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丹红注射液对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织ET-1, eNOS 和iNOS 基因表达的影响.pdf

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丹红注射液对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织ET-1, eNOS 和iNOS 基因表达的影响.pdf

www.wjgnet.comwcjdwjgnet.com世界华人消化杂志2009年9月28日172727842790ISSN10093079CN141260/R基础研究BASICRESEARCH丹红注射液对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织ET1、eNOS和iNOS基因表达的影响范辉,胡雅兵,王小红,沈云志范辉,胡雅兵,王小红,沈云志,常州市第一人民医院苏州大学附属第三医院消化内科江苏省常州市213003范辉,博士,主治医师,主要从事消化系疾病的基础与临床工作.作者贡献分布所有作者对此篇文章所作贡献均等此课题在沈云志教授的指导下,由范辉与王小红共同探讨和设计实验过程由范辉与王小红共同操作完成数据分析由胡雅兵与范辉完成本论文写作由范辉与胡雅兵完成由沈云志教授提出整体思路与修改意见.通讯作者沈云志,教授,213003,江苏省常州市局前街185号,常州市第一人民医院苏州大学附属第三医院消化内科.shyfan961129yahoo.com.cn电话051986181102收稿日期20090630修回日期20090824接受日期20090824在线出版日期20090928EffectsofDanhongInjectionontheexpressionofendothelin1,endothelialnitricoxidesynthaseandinduciblenitricoxidesynthasemRNAsinthepancreasinratswithsevereacutepancreatitisHuiFan,YaBingHu,XiaoHongWang,YunZhiShenHuiFan,YaBingHu,XiaoHongWang,YunZhiShen,DepartmentofGastroenterology,theFirstPeoplesHosptalofChangzhou,theThirdAffiliatedHospitalofSoochowUniversity,Changzhou213003,JiangsuProvince,ChinaCorrespondencetoPorfessorYunZhiShen,DepartmentofGastroenterology,theFirstPeopleshospitalofChangzhou,theThirdAffiliatedHospitalofSoochowUniversity,185JuqianStreet,Changzhou213003,JiangsuProvince,China.shyfan961129yahoo.com.cnReceived20090630Revised20090824Accepted20090824Publishedonline20090928AbstractAIMToinvestigatetheeffectsofDanhongInjectiononpancreaticinjuryandtheexpressionofendothelin1ET1,endothelialnitricoxidesynthaseeNOSandinduciblenitricoxidesynthaseiNOSmRNAsinthepancreasinratswithsevereacutepancreatitisSAP.METHODSNinetysixmaleSpragueDawleyratswererandomlydividedintonormalcontrolgroupn32,SAPmodelgroupn32andDanhongInjectiontreatmentgroupn32.TheexpressionofeNOS,iNOSandET1mRNAsinthepancreaswasdeterminedbyreversetranscriptionpolymerasechainreactionRTPCR.ThecontentsofET1andnitricoxideNOinthebloodweredetectedbyradioimmunoassayRIAandnitratereductasemethodNRM,respectively.Pancreaticpathologicalchangeswereobservedandscored.RESULTSComparedwiththeSAPmodelgroup,theexpressionlevelsofET1andiNOSmRNAsdecreasedsignificantlyET14h0.31±0.15vs0.58±0.17,8h0.45±0.16vs0.72±0.31,12h0.73±0.19vs1.19±0.28,24h0.64±0.26vs0.92±0.36iNOS4h0.32±0.10vs0.65±0.11,8h0.36±0.14vs0.73±0.08,12h0.43±0.07vs0.87±0.15,24h0.32±0.06vs0.82±0.16,allP753空泡形成0缺少1导管周围504坏死0缺少114/HPF2510/HPF31115/HPF4≥16/HPF.每只大鼠的胰腺组织病理评分为以上4项评分相加后的分值.1.2.3血清ET1、NO检测血清ET1浓度采用放射免疫法radioimmunoassay,RIA测定,仪器为CAP16型放免仪,放免试剂盒由北京北方生物技术研究所提供,NO采用硝酸还原酶法nitratereductasemethod,NRM测定,试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,按照说明书的方法测定NO.1.2.4RTPCR检测胰腺组织内ET1、eNOS和iNOSmRNA表达的检测采用RTPCRreversetranscriptionPCR法检测.引物序列见表1.引物由百奥生物技术南通有限公司实验室合成.采用两步法RTPCR,取5μLPCR产物跑1.0琼脂糖电泳利用凝胶分析软件ImageJ,计算检测基因与βactin的积分吸光度A比值来表示目的基因的表达量.统计学处理应用SASV8.0统计软件包进行数据处理,所有数据均用mean±SD来表示,经Levene方差齐性分析,若方差齐,采用完全随机设计多组均数比较的方差分析analysisofvariance,两两比较行SNK检验,取P0.05不注.如同一表中另有一套P值,则cP0.05,dP0.01第3套为eP0.05,fP0.01.P值后注明何种检验及其具体数字,如P0.01,t4.56vs对照组等,注在表的左下方.表内采用阿拉伯数字,共同的计量单位符号应注在表的右上方,表内个位数、小数点、±、应上下对齐.空白表示无此项或未测,代表阴性未发现,不能用同左、同上等.表图勿与正文内容重复.表图的标目尽量用t/min,c/mol/L,p/kPa,V/mL,t/℃表达.黑白图请附黑白照片,并拷入光盘内彩色图请提供冲洗的彩色照片,请不要提供计算机打印的照片.彩色图片大小7.5cm4.5cm,必须使用双面胶条黏贴在正文内,不能使用浆糊黏贴.5致谢后加冒号,排在讨论后及参考文献前,左齐.科学编辑李军亮2009092818杨通印,邓世雄.iNOS及其在组织创伤后的表达.重庆医学20083710210519CookeCL,DavidgeST.PeroxynitriteincreasesiNOSthroughNFkappaBanddecreasesprostacyclinsynthaseinendothelialcells.AmJPhysiolCellPhysiol2002282C395C40220满永,丁莉,国汉邦,王蕾,王抒,黎健.丹参红花提取物保护内皮细胞免受氧化损伤的体外实验.中国临床康复200610119122编辑李军亮电编吴鹏朕

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