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农林学类论文-大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件研究.doc

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农林学类论文-大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件研究.doc

农林学类论文-大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件研究摘要:通过对大豆菌核病生防菌克H3菌株发酵条件的研究表明,适宜克H3菌株生长的培养基是自制培养基,最适温度35℃,适宜pH值7.0~8.5,最佳发酵时间48h,克H3生长曲线表明,6~18h为该菌延迟期,18~30h为对数生长期,30~54h为稳定期,54h后进入衰退期。关键词:大豆菌核病;克H3;发酵条件1材料与方法1.1供试培养基①PDA培养基:马铃薯200g,葡萄糖20g,水1000mL。②高氏1号培养基:可溶性淀粉20g,KNO31g,K2HPO40.5g,MgSO33.1克H3菌株发酵液的制备将活化的克H3菌株用接菌环划线接种于肉汁蛋白胨培养基斜面上,30℃恒温培养2d后,每试管用5mL无菌水配成克H3悬浮液,将5mL的克H3悬浮液置于装有100mLPDA培养液的250mL三角瓶中,在35℃、180r/min摇床中培养48h制成发酵液。1.3.2抑菌活性的测定方法采用滤纸片法。在PDA培养基一侧放人直径8ram的已灭菌的圆形滤纸碟片,用移液枪接种克H3悬浮液5μL,另一侧放人核盘菌(6mm),菌间相距3cm。每处理3次重复,5d观察拮抗效果,测量抑菌带宽度。1.3.3最佳培养基的选择供试培养基为PDA培养基、高氏1号培养基、肉汁蛋白胨培养基、玉米粉培养基、YPG培养基、BPY培养基和自制培养基,将5mL的克H3发酵液分别置于装有100mL上述培养基的250mL三角瓶中,在35℃、180r/min摇床中震荡培养48h后,取发酵液测定抑菌活性。每处理3次重复。1.3.4培养温度的测定处理温度为20~40℃,梯度为5℃,将5mL的克H3发酵液置于装有100mL自制培养基的250mL三角瓶中,在180r/min摇床中震荡培养48h后,取发酵液测定抑菌活性。每处理3次重复。1.3.5起始pH值的测定用PHS-3C型酸度计将自制培养基中的pH值调节为5.5~10,间隔为0.5。将5mL的克H3发酵液置于装有100mL自制培养基的250mL三角瓶中,在35℃、180r/min摇床中震荡培养48h后,取发酵液测定抑菌活性,每处理3次重复。1.3.6培养时间的确定将5mL的克H3发酵液置于装有100mL自制培养基的250mL三角瓶中,在35℃、180r/min摇床中震荡培养。每间隔12h取发酵液测定抑菌活性,至72h结束,

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