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shRNA抑制COX2基因表达对肝癌细胞HepG2生长的影响.doc

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shRNA抑制COX2基因表达对肝癌细胞HepG2生长的影响.doc

SHRNA抑制COX2基因表达对肝癌细胞HEPG2生长的影响作者杨义明刘预涂植光陈亚芹刘靳波【摘要】目的应用RNA干扰技术抑制COX2基因,观察其对肝癌细胞HEPG2生长的影响方法构建靶向抑制COX2基因表达的短发夹双链RNASHRNA真核表达载PSHRNACOX2,转染肝癌细胞HEPG2,用RTPCR和WESTERNBLOT分别从MRNA和蛋白水平检测其对COX2的抑制效应,MTT法检测对HEPG2细胞生长的影响结果与未转染组相比,PSHRNACOX2重组表达质粒抑制了HEPG2细胞COX2MRNA及蛋白表达,抑制率分别为699%和503%;并可抑制HEPG2细胞生长,72H后有统计学差异PLT;005结论PSHRNACOX2重组表达载体能显著抑制肝癌细胞COX2基因表达,从而抑制肿瘤细胞增殖【关键词】RNA干扰;重组表达载体;环氧化酶2;肝肿瘤【ABSTRACT】AIMTOINVESTIGATETHEEFFECTSOFINHIBITIONOFCYCLOOXYGENASE2(COX2)WITHRNAINTERFERENCERNAIONTHEGROWTHOFHEPATOCELLULARCARCINOMAHEPG2CELLSMETHODSTHEEUKARYOTICEXPRESSIONPLASMIDOFSHORTHAIRPINRNASHRNATARGETINGCOX2GENEPSHRNACOX2WASCONSTRUCTEDANDTRANSFECTEDINTOHEPATOCELLULARCARCINOMAHEPG2CELLS;THEEXPRESSIONSOFCOX2MRNAANDPROTEINWEREDETECTEDWITHREVERSETRANSCRIPTIONALPOLYMERASECHAINREACTIONRTPCRANDWESTERNBLOTASSAY,RESPECTIVELYTHEGROWTHOFHEPG2CELLSWASDETECTEDBYMTTRESULTSCOMPAREDWITHUNTRANSFECTEDGROUP,RECOMBINANTEXPRESSIONVECTORPSHRNACOX2RESULTEDINTHEREDUCTIONOFCOX2MRNAANDPROTEINBY699AND503RESPECTIVELY,ANDTHEGROWTHOFHEPG2

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