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农林学类论文-大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件研究.doc

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农林学类论文-大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件研究.doc

农林学类论文大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件研究摘要通过对大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件的研究表明,适宜克H3菌株生长的培养基是自制培养基,最适温度35℃,适宜PH值70~85,最佳发酵时间48H,克H3生长曲线表明,6~18H为该菌延迟期,18~30H为对数生长期,30~54H为稳定期,54H后进入衰退期。关键词大豆菌核病;克H3;发酵条件1材料与方法1.1供试培养基①PDA培养基马铃薯200G,葡萄糖20G,水1000ML。②高氏1号培养基可溶性淀粉20G,KNO31G,K2HPO405G,MGSO37H2O05G,FESO4001G,水1000ML。③肉汁蛋白胨培养基牛肉膏5G,NACL5G,蛋白胨10G,水1000ML。④玉米粉培养基玉米粉300G,水1000ML。⑤YPG培养基酵母浸膏8G,酵母膏2G,KH2PO405G,K2HPO42G,水1000ML。灭菌后加入无菌10%葡萄糖50ML和1MMGSO47H2O1ML,PH值72。⑥BPY培养基牛肉膏5G,酵母膏5G,葡萄糖5G,蛋白胨10G,NACL5G,水1000ML。PH值72。⑦自制培养基豆粉10G,葡萄糖10G,酵母膏5G,水1000ML。1.2主要仪器设备HYA恒温摇床中国科学院武汉仪器厂,OLYMPUS显微镜日本奥林巴斯株式会社,PHS3C型酸度计金坛市泰纳仪器厂,电热恒温培养箱南京电器三厂,手提式高压灭菌锅哈尔滨东联电子公司,超净工作台上海精密仪器仪表厂。1.3试验方法13.1克H3菌株发酵液的制备将活化的克H3菌株用接菌环划线接种于肉汁蛋白胨培养基斜面上,30℃恒温培养2D后,每试管用5ML无菌水配成克H3悬浮液,将5ML的克H3悬浮液置于装有100MLPDA培养液的250ML三角瓶中,在35℃、180R/MIN摇床中培养48H制成发酵液。1.3.2抑菌活性的测定方法采用滤纸片法。在PDA培养基一侧放人直径8RAM的已灭菌的圆形滤纸碟片,用移液枪接种克H3悬浮液5ΜL,另一侧放人核盘菌6MM,菌间相距3CM。每处理3次重复,5D观察拮抗效果,测量抑菌带宽度。1.3.3最佳培养基的选择供试培养基为PDA培养基、高氏1号培养基、肉汁蛋白胨培养基、玉米粉培养基、YPG培养基、BPY培养基和自制培养基,将5ML的克H3发酵液分别置于装有100ML上述培养基的250ML三角瓶中,在35℃、1

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