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葛根芩连汤对中医大肠湿热证模型大鼠血清IL-1, IL-2 和IL-6 的影响[J].pdf

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葛根芩连汤对中医大肠湿热证模型大鼠血清IL-1, IL-2 和IL-6 的影响[J].pdf

化合物中,纤维蛋白分子结构最不对称,可通过红细胞表面的吸附,以本身携带的正电荷来抵消红细胞表面的负电荷,把相邻的红细胞桥联起来形成缗线状聚集体,纤维蛋白原的这种桥联作用促进了红细胞聚集。红细胞聚集的病理生理意义在于它可引起低切变率下血液黏度升高,使血流阻力增加,造成微循环淤滞。纤维蛋白原作为一种链状高分子化合物,在血浆中形成网状结构,对血浆黏度的影响较其它高分子化合物大得多,它是造成血浆高黏特性的重要原因之一。3.3血浆OXLDL与血液流变学指标的相关性本研究结果表明红细胞压积和纤维蛋白原水平的升高是影响全血黏度以及血浆黏度的两个重要因素,也是促使脑梗死形成的原因之一。这个结论与Thomas等4的报道相符。血浆OXLDL与血液流变学异常有着密切的关系。近年来的研究表明,OXLDL可以直接影响血小板的一些功能。Wilson等5发现,OXLDL能显著抑制蛋白C的活化,刺激组合因子的表达,导致凝血酶的生成,从而促进动脉粥样硬化和血液流变学异常,同时OXLDL具有增强内皮C合成分泌纤溶酶原激活物抑制剂1的作用,从而影响纤溶系统。另外,OXLDL还可以通过抑制一氧化氮的合成和生物学作用,继而损伤舒血管特性,加速血管的紧张性,进一步促进血流变学异常。本文对血浆OXLDL与血液流变学指标相关性分析显示,脑梗死患者血浆OXLDL与全血高切黏度、全血低切黏度、红细胞压积和红细胞变形指数呈显著性正相关,从而提示OXLDL升高与血流变形异常可能在脑梗死发生、发展中起着一定的协同作用。综上所述,脑梗死患者大部分都有血浆OXLDL水平和血液流变学指标的改变。OXLDL增高可导致血管壁粥样斑块的形成以促使凝血活性的增强。纤维系统的抑制,血液流变学指标的改变,导致血流缓慢,加速血小板聚集和黏附,促进血栓形成,导致脑梗死的发生。因此,同时测定血浆OXLDL浓度和血液流变学指标对于脑梗死的诊治及疗效观察具有重要的实用价值。4参考文献1SteinbergD.Modificationsoflowdensitylipoproteinthatin2creaseitsatherogenicity.NEng1JMed,1998,3209152Hughesh,MathewsB,lenzMLetal.CytoxicityofoxidizedLDLtoporcineaorticsmoothmusclecellsisassociatedwiththeoxysterols7ketocholoesteroland7hydroxycho2lescerol.ArteriosclerThrob,1994,147117711783TilingT.FleatwoodG,StoneDetal.Theresistanceoflowdensitylioproteintooxidationpromotedbycopperanditsuseasanindexofantioxidanttherapy.Atherosclerosis,1996,11916994ReschKL,EmstE,MatraiAetal.Fibrinogenandviscosityasriskfactorsforsubsequent.Medicine,1992,1173715WilsonBD,PitasRE,RodgersGM.RegulationofendothelialcellproteinCactivationbynativeandoxidiatedlowdensitylipoprotein.SeminThrombHemost,1992,181720040210收稿,责任编辑郭青基金项目国家中医药管理局中医药科学技术研究基金资助NO2000JP16作者简介李学,男,1965年出生。硕士研究生学历,副主任医师。主要从事中西医结合防治传染病的工作。葛根芩连汤对中医大肠湿热证模型大鼠血清IL1、IL2和IL6的影响李学1魏连波2罗炳德2慕澜1佟丽2陈育尧21武警河北总队医院内三科,石家庄0500812第一军医大学珠江医院,广州510252摘要目的通过检测大肠湿热证模型大鼠血清IL1、IL2和IL6含量的变化,探讨大肠湿热证的客观指标。方法采用综合因素造模饮食加气候环境加致病生物因子复制成大肠湿热证动物模型,应用放免法检测模型大鼠血清IL1、IL2和IL6治疗前后的变化并给予清热利湿传统方药葛根芩连汤治疗,观察动物模型给药后的变化。结果该模型在发病条件,主要症状、体征、病变脏腑以及病理变化以直肠和回肠为主等方面均近似于中医大肠湿热证型,模型大鼠血清IL1、IL2和IL6含量升高,经葛根苓连汤治疗后,症状、体征消失和病理变化基本恢复,检测指标均有明显改善。结论血清IL1、IL2和IL6含量的升高可能是大肠湿热证的部分客观指标。685武警医学MedicalJournaloftheChinesePeoplesArmedPoliceForcesVol.15No.08200408出版关键词大肠湿热证动物模型血清细胞因子变化葛根芩连汤EffectsofGegenQinLianTangonserumIL21,IL22andIL26inratmodelsoflargeintestinedamp2heatsyndromeLIXue,WEILianbo,LUOBingde,MULan,TONGLi,andCHENYuyao.ThirdDepartmentofInternalMedicine.HebeiProvincialCorpsHospitalChinesePeoplesArmedPoliceForces,Shijiazhuang050081,ChinaAbstractObjectiveTostudytheobjectiveindicesoflargeintestinedamp2heatsyndromebyobservingthechangesofserumIL21,IL22andIL26inratmodelsoflargeintestinedamp2heatsyndrome.MethodsTheanimalmodelsoflargeintestinedamp2heatsyndromewerede2velopedbymultiplefactorsdiet,climateandpathogenicbiologicalfactors.ThechangesofserumIL21,IL22andIL26inratsweredetectedbyRIAbeforeandaftertreatmentwithGegenQinLianTangDecoctionofPueraria,ScutellariaandCoptis.ResultsTheanimalmodelde2velopedsymptoms,signsandpathologicalchangesquiteamalogoustolargedamp2heatsyndromeintraditionalChinesemedicine.TheserumIL21,IL22andIL26levelsinratmothelswereincreased.Thesymptous、signsandpathologicalchangeswereamelioratedorreturnedtonormalaf2tertreatmentwithGegenQinLianTang,andatthesametimethelaboratoryprofileswereamelioratedsignificantly.ConclusionTheelevationofserumIL21,IL22andIL26levelsmayserveasanobjectiveindextolargeintestinedamp2heatsyndrome.KeywordsLargeintestinedamp2heatsyndromeAnimalmodelSerumcytokinesGegenQinLianTang近年来,关于中医湿热证的客观化研究较多,但大肠湿热证模型与细胞因子的关系尚未见报道。本文通过建立大肠湿热证大鼠模型,检测模型大鼠血清IL1,IL2和IL6含量的变化探讨中医大肠湿热证的客观化指标。1材料和方法1.1实验材料SD大鼠由华南实验动物中心提供,清洁级,雌雄各半,体重180~220g,高糖高脂饲料由华南实验动物中心饲料厂生产。侵袭性大肠杆菌标准株由第军医大学流行病学教研室提供,菌号44813,浓度1.0109/ml,采用营养琼脂斜面培养24h,生理盐水洗脱,麦氏管比浊。高温仓由第一军医大学热带病研究所高温研究室提供,全封闭式,自动调节温度、湿度。倒置显微镜DMIRB型,德国LEICA公司生产透射电子显微镜JEOE型,日本。葛根芩连汤由葛根黄芩,黄连甘草等组成,按照1g/ml制成灌胃液。112实验方法1.2.1造模方法参照杨运高等1实验方法,将SD大鼠32只随机分为正常对照组、大肠湿热证模型组、葛根芩连汤治疗组、未治疗组4组,每组8只。正常对照组普通饲料饲养,自然环境温度22℃,相对湿度65。大肠湿热证模型组先以高糖高脂饲料喂养10d,然后将大鼠置于高温仓温度35℃,相对湿度85,每天持续8h,连续3d后以侵袭性大肠杆菌1.0109/ml灌胃2ml/只,24h后再灌胃1次,在自然环境下喂养1d。葛根芩连汤治疗组按上述方法造模后,给予葛根芩连汤3ml/200g体重灌胃,分为2次/d,共计7d。未治疗组按上述方法造模后,不予任何治疗。1.2.2检测方法观察指标根据大肠湿热证的临床特点,观察大鼠体温、毛发、精神状态、活动能力、食量、粪便、舌苔等情况。1.3统计学处理采用SPSS10.0统计软件包,作t检验,进行显著性分析。2结果2.1大鼠一般表现动物入高温仓后肛温有一定程度的升高,为37.6℃~3810℃,出现毛发蓬松,蜷缩懒动,食欲不振,但无其他明显变化注射大肠杆菌4h后,肛温达到峰值39.7℃左右,随后逐渐下降至38.5℃左右,绝大部分大鼠饮水量和尿量减少,肛门红肿充血,甚至肛门扩张,模型组大鼠大部分出现大便稀软或溏泻,部分出现黏液脓血便,舌苔白腻或黄腻。给予葛根芩连汤灌胃4h后肛温开始下降,肛温波动在38℃左右,便溏、食欲不振、行动呆滞及肛门红肿等症状逐步缓解,大部分在治疗的第5天~6天完全恢复。未治疗组大鼠7d内大部分症状无明显缓解,其中有1只在第6天死亡。2.2大鼠肠组织肉眼检查结果大肠湿热证模型组和治疗对照SD大鼠几乎全部出现弥漫性的肠管黏膜充血、水肿,有大量黏液和纤维蛋白渗出,部分大鼠肠管局部有小出血点,这些病变以十二指肠、空肠、回肠和乙状结肠、直肠明显,而正常对照组大鼠肠管无任何病理变化葛根芩连汤治疗组大鼠肠管恢复情况良好,基本和正常对照组相同。2.3大鼠血清IL1,IL2,IL6含量测定见表1。785武警医学MedicalJournaloftheChinesePeoplesArmedPoliceForcesVol.15No.08200408出版表1大鼠血清IL1,IL2,IL6含量测定x±s,ng/ml组别nIL1IL2IL6大肠湿热证模型组80.501±0.0431.32±0.89128.1±9.12①葛根芩连汤治疗组80.221±0.0530.40±0.2882.33±11.24②未治疗组80.408±0.0441.01±0.3371.24±10.55③自然对照组80.210±0.0740.142±0.1877.38±42.37注与自然对照组比较①P0.053讨论根据现有的免疫学理论,T淋巴细胞可分泌多种活性细胞因子,这些细胞因子参与淋巴细胞及其他细胞的生长、分化,并借此增强或抑制免疫功能。MacdonaldTT报告特有的细胞因子基因缺失鼠会发展为任意的炎症性肠疾病2,这说明细胞因子与炎症密切相关。白细胞介素IL类是一族重要的细胞因子,其中IL1,IL2,IL4,IL6和IL8等均有一定的促炎性作用,对各种炎性细胞的活化,降低全身血管阻力和产生急性期蛋白有作用代中期。肿瘤坏死因子αTNFα、IL1β、IL6和IL8都是前炎症细胞因子,其中IL1β是由内毒素刺激人单核细胞产生的主要介质之一,它被注入人体后可引起发热,厌食、关节痛等,同时可出现血流动力学异常、中性粒细胞增多等等。IL2是具有免疫调节活性的细胞因子,主要由T细胞产生。IL6是具有炎性介导活性的细胞因子,主要由单核巨噬细胞及某些激活的T细胞产生。最新研究发现IL6除具有免疫增强作用外,还参与多种炎性疾病的病理生理过程3,如Maskin4报道院内获得性革兰氏阴性菌肺炎病人血浆IL6浓度增高。中医六腑病证动物模型研究开始于上世纪90年,大肠湿热证以生物因素、化学因素、模拟症状、客观指标、中药复健治疗为主要依据研制动物模型,我们采用以高脂高糖高温高湿侵袭性大肠杆菌为本研究所用模型。湿热证病位涉及上中下三焦,但偏于中下二焦,涉及脾胃、肝胆,肾、膀胱、肠等多脏腑。薛生白云中气实则病在阳明,中气虚则病在太阴,太阴内伤,湿饮停聚,客邪再至,内外相引,故病湿热,此皆先有内伤,再感客邪。目前大量研究证实湿热证本质与机体的免疫及炎症过程有关,所以其临床研究也多从病理生理改变进行探讨。大肠湿热证模型中IL1,IL2和IL6含量的变化,从一个侧面进步说明湿热证本质与炎症及免疫病理关系密切。葛根芩连汤中的葛根升阳止泻,黄芩和黄连清热泻火、清热燥湿利尿,甘草缓急止痛,四药合用,治疗大肠湿热证效果良好现代药理研究证实黄芩、黄连均有抗炎抗病毒作用,葛根解热消炎,甘草利尿解毒,因此综合起效,能够降低体内IL水平,达到治疗肠炎等炎症性疾病的效果。4参考文献1杨运高,李智军,吴仕九等.温病湿热证动物模型研制的方法学比较.中国中医基础医学杂志,1984,431722MacDonaldTT.Cytokinegenedeletedmiceinthestudyofgastrointestinalinflammation.EurJGastroenterolHepatol,1997,911105110553JamesSS,lianatiS,JorgeGetal.TyrosinephosphorylationofViaStimulatesIL6ProductioninmastcellbyaRac/cJunNterminalKinasedependantpathway.JImmunol,1999,16327674MaskinB,FortanPA.Evaluationofendotoxinreleaseandcytokineproductioninducedbyantibioticsinpatientswithgramnegativenosocomialpneumonia.CritCareMed,2002,302034935420040111收稿,责任编辑董兵885武警医学MedicalJournaloftheChinesePeoplesArmedPoliceForcesVol.15No.08200408出版

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