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丹红注射液对体外培养星形胶质细胞的影响.pdf

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丹红注射液对体外培养星形胶质细胞的影响.pdf

丹红注射液对体外培养星形胶质细胞的影响徐江华,蒋海丽,梅元武(华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科,武汉430022)[摘要]目的观察丹红注射液对星形胶质细胞(ASTROCYTE,AS)增殖作用。方法不同浓度丹红注射液作用于体外培养的大鼠AS,噻唑蓝染色(MTT)比色法对丹红注射液进行细胞毒性分析,流式细胞技术分析细胞增殖情况。结果MTT比色分析得出丹红注射液对细胞生长的半数抑制率(IC50)约为17.8%(丹红注射液与培养基的体积比),安全作用浓度<8%;流式细胞分析结果药物组细胞DNA合成期细胞所占百分比(S%)和增殖指数(PI值)(S+G2/M)100%较正常对照组显著增高(P<0.01)。结论适当浓度丹红注射液可促进星形胶质细胞增殖。[关键词]丹红注射液;星形胶质细胞;细胞增殖[中图分类号]R286;R966[文献标识码]A[文章编号]10040781(2008)01003202胶质细胞在中枢神经系统中扮演重要角色,而且与神经系统疾病的形成有密切关系[1]。随着对星形胶质细胞(ASTROCYTE,AS)研究的日趋深入,学者们对AS在缺血性脑血管病中的变化和作用产生浓厚兴趣。丹红注射液是由中药丹参与红花精制萃取制备,具有保护血管内皮、促进血管增生及抗凝作用已有动物实验提示丹红注射液对大鼠局灶脑缺血后脑细胞有保护作用[2],具体作用机制未完全明确,AS受丹红注射液作用后有何反应尚不清楚,尽管缺血再灌注的动物模型更接近于真实的生理病理情况,但由于中枢神经系统内细胞成分复杂、作用机制彼此交织,很难精确分辨AS的具体变化。笔者采取体外培养AS的方法,从而避开体内其他因素干扰,探讨丹红注射液对AS的影响。1材料与方法1.1试剂与仪器DMEM(高糖)培养基、胎牛皿清(HYCLONE),左旋多聚赖氨酸、MTT、DMSO、PI均购自SIGMA公司,1250胰蛋白酶(AMRESCO),GFAP多克隆抗体(武汉博士德公司),FITC标记的羊抗兔抗体(北京中杉金桥),倒置相差显微镜(日本OLYMPUS公司),荧光显微镜(日本OLYMPUS公司),流式细胞仪(型号FACSCABLIBUR,美国BD公司),紫外分光光度仪(德国BECKMAN公司)。1.2方法1.2.1大鼠AS的原代培养及纯化取出生24H内SD大鼠,-20℃冰箱内冷冻15MIN处死,经75%乙醇消毒1MI

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