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Pax-8基因在心脏发育中蛋白表达下调.doc

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Pax-8基因在心脏发育中蛋白表达下调.doc

Pax-8基因在心脏发育中蛋白表达下调作者:倪秋明,章佳颖,来丹丹,褚茂平,王赛斌,黄晓燕,张怀勤,杨德业【摘要】目的:观察Pax-8基因在ALK3基因敲除小鼠心脏中的蛋白表达情况,探讨Pax-8基因在心脏发育中的作用。方法:基因芯片(microarray)和定量逆转录-聚合酶链反应测定ALK3基因的下游基因,免疫组化法检测13.5d小鼠胚胎心脏特异性ALK3基因敲除小鼠胚胎中Pax-8蛋白的表达,连续病理切片及HE染色观察刚出生的Pax-8基因敲除小鼠的心脏形态。结果:在心脏特异的ALK3基因敲除小鼠中,转录因子Pax-8基因mRNA的表达水平上被下调7.1倍。免疫组化结果显示:13.5d小鼠胚胎心脏特异性ALK3基因敲除的纯合子小鼠Pax-8基因在蛋白水平与杂合子相比也明显下调。Pax-8基因敲除小鼠纯合子有明显的室间隔和左心室肥厚,心脏呈球形。结论:Pax-8基因是ALK3基因的下游基因,与心脏发育有密切关系。【关键词】Pax-8基因;室间隔缺损;免疫组化;蛋白表达Abstract:Objective:ToinvestigatethelevelofPax-8proteinexpressioninthecondi-tionalALK3kockoutmiceheartandstudytheroleofPax-8geneinthecardiacdevelopment.Methods:ThemicroarrayandrealtimequantitativeRT-PCRwereusedtoinvestigatethedown-streamgenesofALK3.ImmunohistochemicaltechnologywasusedtodetectthelevelofPax-8proteinexpressioninthe13.5dheartderivedfroma-MHCCre+/-,ALK3F/-anda-MHCCre+/-,ALK3F/+mice.TostudythecontributionofPax-8geneinthecardiacdevelopment,theheartderivedfrompax-8kockoutmicewasoverviewedusingconsecutivepathologicalsectionandHEstainingmethod.Re

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