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SYBR Green Ⅰ 实时荧光PCR 在染色体常见非整倍体诊断中的应用.pdf

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SYBR Green Ⅰ 实时荧光PCR 在染色体常见非整倍体诊断中的应用.pdf

SYBR%GreenⅠ实时荧光PCR在染色体常见非整倍体诊断中的应用刘丽娟1,熊丽2,刘洁2,邓康2,刘思平2,吴瑞枫2,贾蓓2,宋兰林2,钟梅2,曾嵘1(南方医科大学1基础医学实验教学中心,2南方医院妇产科,广东广州510515)摘要:目的探讨SYBR%GreenⅠ实时荧光PCR技术用于非整倍体诊断的可行性。方法选择13号染色体上的ABCC4基因、18号染色体上的TYMS基因、21号染色体上的DSCR3基因、X染色体上的HPRT2基因和Y染色体上的SRY基因为目的基因,以12号染色体上的管家基因GAPDH为参照基因,选取SYBR%GreenⅠ作为荧光染料,采用双标准曲线相对定量PCR法进行检测,并与核型分析结果进行比对。结果检测13号染色体时,计算目的基因与参照基因比值,正常标本组(0.90±0.31)与三体标本组(1.39±0.12)的差别有显著意义(P=0.003);检测18号染色体时,正常标本组(1.07±0.44)与三体标本组(1.66±0.12)的差别有显著意义(P=0.000);检测21号染色体时,正常标本组(0.84±0.27)与三体标本组(1.73±0.54)的差别有显著意义(P=0.000);检测X染色体时,45,X组(0.62±0.12)与46,XY组(0.63±0.25)比值无差别(P=0.965),46,XX组(1.32±0.37)与47,XXY组(1.20±0.35)比值无差别(P=0.326),单个拷贝X(包括45,X、46,XY)(0.63±0.23)与两个拷贝X(46,XX、47,XXY)(1.26±0.36)比值差别有统计学意义(P=0.000);检测Y染色体时,正常女性(46,XX)无目的基因扩增,正常男性组(46,XY)(1.57±0.54)与三体标本组(47,XYY)(3.08±0.15)比值差别有统计学意义(P=0.003)。结论SYBR%GreenⅠ实时荧光定量技术可用于快速诊断染色体非整倍体。关键词:非整倍体;实时荧光PCR;SYBR%GreenⅠ中图分类号:R714.21%%%%%%%%文献标识码:A%%%%%%%%文章编号:1673-4254(2010)01-0011-05ClinicalapplicationofSYBRGreenIreal-timefluorescencequantitativePCRfordi

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