新鲜稀释的STREPTAVIDINHRP100L,室温下孵育20MIN,洗板3次;于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液100L,避光反应20MIN使其显色;于各反应孔中加入2MOL/L硫酸100L终止反应;在ELISA酶标检测仪上,于450NM处,以空白对照孔调零后测各孔A值,绘制标准曲线,并比较各孔实测值。15统计学处理数据以XS表示,统计学处理采用T检验或方差分析,P005为差异显著。2结果21IL8、TNFΑ、IFNΓ分泌量(PG/ML)的变化在S180激活情况下,异体红细胞能够对自体血液免疫反应的细胞因子发生调控作用。其中,IL8的分泌量异体红细胞实验组〔(1339213585)〕与自体红细胞对照组〔(37932774)〕相比表现出明显上升(P005);TNFΑ的分泌量异体红细胞实验组〔(831357)〕与自体红细胞实验组〔(16551038)〕相比表现出明显降低(P005);IFNΓ的分泌量,在各组之间相比均无明显差异(P005),详见表1。

注意事项

本文(人力资源管理论文-自体和异体血液在全血分离实验体系中对免疫细胞因子的影响.doc)为本站会员(21ask)主动上传,人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知人人文库网(发送邮件至[email protected]或直接QQ联系客服),我们立即给予删除!

温馨提示:如果因为网速或其他原因下载失败请重新下载,重复下载不扣分。

关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服客服 - 联系我们

网站客服QQ:2846424093    人人文库上传用户QQ群:460291265   

[email protected] 2016-2018  renrendoc.com 网站版权所有   南天在线技术支持

经营许可证编号:苏ICP备12009002号-5