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大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养与鉴定.doc

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大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养与鉴定.doc

大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养与鉴定徐索文肖平喜陈健文乐康沈晓燕黄河清刘培庆【摘要】目的建立大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养模型,为体外研究动脉粥样硬化的发病机制提供重要的实验手段。方法采用改良的植块贴壁法,成功建立大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的培养模型;分别用倒置显微镜和SABC试剂盒对培养细胞进行形态学观察、免疫组织化学和免疫荧光鉴定(平滑肌细胞特异性的α-SM-actin)。结果原代培养的血管平滑肌细胞在接种后3天开始从组织块周围游出,光镜下培养细胞呈梭形,放射状生长和典型的“峰谷”状生长;免疫组化和荧光染色显示胞浆内α平滑肌肌动蛋白阳性表达,证实培养的细胞为血管平滑肌细胞。结论本法简便、可靠、经济、短期内可获大量高纯度、功能良好的血管平滑肌细胞,可作为研究动脉粥样硬化和移植血管再狭窄机制的有效模型。【关键词】大鼠;胸主动脉;植块法;血管平滑肌细胞[Abstract]ObjectiveToestablishtheculturemodelofrataortavascularsmoothmusclecells(VSMCs)toprovideimportantexperimentalmethodforthepathogenesisresearchofatherosclerosisinvitro.MethodsEmployingtheexplantstechnique,theprimaryandsub-culturewerecompletedbymodifiedtissue-pieceinoculationandtrypsindigestionrespectively.Theculturedcellswereidentifiedbyphasecontrastmicroscopyandimmunohistochemicalandimmunofluorescentstaining.ResultsAfter3daysofinoculationoftissue-pieces,VSMCsmigratedfromthevesselpieces.Theculturedcellsshowedthetypical“hillsandvalleys”morphologicalfeaturesunderthemicroscope.Immunohistochemicalandimmunoflu

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