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不同剂量五味子多糖灌胃给药镇痛作用的观察.doc

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不同剂量五味子多糖灌胃给药镇痛作用的观察.doc

不同剂量五味子多糖灌胃给药镇痛作用的观察【摘要】目的研究不同剂量五味子多糖灌胃给药对小鼠酒石酸锑钾扭体反应和大鼠甲醛致痛行为的抑制作用.方法将50只小鼠随机分为生理盐水组,阿司匹林组(100mg/kg)和五味子多糖20,50和100mg/kg不同浓度组.将50只大鼠随机分为生理盐水组,阿司匹林(100mg/kg)组,五味子多糖20,50和100mg/kg不同浓度组.五味子多糖采取灌胃给药,连续给药7d,于第8日给药后进行痛行为学检测.分别给予小鼠腹腔注射0.2,0.5mL/L酒石酸锑钾后观察并记录10min的扭体次数.大鼠左后足底掌侧皮下注射20g/L甲醛50μL后,立即放入20cm20cm25cm的树脂玻璃箱中,记录大鼠60min内每5min出现自发缩足、舔足的持续时间.以缩足和舔足时间之和作为伤害性反应的行为学指标.结果五味子多糖灌胃给药对于小鼠的扭体反应具有显著的抑制作用,且呈一定的剂量依赖性,剂量20,50和100mg/kg下的扭体次数分别为(27.80±5.81)次,(24.90±3.75)次和(15.30±3.43)次,与对照组(32.90±7.40)次相比较,差异具有统计学意义(Plt0.05).50和100mg/kg五味子多糖可显著降低甲醛第一时相和第二时相的伤害性反应表达,而20mg/kg五味子多糖对甲醛疼痛双相反应无抑制作用.结论五味子多糖灌胃给药对于小鼠扭体试验和大鼠甲醛试验两种不同性质的病理性痛都有镇痛作用.【关键词】五味子多糖灌胃镇痛0引言在对镇痛药物的探索研究中,中药、天然药物越来越凸显其药效良好、无成瘾性、不良反应少及资源丰富等优势,已成为现代药物研究的热点.五味子又名五梅子、玄及、会及、山花椒等,木兰科多年生落叶藤本.五味子多糖是从五味子干燥成熟果实中提取的含有五味子总多糖,17种以上氨基酸和16种以上微量元素的混合物[1],具有保肝、抗疲劳、抗衰老、增强免疫等药理作用[23].以往的研究[46]表明,五味子多糖灌胃给药具有明显的镇静催眠作用,但有关其镇痛作用的研究还少见报道.我们利用小鼠扭体试验和大鼠甲醛试验建立两种不同的病理性痛模型,以观察不同剂量五味子多糖灌胃给药是否可产生镇痛作用.1材料和方法1.1材料昆明种小鼠50只,体质量1824g,雌雄兼用SD大鼠50只,体质量180240g,雌雄兼用(第四军医大学实验动物中心提供)五味子多糖(西安新通制药有限公司)阿司匹林(南京制药厂生产,批号920916)酒石酸锑钾,甲醛(西安新通制药有限公司).1.2方法1.2.1实验分组将50只小鼠随机分为生理盐水组,阿司匹林组(100mg/kg),五味子多糖20,50和100mg/kg不同浓度组.每组动物10只.50只大鼠也同样随机分为生理盐水组,阿司匹林组(100mg/kg),五味子多糖20,50和100mg/kg不同浓度组.每组动物10只.五味子多糖和生理盐水组采取灌胃给药,连续给药7d,在第8日给药后进行痛行为学检测.阿司匹林组在第8日五味子多糖和生理盐水组给药的同时采取腹腔注射给药.1.2.2模型制作1.2.2.1小鼠酒石酸锑钾扭体试验给予小鼠腹腔注射0.2和0.5mL/L酒石酸锑钾,给药后观察和记录10min的扭体次数,并计算镇痛率.小鼠一次扭体的判定标准为腹部收缩,四肢伸展,躯干拉伸.镇痛率的计算方法镇痛率()(五味子多糖组/阿司匹林组扭体次数生理盐水组扭体次数)/生理盐水组扭体次数100.1.2.2.2大鼠甲醛试验在大鼠左后足底掌侧皮下注射20g/L甲醛50μL后,立即将大鼠放入20cm20cm25cm的树脂玻璃箱中,用秒表记录大鼠60min内每5min出现的自发缩足和舔足的持续时间.采用Abbott等[7]的方法将缩足和舔足时间之和作为伤害性反应的行为学指标.选择间隔观察时间为5min是因甲醛试验的第一时相时间为05min.统计学处理数据以x±s表示,五味子多糖组和阿司匹林组和对照组之间的差异比较用SPSS11.0软件进行LSDt检验.Plt0.05为差异具有统计学意义.2结果2.1五味子多糖对小鼠扭体反应的影响小鼠酒石酸锑钾扭体试验结果显示,五味子多糖灌胃给药对于小鼠的扭体反应具有显著的抑制作用,且呈一定的剂量依赖性.五味子多糖20mg/kg组,50mg/kg组和100mg/kg组的小鼠扭体次数分别为(27.80±5.81)次,(24.90±3.75)次和(15.30±3.43)次,与生理盐水对照组(32.90±7.40)次相比较差异具有统计学意义(20mg/kg组Plt0.05,50mg/kg组和100mg/kg组Plt0.01),其镇痛率分别为15.5,24.3和53.5.2.2五味子多糖对大鼠痛行为持续时间的影响在大鼠左后足掌面皮下注射20g/L甲醛50μL后,出现典型的双相伤害性反应,即在致痛后立即出现致痛侧的缩足、舔足行为,持续约5min,相对安静约5~10min,再次出现上述伤害性行为表现,持续约40min(图1A).结果表明,较高剂量的五味子多糖(50mg/kg和100mg/kg)可显著降低甲醛第一时相和第二时相的伤害性反应表达,而低剂量的五味子多糖(20mg/kg)对甲醛疼痛双相反应无抑制作用(图1B).bPlt0.01vs生理盐水对照组(n10,x±s).A60min内每5min大鼠的缩足、舔足时间B第一时间(05min)和第二时间(1060min)内大鼠的缩足、舔足时间.图1五味子多糖对大鼠甲醛双相反应的抑制作用(略)3讨论扭体试验和甲醛试验能够模拟不同性质的临床病理性痛,是目前国内外公认的较为可靠的动物疼痛模型,已普遍应用于疼痛机制研究以及镇痛药物评价.本研究采用的痛刺激均为化学刺激,但所引起的疼痛性质是不完全相同扭体法出现的是内脏痛,而甲醛致痛模型出现的是躯体体表痛.研究结果表明五味子多糖对于酒石酸锑钾所致的内脏痛和甲醛所致伤害性行为反应都有显著抑制作用,可为新型镇痛药物的开发与利用提供参考.至于其镇痛机制,目前还少见报道.根据以往的研究[56,8]报道,五味子具有很强的镇静催眠作用并且能够有效治疗环己酰亚胺诱导的健忘症,提示五味子能够参与调节中枢神经系统的兴奋性.对于五味子多糖的镇静催眠作用,Yoshihiro[9]的研究结果表明5羟色胺和前列腺素D2PGD2,作为内源性促睡眠物质,可能参与了这个调节过程.对于环己酰亚胺诱导的健忘症,五味子多糖的治疗作用可以为5羟色胺2受体拮抗剂所增强为5羟色胺1A受体激动剂、γ氨基丁酸A受体拮抗剂和胆碱能受体拮抗剂所减弱[10].因此,我们推测,五味子多糖对于酒石酸锑钾所致的内脏痛和甲醛所致伤害性行为反应的镇痛作用,可能是由于其对于内源性神经递质及其受体的调节作用产生的.然而,揭示其镇痛作用机制还需要进一步的实验研究.【参考文献】[1]张兰杰,张维华,赵珊红.北五味子果实中多糖的提取与纯化研究[J].鞍山师范学院学报,2002,415860.[2]曾靖,丛铮.五味子多糖药理作用的初步观察[J].赣南医学院学报,1995,1511618.[3]YipAY,LooWT,ChowLW.FructusSchisandraeWuweizicontainingcompoundinmodulatinghumanlymphaticsystemaPhaseIminimizationclinicaltrial[J].BiomedPharmacother,2007,619588590.[4]李玉娟,梁鑫淼,肖红斌,等.生、炒酸枣仁镇静催眠作用及化学成分比较[J].沈阳药科大学学报,2003,2013537.[5]HuangF,XiongY,XuL,etal.SedativeandhypnoticactivitiesoftheethanolfractionfromFructusSchisandraeinmiceandrats[J].JEthnopharmacol,2007,41103471475.[6]霍艳双,陈晓辉,李康,等.北五味子的镇静、催眠作用[J].沈阳药科大学学报,2005,222126128.[7]AbbottFV,FraklinKB,WestbrookRF.Theformalintestscoringpropertiesofthefirstandsecondphasesofthepainresponseinrats[J].Pain,1995,606912.[8]HsiehMT,WuCR,WangWH,etal.TheamelioratingeffectofthewaterlayerofFructusSchisandraeoncycloheximideinducedamnesiainratsInteractionwithdrugsactingatneurotransmitterreceptors[J].PharmacolRes,2001,4311722.[9]YoshihiroU.MolecularmechanismofsleepinducedbyprostaglandinD2[J].IntCongressSeries,2002,1233373376.[10]JinZY,KuBS,YaoHY,etal.Relationshipbetweenthefunctionof5HT1A,2receptorsandwakingsleepingstages[J].ChinPharmacolBull,2002,16208211.

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