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丹参注射液眼部电离子导入治疗玻璃体出血的实验研究.pdf

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丹参注射液眼部电离子导入治疗玻璃体出血的实验研究.pdf

©19942009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http//www.cnki.net实验研究丹参注射液眼部电离子导入治疗玻璃体出血的实验研究薛淑红王燕余杨桂沈兰芳李志英柯雪红Treatmentofdansheninjection2iontophoresisonvitreoushemorrhageinrabbitXueShuhong,WangYan,YuYanggui,ShenLanfang,LiZhiying,KeXuehong.DepartmentofOphthalmology,GuangzhouHuaduHospitalofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou510800,ChinaAbstractObjectiveThisstudywastoinvestigatetheeffectandmechanismofdansheninjection2iontophoresisonvitreoushemorrhage.MethodsThevitreoushemorrhagemodelwasinducedbyinjectingintovitreousof012mLautohemorrhagein36eyesof18NewZealandwhiterabbits.2mLofdanshensolutionwasiontophorezedviaocular2cervical2occiputfor15minutespertimeandonceperdayfor20timesindansen2treatedgroup9rabbits,and9modelrabbitswereascontrolgroup.Aqueoushumorandvitreouswerewithdrawnatdifferenttime,andthedrugconcentrationinaqueoushumorandvitreousweredetectedwithhigh2pressureliquidchromatographyHPLC.Theabsorptionstatusofvitreoushemorrhagewasclinicallyevaluatedbyophthalmoscope.ResultsTherewasnosignificantdifferenceindansenconcentrationbetweenvitreousandaqueoushumorin015hoursand2hoursP0105,butsignificantdifferencewasfoundin5hoursP0101.Noobviousdifferencewasseeninvisualityoffundusbeforetreatmentbetweenthetwogroups.Indansen2treatedgroup,theabsorptionofvitreoushemorrhagewasquickerthaninthecontrolgroup,andthenumberofvisualfunduswasremarkblelyincreasedincomparisonwithcontrolgroup,showingthattheeffectofdansheninjection2iontophoresiswasbetterthanthatincontrolgroup.ConclusionForvitreoushemorrhage,dansheninjection2iontophoresisisaneffectiveandsimpleapproachtoacceleratingtheabsorptionofvitreoushemorrhageandshortenthecourseoftreatment.Keywordsvitreoushemorrhagedansheniontophoresis摘要目的探讨丹参注射液电离子导入治疗玻璃体出血的疗效及机制。方法将兔实验性玻璃体出血模型18只36只眼分为对照组和治疗组,对照组不做任何治疗,观察出血的自然转归治疗组予以丹参注射液眼部电离子导入治疗。分不同时间点抽取兔房水和玻璃体,用高效液相色谱法测定房水和玻璃体中的药物质量浓度。用检眼镜观察眼底玻璃体出血吸收情况。结果对兔实验性玻璃体出血,丹参注射液电离子导入组出血吸收较对照组快。结论丹参注射液电离子导入法可促进玻璃体出血的吸收,缩短病程,是一种简易而有效的眼局部治疗方法。关键词玻璃体出血丹参电离子导入疗法分类号R98811R776文献标识码A文章编号10032080820081120845203玻璃体是无血管的结构,玻璃体出血多因眼内出血性疾病所致。玻璃体的这一生理特点决定了玻璃体内一旦发生出血,则吸收困难。玻璃体出血如果长期不吸收,可引起纤维增生、机化,进而继发增生性玻璃体视网膜病变proliferativevitreoretinopathy,PVR、视本课题为广东省教育厅自然科学研究项目资助200074作者单位510800广州市中西医结合医院眼科薛淑红510400广州中医药大学第一附属医院眼科王燕、余杨桂、沈兰芳、李志英,实验中心柯雪红通讯作者薛淑红Emailshuhongxueyahoo.com.cn网膜脱离或引起继发性青光眼等并发症,严重损害视功能,甚至导致失明。目前中西医对本病的治疗均以全身用药或手术为主,如赵凯1报道应用中药口服治疗玻璃体积血,程毅力等2、符辰雅等3报道应用t2PA、安妥碘治疗玻璃体积血,宋莉等4、张保松等5报道玻璃体切割术治疗玻璃体积血,但上述疗法均属于全身疗法,因而缺乏眼局部治疗的方法。为探讨有效的眼局部治疗方法,我们用丹参注射液眼部电离子导入治疗实验性兔玻璃体出血,取得较为满意的疗效,报告如下。548眼科研究2008年11月第26卷第11期©19942009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http//www.cnki.net1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物普通级健康新西兰纯种大白兔18只广州穗北实验兔养殖场提供,体重500~750g,雌雄各半。实验前均进行眼部检查,外眼及眼底正常者方选用。1.1.2药物与试剂丹参注射液东台市康怡制药有限公司提供,批号01011121。对照品丹参素钠中国药品生物制品检定所提供,批号08552200102甲醇色谱纯,磷酸二氢钠分析纯,十二烷基磺酸钠分析纯,高氯酸优极纯。1.1.3实验仪器YD21眼科专用离子导入仪中国HP1050A型高效液相色谱仪、6010型紫外可见分光光度计美国惠普公司AE2200电子分析天平瑞士梅特勒公司WD216A型高速离心机上海万达生物工程有限公司。1.2方法1.2.1玻璃体出血动物模型的制备将健康实验兔用1硫酸阿托品滴眼液散瞳,4戊巴比妥钠1mL/kg耳缘静脉注射麻醉,015丁卡因滴眼液结膜表面麻醉。用1mL注射器抽取耳缘静脉血015mL备用于1点钟方位距角巩膜缘3~4mm处,用7号针头直接刺透巩膜,用1mL注射器抽取玻璃体012mL迅速于10点钟方位距角巩膜缘3~4mm处向玻璃体腔内注入自血012mL立即拔出针头,消毒棉球轻压伤口10s,滴0125氯霉素滴眼液1~2滴。1.2.2分组及治疗方法18只模型兔随机编为1~18号,单号为对照组,双号为治疗组。对照组不予任何治疗,观察玻璃体出血的自然转归。治疗组予以丹参注射液眼部电离子导入,用眼颈导入法。导入极性。将实验兔固定于兔笼中,用2mL注射器抽取丹参注射液2mL,眼内滴4滴,剩余药液均匀地洒于4cm4cm眼垫上,其上置5cm4cm治疗电极眼垫,8cm6cm非治疗电极棉垫置于家兔颈枕部。电流强度1mA。每日1次,每次15min,10次为1疗程,连续2个疗程。1.2.3结果观察于用药后015、2、5h抽取房水和玻璃体进行药物质量浓度的测定,用高效液相色谱法HPLC测定房水和玻璃体中的丹参素质量浓度。通过直接检眼镜观察眼底可见度,每日以检眼镜观察眼内出血的情况。1.3统计学方法采用SPSS11.5.1统计学软件进行分析。房水及玻璃体内药物浓度及丹参素药物峰面积A的关系用直线相关与回归分析,治疗前后的疗效观察资料比较用秩和检验。P0105为差异有统计学意义。2结果2.1疗效评判标准眼底可见度按Forrester5级分类法记录6。Ⅰ级玻璃体完全不透明,无红光反射Ⅱ级有红光反射,但未能看见眼底解剖标志Ⅲ级玻璃体混浊模糊,可见部分眼底解剖标志Ⅳ级玻璃体混浊,可清晰看见眼底解剖标志Ⅴ级玻璃体清晰,眼底清楚可见。2.2各时间点房水和玻璃体内丹参的质量浓度以丹参素药物峰面积A为纵坐标Y,以药物标准浓度为横坐标X进行线性回归,求得丹参素在兔房水和玻璃体中的线性回归方程为Y321660X51164,r019998P0101,丹参素在0152~8132μg/mL范围内线性关系良好。最低检测限为0108μg/mL。丹参素在低、中、高三种质量浓度的回收率均大于90,平均回收率为931417,日内和日间RSD均小于10。用药后各时间点房水和玻璃体中丹参素质量浓度检测结果见表1。结果显示兔房水和玻璃体内丹参素的质量浓度在1/2h和2h差异无统计学意义,5h时差异有统计学意义P0101,房水中质量浓度大于玻璃体中。表1用药后各时间点房水和玻璃体中丹参素的质量浓度x±sTable1Theconcentrationofdanseninaqueoushumorandvitreousafterinjectionofdansenx±sTimehAqueoushumorVitreousADanshenμg/mLADanshenμg/mL0.594.943±7.9973.065±0.24588.841±5.3832.880±0.165216.230±1.6400.655±0.05014.596±1.7710.605±0.054515.823±1.8520.643±0.05712.283±1.1240.534±0.034ccP0101vsrespectivedanshenvalueinaqueoushumorAdrugpeakarea2.3疗效分析治疗前治疗组与对照组眼底可见度的比较差异无统计学意义,提示两组治疗前和治疗后20d眼底的可见度比较差异均有统计学意义表2,说明玻璃体出血有自限倾向。但两组治疗后眼底可见度的比较差异有统计学意义,治疗组治疗后眼底可见度比对照组清晰,说明丹参离子导入可促进玻璃体出血的吸收表2。本组实验过程中,未发现有对眼组织造成损害的不良反应。648ChinOphthalRes,November2008,Vol.26,No.11©19942009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http//www.cnki.net表2治疗组和对照组治疗前后眼底可见度比较眼Table2ThecomparisonofeyenumberoffundusvisualitybetweendansengroupandcontrolgroupeyesGroupEyesinForrestergradinginpreopEyesinForrestergradinginpostopcⅠⅡⅢⅣⅤⅠⅡⅢⅣⅤControl012600021411Treated014400008100P0.4630.006cP0101vsrespectivepreopgrading3讨论眼部电控药物离子导入是利用电场作用和电荷同性相斥、异性相吸的特性,使无机化合物或有机化合物药物离子、带电胶体微粒经过眼睑皮肤和角膜进入眼内,达到治疗眼病的目的7。眼球组织结构特殊,眼角膜为无血管组织,药物离子进入后,不易马上被血液循环带走,可产生较长时间的作用房水和玻璃体是良导体,眼睛电阻抗很低,仅100Ω左右,所以眼睛是最适合非脂溶性药物离子直流电导入的器官8。丹参为唇行科植物丹参的干燥根,是临床常用的活血化淤药物。丹参素是丹参水溶性成分中的主要有效成分9。药理研究证实丹参素具有改善微循环障碍和血液流变学的作用。丹参素能够降低血小板黏性,促进纤维蛋白溶解,对抗血栓形成及凝血,消除血液淤滞同时能够加速开放毛细血管网,活跃微循环,从而改善细胞缺血缺氧所致的代谢障碍,促进组织修复和再生。目前丹参注射液已广泛应用于心脑血管疾病、骨质增生以及眼底出血等循环障碍性疾病的治疗,成为临床上常用的抗血栓疾病的有效药物之一。本实验选用丹参注射液,用电离子导入的方法,把丹参素直接导入到眼组织中,治疗实验性玻璃体出血,测定其在房水、玻璃体中的药物质量浓度、作用时间和疗效。结果显示,经眼部丹参注射液电离子导入治疗后,兔眼的房水、玻璃体中均含有丹参注射液的有效成分丹参素。由表1可见,用药后1/2h丹参素的质量浓度在房水和玻璃体中达到高峰,2h后迅速降低,5h内维持在此水平,提示丹参素发挥作用较快,但高质量浓度维持时间不长5h后个别兔略有升高,与个体差异、取样时间或离子导入的蓄积作用有关,连续治疗可能达到较好疗效。实验过程显示对照组眼底可见度治疗前后对比,差异也具有统计学意义,说明玻璃体出血有自然吸收的倾向。但是,治疗组玻璃体出血吸收的时间较对照组短。此外,我们还对兔模型眼进行了B型超声检查,玻璃体混浊治疗后较治疗前减轻,说明眼部丹参注射液直流电离子导入能够促进玻璃体出血的吸收,为临床应用眼部电控中药活血化淤制剂离子导入治疗各种原因引起的眼内出血提供了临床药理学和组织学的依据。综上所述,眼部电控丹参离子导入可以促进玻璃体出血吸收,且用药量小,操作简便,仪器价格便宜,疗效确切,是一种具有中医眼科特色、应用前景好的外治法,为中药治疗眼科疾病提供了新的给药途径。参考文献1赵凯.复方丹参滴丸治疗外伤性玻璃体积血的临床观察J.中原医刊,2004,31∶39402程毅力,彭宏宇,张莉.安妥碘与透明质酸酶球后注射治疗挫伤性玻璃体积血J.眼外伤职业眼病杂志,2002,246∶6753符辰雅,王瑞姝,郭金莲.t2PA治疗玻璃体积血眼底出血疗效分析J.中国实用眼科杂志,2002,214∶2692704宋莉,刘东霞.玻璃体切割术治疗玻璃体积血的疗效观察J.包头医学院学报,2008,243∶2802815张保松.严重外伤性玻璃体积血玻璃体切除疗效观察J.眼外伤职业眼病杂志,2006,285∶3593606ForresterJV,EdgerW,MillarW,etal.EnhancementofvitreousclotlysisbyurokinasemadeofactionJ.ExpEyeRes,1982,34∶8957郭万学.理疗学M.北京人民卫生出版社,1984∶608王燕,李志英,邹月兰,等.药物直流电离子导入在眼科的应用进展J.西部医学,2006,181∶1051079盛景芬,徐晓华.高效液相色谱法测定丹参注射液中的原儿茶醛和丹参素J.中成药研究,1987,7∶1415收稿20071208修回20080827本文编辑胡纯钢本刊对论文所附照片的要求论文所附照片如为组织切片、细胞培养图,请勿网上传输或使用喷墨打印机打印。应在专业洗印处洗印,并通过邮局寄至本刊编辑部。照片应清晰,对比度好,尺寸一致。其他类照片如网上发送则要求单位像素每英寸至少300线以上。请作者按此要求投稿,以免由于图片质量而影响刊出。本刊编辑部748眼科研究2008年11月第26卷第11期

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