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CD1332在儿童B系急性淋巴细胞性白血病发病中的作用及其机制初步研究

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CD1332在儿童B系急性淋巴细胞性白血病发病中的作用及其机制初步研究

硕士学位论文 论文题目 CD133-2在儿童 B系急性淋巴细胞性白血病 发病中的作用及其机制初步研究 研究生姓名 郭豆豆 指导教师姓名 赵文理 专 业 名 称 儿科学 研 究 方 向 小儿血液与肿瘤 论文提交日期 2013年 3月 CD133-2 在儿童 B 系急性淋巴细胞性白血病发病中的作用及其机制初步研究 中文摘要 I CD133-2在儿童 B系急性淋巴细胞性白血病发病中的 作用及其 机制 初步研究 中文摘要 目的: 探究 CD133-2在儿童 B系急性淋巴细胞白血病( B-ALL)发病中的表达规 律、 CD133-2+白血病细胞的生物学特性和调控该群细胞的信号通路相关分子,为鉴 定 CD133-2是否为儿童 B-ALL白血病干细胞( LSC)的一项标志和阐明其调控的分子 机制奠定实验基础。 方法: 1、 流式细胞术检测 42例 初诊和复发的 B-ALL患儿 及 10例 对照组儿童的 骨髓( BM) 单个核细胞( MNCs) 的 CD133-1、 CD133-2表达 , 并观察其与临床预后指标的相关性 。 2、 选取 6例 CD133-2阳性表达 (表达 比例 ≥ 20%)的 B-ALL患儿 的新鲜 骨髓标本 , 用 磁珠 分选( MACS) 分离纯化出 CD133-2+CD19+、 CD133-2+CD19-、 CD133-2-CD19+、 CD133-2-CD19-四组 亚群细胞 , 进行 体外 含 血清 悬浮培养,观察 其 增殖能力 , RT-PCR 检测 融合基因的表达 。 对其中 3例 磁珠分选 的四组 亚群细胞 行 甲基纤维素 半固体 培养, 观察其集落形成能力。 3、采用 实时定量 PCR技术对 3例 B-ALL患儿的 CD133-2+CD19-、 CD133-2+CD19+、 CD133-2-CD19+、 CD133-2-CD19-细胞 亚群 分别进行 干细胞相关 信号 通路的 基因表达 筛查 , 并重点分析 CD133-2+CD19-细胞群的 相关信号 通路分子 。 结果 : 1、流式细胞术 结果显示: CD133-1、 CD133-2在 B-ALL中的表达水平明显高于正 常对照骨髓中的表达水平,差异具有 显著 统计学意义( P 0.01); 在 B-ALL中, CD133-2 的阳性表达率 和表达水平均较 CD133-1高,差异具有 统计学

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