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藏红花素对急性白血病患儿骨髓间充质干细胞增殖及功能的影响

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藏红花素对急性白血病患儿骨髓间充质干细胞增殖及功能的影响

摘要目的研究化疗及不同浓度藏红花素对急性白血病患儿骨髓间充质干细胞BMSCS增殖及功能的影响。方法收集正常儿童,新发急性白血病患儿,化疗6个月及化疗1年后的急性白血病患儿骨髓各LO例,全骨髓法培养出BMSCS,分别设为正常对照组A,实验组分为新发组B,化疗6月组C及化疗12月组D,并通过流式细胞仪测定细胞表面标记分子CD44、CDL05、CD29、CD73、CD34、CD45及HLADR的表达率,进行BMSCS鉴定。用含不同浓度藏红花素0、0.3125MG/ML、0.625MG/ML、1.25MG/ML及2.5MG/M1的低糖DMEMLDMEM培养液分别培养各组BMSCS48H、72H及96H。倒置显微镜观察各组BMSCS形态及增殖情况;MTT法检测经不同浓度藏红花素、不同时间作用后的各组BMSCS增殖率;ELISA法测定作用96小时后各组细胞上清液干细胞因子SCF及肿瘤坏死因子一ATNF_A的水平。结果1.BMSCS膜抗原表达各组均有99.5%以上细胞表面表达CD44、CDL05、CD29及CD73,而表达CD34、CD45及HLADR的细胞均低于2%。2.BMSCS形态学变化A组BMSCS形态规则,呈集落样或“结网样迅速增殖,B组BMSCS形态较规则,但增殖速度明显低于正常对照组;C及D组BMSCS形态不规则,增殖速度明显低于A组。3.BMSCS增殖活性实验各组BMSCS在藏红花素作用前培养48H、72H、96H后所测得OD值均低于A组OD值,差异有统计学意义P0.05,培养72H及96H后,D组0D值明显低于C组OD值,差异有统计学意义,PO.05;加入不同浓度藏红花素培养96H后,BMSCS增殖率均明显提高F值分别为19.85、5.42、9.31、9.58;PO.05,当藏红花浓度从0.3125MG/ML1.25MG/M1时,增殖率逐渐增加,以藏红花素浓度为1.25MG/ML时的增殖率最高,与其他各组比较均有显著性差异仄0.05,当藏红花素浓度升高至2.5MG/ML时,各组细胞增殖率反而下降。4.BMSCS产生SCF及TNF_Q水平B组细胞产生SCF及TNFA水平较A明显升高P0.05,C及D组明显低于B组P均0.05,D组明显低于C组PO.05,但C组TNFA水平仍显著高于A组P0.05。藏红花素作用后,A组细胞上清液中SCF水平明显下降F25.49;PO

注意事项

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