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不同季节虎杖根茎与茎叶中大黄素含量变化研究.doc

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不同季节虎杖根茎与茎叶中大黄素含量变化研究.doc

不同季节虎杖根茎与茎叶中大黄素含量变化研究作者:胡冠宇,夏醒醒,尹政,陈勤【摘要】目的通过测定药用植物虎杖在不同季节时其不同生长部位中的有效成分大黄素含量及其变化规律,旨在为虎杖的最佳采收时间提供依据。方法采用高效液相色谱法,Diamonsil-C18(250mm4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(80∶20);检测波长:254nm;流速:1.0mL/min;柱温:27℃;进样量:20μL。2.2对照品溶液的配制精密称取大黄素对照品1.0mg,以甲醇溶解并定容至10mL,摇匀,配成100μg/mL的溶液。2.3供试品溶液的制备[3]取虎杖茎叶与根适量,分别干燥研细,过60目筛,精密称取约0.1g,加入三氯甲烷25mL和2.5mol/L硫酸溶液20mL,称定重量,置80℃水浴回流2h,冷却后称重,用三氯甲烷补足失重,摇匀,分取三氯甲烷,精密量取10mL,水浴蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容至10mL,用0.45μm微孔滤膜滤过,备用。2.4线性关系试验取100μg/mL的对照品溶液,用甲醇稀释为100、16.67、8.33、1.67、0.83μg/mL,按上述色谱条件测定,每个浓度重复3次,进样量为20μL。以对照品峰面积积分值为纵坐标,以进样浓度为横坐标进行线性回归,得回归方程为:Y=134405X+16.119(R=0.9999)。表明大黄素在0.83~100μg/mL浓度范围内线性关系良好。2.5精密度试验精密吸取同一对照品溶液20μL,重复进样5次,测定大黄素的峰面积值,RSD=1.83%,表明仪器精密度良好。2.6稳定性试验将待测样品溶液在室温下贮存,在相同的色谱条件下,每隔2h进样1次,共5次,测定大黄素的峰面积值,RSD=0.91%,表明该样品溶液在10h内基本稳定。2.7重复性试验取同一代样品5份,每份0.1g,精密称取,按“2.3”项中的方法处理,测定大黄素的峰面积值,结果大黄素峰面积值RSD=1.85%。结果表明重复性良好。2.8加样回收率试验采用加样回收法。精密称取已知含量(21.609μg/mL)的样品,分别精密加入一定量的大黄素(8.333μg/mL)对照品,按正文样品溶液的制备方法及上述的色谱条件,依法测定峰面积,计算回收率。结果见表1。表1加样回收率试验结果(略)2.9样品含量测定精密称取干燥虎杖不同组织粉碎品,按“2.3”项下

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