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6 种中药多糖对诱导树突状细胞成熟及刺激T 细胞抗肿瘤作用的比较.pdf

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6 种中药多糖对诱导树突状细胞成熟及刺激T 细胞抗肿瘤作用的比较.pdf

实用医学杂志2009年第25卷第22期作者单位:056002河北省邯郸市,河北工程大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系组胚教研室多数补益中药多糖具有免疫功能调节的活性[1],但不同中药多糖对免疫功能调节作用强弱的比较研究,文献报道甚少,因此,本文筛选出对免疫功能影响较大的枸杞子多糖(lyciumbararumpolysaccharide,LBP)、猪苓多糖(polyporusumbellatuspolysaccharide,PUP)、茯苓多糖(poriacocospolysaccharide,PPS)、灵芝多糖(ganodermalucidumpolysaccharide,GLP)、黄芪多糖(astruguspolysaccharide,APS)和当归多糖(amgelicasinensispolysaccharide,ASP)6味中药多糖,通过其对人树突状细胞(dendriticcell,DC)成熟、刺激T细胞增殖能力和对肿瘤的杀伤的影响进行了比较,以筛选增强免疫功能较强的中药多糖,为中药多糖进一步开发和利用奠定试验基础。1材料与方法1.1材料新鲜人外周血购自邯郸市血站。淋巴细胞分离液(Ficoll,1.077g/μL)购自上海试剂二厂。GM-CSF、IL-2和IL-4购自德国R&D公司。尼龙毛柱购自FENWAL(USA)。鼠抗人MHCⅡ、CD86、CD83,即用型二步法生物素检测试剂盒(PV9000)、FITC标记的鼠抗人IgG抗体购自北京中杉生物技术有限公司。6种中药多糖均购自北京中杉生物技术有限公司。1.2方法1.2.1DC的诱导培养取正常人外周血200μL,以淋巴细胞分离液分离单个核细胞于培养皿培养2h后,取贴壁细胞即单核细胞,加入GM-CSF1μL(1000U/μL);IL-41μL(500U/μL)培养7d后,收获的细胞分别加入终浓度为100μg/μL的6种中药多糖,加入等量的RPMI-1640作为对照;37℃培养48h后收集细胞。观察树突状细胞的形态变化,免疫细胞化学法检测其表面标志的表达。1.2.2肿瘤细胞全抗原致敏未成熟树突状细胞(immaturedendriticcell,imDC),诱导分化为成熟树突状细胞(maturedendriticcell,mDC)常规培养肝癌细胞株Bel-7402,收集处于对数生长期的细胞并反复冻融(-80℃/室温)4次

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