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HPLC 法测定丙泊酚注射液中乙二胺四乙酸二钠含量[J].pdf

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HPLC 法测定丙泊酚注射液中乙二胺四乙酸二钠含量[J].pdf

HPLC法测定丙泊酚注射液中乙二胺四乙酸二钠含量耿志旺,刘蔚,刘茜,乐健*(上海市食品药品检验所,上海201203)摘要目的:建立丙泊酚注射液中乙二胺四乙酸二钠含量的HPLC检测方法。方法:采用PhenomenexLunaC18柱(100mm4.6mm,5μm),按“4.5”测定。结果分别为0.004860%,0.004871%,表明方法耐用性好。—785—药物分析杂志ChinJPharmAnal2011,31(3)5含量测定按“2.2供试品溶液”测定3个不同批号丙泊酚注射液(批号分别为:GL945、GL947、GM745),乙二胺四乙酸二钠含量别为0.004712%,0.004821%,0.004858%。6讨论流动相A中,四丁基氢氧化铵是离子对试剂[2],四丁铵基与EDTA合铜离子结合成中性离子对,保留于C18固定相。反应如下:[Cu(EDTA)]2-+2(C4H9)4N→+[(C4H9)4N]2[Cu(EDTA)]。当pH降低,H+浓度升高,与(C4H9)4N+竞争和[Cu(EDTA)]2-结合,离子对作用减弱,峰形变差,保留时间减少。但过高的pH会损害色谱柱和液相系统,所以pH6.5~7.0为最佳条件。目前,进口药品注册标准采用乙腈-异丙醇-四丁基氢氧化铵溶液三元体系为流动相,等度洗脱,该法测定受辅料干扰严重,在连续测定时柱效下降,峰形进一步变差。其原因是注射液中未提取完全的脂肪酸以及其他成分保留于色谱柱中,不能被洗脱。本文采用梯度洗脱,乙二胺四乙酸二钠于6min前出峰,洗脱液的是流动相A。其组成是四丁基氢氧化铵-乙腈二元体系,乙二胺四乙酸二钠呈良好峰形,不受干扰。乙二胺四乙酸二钠出峰后,切换至流动相B,其组成是甲醇-水(9∶1),洗脱能力较强,能使注射液中保留于色谱柱中的成分洗脱出来,避免柱效恶化,使连续的批量测定成为可能。取“4.5”中供试品溶液,色谱条件改为流动相A等度洗脱,洗脱时间10min。连续进样10次后,乙二胺四乙酸二钠峰严重前拖尾,柱效下降,如图2(A)所示。按本文梯度洗脱,连续测定30h,峰形依然良好,柱效未改变,图谱如图2(B)所示。图2等度洗脱10次进样后供试品色谱图(A)、梯度洗脱30h连续进样后供试品色谱图Fig2HPLCchromatogramsofpropofolinjectionafter10timesinjectionsu

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