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高氧肺损伤新生大鼠肺组织中肺表面活性物质相关蛋白ASPA的mRNA和蛋白表达及布地奈德的干预作用

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高氧肺损伤新生大鼠肺组织中肺表面活性物质相关蛋白ASPA的mRNA和蛋白表达及布地奈德的干预作用

硕士学位论文 论文题目 高氧肺损伤新生大鼠肺组织中肺表面活性物质相关蛋白 -A( SP-A)的 mRNA和蛋白表达及布地奈德的干预作用 研究生姓名 何 蓉 指导教师姓名 肖志辉 专 业 名 称 儿科学 研 究 方 向 新生儿 论文提交日期 2013年 3月 高氧肺损伤新生大鼠肺组织中肺表面活性物质相关蛋白 -A( SP-A)的 mRNA 和蛋白表达及布地奈德的干预作用 中文摘要 I 高氧肺损伤新生大鼠肺组织中肺表面活性 物质相关 蛋白 -A( SP-A)的 mRNA和蛋白表达及 布地奈德的干预作用 中文摘要 目的: 1. 建立新生大鼠高氧肺损伤的动物模型; 2. 观察与比较高氧性损伤 时 新生大鼠肺组织的病理组织 学改变,以及 肺表面 活 性 物质相关 蛋白 -A( pulmonary surfactant protein-A, SP-A) 的 mRNA 及其蛋白 的表 达变化,从而探讨 SP-A 在新生大鼠高氧肺损伤发生、发展中可能的作用; 3. 探讨吸入 性 糖皮质激素布地奈德( budesonide, BUD) 是 否通过调控 SP-A 的 表达 从而发挥 对 高氧肺损伤 的 保护作用 ,为临床防治高氧 肺 损伤提供 理论 依据 。 方法: 取 108 只出生 1 天内的新生 Sprague Dawley( SD)大鼠(雌雄不限)随机分成 三 组:即 Ⅰ 组:空气组 (对照组) , Ⅱ 组:高氧+生理盐水 组(高氧组), Ⅲ 组:高 氧+布地奈德组(干预组),每组 36 只。 Ⅰ 组置于空气中;将 Ⅱ 、 Ⅲ 组实验动物 持续暴露于 90%~ 95% 氧箱中 , 直至实 验结束。 Ⅱ 组 于 每日雾化吸入 NS 10ml, Ⅲ 组 每日 同一时间点吸入 溶解 BUD 的等量 的 NS(含 BUD 2mg)。 设立实验后 3、 7 和 14 天 3 个时间观测点 , 处死动物, 行支气管肺泡灌洗,测定 灌洗液中蛋白含量 ;取肺组织,计算 肺湿 /干重比 ; HE 染色观察组织病理学变化; Westen Blot 方法检测 SP-A 蛋白含量、 RT-PCR 方法检测 SP-A mRNA 表达水平 。 结果: 1. 各组实验 动物一般情况 : Ⅰ 组(空气组)中的实验动物在实验期间精神状态 佳、活动灵活,进食正常。 Ⅱ 组(高氧组)中的实验动物逐渐出现症状,表现

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