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cRGD-氧化铁纳米粒的构建及应用于核磁共振成像诊断中的动物研究.pdf

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cRGD-氧化铁纳米粒的构建及应用于核磁共振成像诊断中的动物研究.pdf

肿瘤2010年4月第3O卷第4期TumorVo1.30,No.4,April,2010·277·DOI:10.3781/j.issn.1000-7431.2010.04.003BasicResearch·基础研究cRGD-氧化铁纳米粒的构建及应用于核磁共振成像诊断中的动物研究丁永梅,周彩存,赵印敏,李玮,孟淑燕(同济大学附属上海市肺科医院肿瘤科,上海200433)[摘要]目的:构建肿瘤靶向的核磁共振成像(magneticresonanceimaging,MRI)阴性造影剂纳米粒,并初步探讨其在肿瘤MRI中的应用。方法:化学共沉淀一步法制备超小型超顺磁性氧化铁(uhrasmallsuperparamagneticironoxide.USPIO)纳米粒。采用化学交联法将含有精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸(Arg—Gly-Asp,RGD)序列的环形短肽(cyclicRGD,cRGD)与USPIO共价结合,制备具有整合素靶向作用的超顺磁性造影剂,并对其进行理化性质的检测。采用普鲁士兰染色法检测cRGD—USPIO和USPIO与人肺腺癌A549细胞及人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)的特异性结合能力。建立A549裸鼠移植瘤模型,尾静脉注射USPIO和cRGD—USPIO,行MRI检测,评价cRGD—USPIO对肿瘤MRI信号增强的作用。结果:成功制备获得cRGD—USPIO纳米粒,其核心纳米粒径为5—10nm,平均粒径为(43.97±10.10)nm,比饱和磁化强度为59.94A·m·kg~。细胞结合实验结果提示,与USPIO组比较,cRGD—USPIO组阳性染色明显增强。动物体内MRI诊断结果显示,与USPIO组比较,cRGD—USPIO组肿瘤信号明显降低(P10,反应1h;停止反应后得到黑色液体,冷却后4000Xg离心10rain,弃去沉淀,保留上清液,加入适量的冰乙酸调节溶液pH值至7.4;超声振荡5min,反应液灌入透析袋中透析24h,每2h更换一次透析液,透析后的反应液经过琼脂糖凝胶色谱柱分离纯化,置超滤离心管,4000Xg离心30min,收集滤液4cC保存备用。1.4cRGD—USPIO的制备吸取0.5mLUSPIO纳米粒,加入0.5mLNalO(0.1mol/L)和0.2mol/L的乙酸钠溶液,室温条

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