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牛肝菌深加工技术专利资料汇集

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牛肝菌深加工技术专利资料汇集.zip
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牛肝菌 深加工 技术 专利 资料 汇集 聚集
资源描述:

1、CN200610044135.3-一种美味牛肝菌食品及其生产方法

2、CN200610053593.3-粘盖牛肝菌素的制备方法及其应用

3、CN200810058079.8-牛肝菌毒素处理的方法

4、CN200810117983.1-一种牛肝菌提取物及其制备方法和应用

5、CN200910250523.0-一种牛肝菌的保鲜方法

6、CN200910070195.6-一种制备香精用的牛肝菌发酵液组合物

7、CN200910070196.0-一种牛肝菌发酵液组合物的制备方法

8、CN200910070197.5-一种牛肝菌发酵液制备的香味料

9、CN200910099211.4-一种牛肝菌黑李果酒的制作方法

10、CN201010528348.X-森林内牛肝菌的增产方法

11、CN200910250524.5-一种牛肝菌提取液和饮料及其制备方法

12、CN201010126923.3-一种混合型食用菌提取液保鲜牛肝菌的方法

13、CN201010204579.5-一种牛肝菌饮料及其制备方法

14、CN201010546451.7-一种从褐环粘盖牛肝菌中提取药用活性物质的方法及其应用

15、CN201210172991.2-褐疣柄牛肝菌发酵产色素的制备方法

16、CN201110101784.3-牛肝菌提取物在具有延缓衰老功效的化妆品中的应用

17、CN201110128808.4-牛肝菌茶、其制做方法及在调节、提高免疫力方面的应用

18、CN201110437103.0-一种美味牛肝菌菌体中水溶性活性多糖的制备方法及应用

19、CN201210005650.6-一种牛肝菌风味干粉及其制备方法

20、CN201210437002.8-一种牛肝菌挥发性风味物质的鉴定方法

21、CN201210180234.X-一种香味牛肝菌

22、CN201210271265.6-一种牛肝菌苔干汁营养饮料

23、CN201210310264.8-一种速冻牛肝菌、速冻方法及设备

24、CN201310120364.9-一种合成点柄粘盖牛肝菌菌根的方法

25、CN201310285182.7-一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法

26、CN201310124768.5-一种牛肝菌银耳降压保健年糕及其制备方法

27、CN201310203064.7-一种巧克力牛肝菌的制备方法

28、CN201310258408.4-一种烘焙牛肝菌食品

29、CN201310258556.6-一种即食风味牛肝菌海苔片的制备方法

30、CN201310526843.0-一种含有优质蛋白的牛肝菌软糖

31、CN201310318475.0-一种美味牛肝菌功能性乳饮料的生产方法

32、CN201310350907.6-一种酸甜牛肝菌罐头

33、CN201310402290.8-一种野生食用牛肝菌加工方法

34、CN201310480673.7-一种美味牛肝菌菌丝多糖的提取方法

35、CN201410352127.X-一种牛肝菌的冷冻加工方法

36、CN201310686118.X-一种牛奶牛肝菌脯

37、CN201310708353.2-一种白牛肝菌 旋覆花复合饮料及其制作方法

38、CN201410092337.X-一种牛肝菌调味品及其制备方法

39、CN201410234034.7-一种牛肝菌超微粉的加工方法

40、响应面法优化美味牛肝菌多糖提取工艺研究

41、黑牛肝菌液体发酵条件的优化

42、美味牛肝菌菌丝体营养特性分析

43、泡沫分离法优化美味牛肝菌多糖分离工艺

44、食用牛肝菌抽提物最佳提取工艺的研究

45、野生牛肝菌保健功能研究

46、以豆渣为基料固态发酵培养美味牛肝菌

47、正交法研究提取牛肝菌中多糖的最佳工艺条件

48、牛肝菌奶油浓汤粉加工工艺的研究

49、黑牛肝菌调味酱的制作工艺研究

50、美味牛肝菌胞内多糖提取工艺研究

51、野生牛肝菌加工技术

52、野生牛肝菌的采摘与加工技术

53、美味牛肝菌膨化即食产品生产工艺技术研究

54、美味牛肝菌的脱水加工技术

55、CN104126867A-牛肝菌多糖的提取方法及其在烟草制品中的用途

56、CN104172377A-一种富含美味牛肝菌多糖杨梅果饮及其制备方法

57、CN104305155A-一种白牛肝菌鸡肉酱及其制备方法

58、CN104397680A-一种烘焙牛肝菌食品及其制备方法

59、CN104542930A-一种白牛肝菌的保鲜方法

60、CN104621517A-一种含牛肝菌酶解物的调味料及其制备方法

61、CN104886528A-一种牛肝菌肉味香粉及其制备方法

62、CN104939222A-一种香薷和中牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

63、CN104939219A-一种相思藤清热牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

64、CN104939221A-一种延胡索活血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

65、CN104939218A-一种亚麻平肝牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

66、CN104939220A-一种霞天膏补气益血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

67、CN104982490A-一种牛肝菌风味养生饼干及其制备方法

68、CN104982991A-一种枳实化痰牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

69、CN105077413A-一种菥蓂清热解毒牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

70、CN105077414A-一种虾须豆活血通络牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

71、CN105077208A-一种鸭脚艾祛风止咳牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

72、CN105077416A-一种竹茹清热牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

73、CN105077411A-一种岩白菜清热牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

74、CN105077412A-一种芜菁消食下气牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

75、CN105077415A-一种栀子泻火牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

76、CN105077417A-一种萱草嫩苗清热利湿牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

77、CN105077209A-一种小罗伞活血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

78、CN105211969A-一种美味牛肝菌复合方便牛骨汤料及其制备方法

79、CN105273101A-一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法

80、CN105326866A-一种黄牛肝菌超微破壁粉碎方法

81、CN105360307A-一种美味牛肝菌含乳饮料的加工方法

82、CN105361130A-一种美味牛肝菌的加工方法

83、CN105368693A-一种美味牛肝菌营养米醋

84、CN105380259A-一种袋装美味牛肝菌的加工方法

85、CN105454932A-一种美味牛肝菌醋饮品

86、CN105942487A-一种麻辣牛肝菌及其加工方法

87、CN105961668A-美味牛肝菌菌丝发酵茶的加工方法及其产品

88、CN106010929A-一种美味牛肝菌保健醋及其制造方法

89、CN106134769A-一种美味牛肝菌原种的制作方法

90、CN106317246A-一种黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖及其制备方法及用途

91、CN106333170A-一种天麻息风止痉牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

92、CN106333158A-一种郁金行气牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

93、CN106333172A-一种马齿苋清热解毒牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

94、CN106333171A-一种代赭石平肝牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

95、CN106333169A-一种覆盆子益肾牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

96、CN106333167A-一种太子参生津润肺牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

97、CN106333168A-一种白花映山红和血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

98、CN106343476A-一种竹沥清热牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

99、CN106343534A-一种沉香行气牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

100、CN106343481A-一种白石榴花止血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

101、CN106343480A-一种独活祛风胜湿牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

102、CN106360566A-一种倒生根活血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

103、CN106360567A-一种地榆止血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

104、CN106360568A-一种玫瑰花行气解郁牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

105、CN106360614A-一种利用美味牛肝菌深层发酵菌丝体制备美味牛肝菌精粉的方法

106、CN106360570A-一种虎杖祛风利湿牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

107、CN106360569A-一种赤石脂止血牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

108、CN106689900A-一种茅莓散瘀牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

109、CN106689892A-一种半枝莲清热解毒牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

110、CN106722872A-一种美味牛肝菌休闲食品及其制备方法

111、CN106727736A-黄牛肝菌活性物质的制备方法及其应用

112、CN107028050A-一种蒲公英清热解毒牛肝菌杂菌汤料及其制备方法

113、CN107279968A-牛肝菌保健咀嚼片的加工方法

114、CN107372790A-一种暗褐网柄牛肝菌的保鲜方法

115、CN107396961A-一种褐盖粘环牛肝菌的保鲜方法

116、CN107439676A-一种美味牛肝菌的保鲜方法

117、CN107455713A-牛肝菌核桃酱及其制备方法

118、CN107616219A-牛肝菌低温存储方法

119、CN107647413A-一种白牛肝菌小分子肽复配营养肽水饮料及其制备方法

120、CN107723183A-一种白牛肝菌小分子肽复配酒及其制备方法

121、CN107760611A-一种富硒黄牛肝菌的液体发酵工艺优化方法及工艺


内容简介:
技术TECHNIQUE食品工程响应面法优化美味牛肝菌多糖提取工艺研究万国福江苏食品职业技术学院食品与营养工程学院【摘要】以关味牛肝茵为原料,在单因素试验的基础上,依据BOXBEHNKEN的中心组合试验设计原理,选取浸提温度、浸提时间和料液比为影响因素,应用响应面法进行三因素三水平的试验设计,以牛肝茵多糖提取率作为响应值,对其提取条件做进一步优化。试验所得水浸提法提取牛肝菌多糖的最佳工艺条件为浸提温度902、浸提时间4H、料液比130,牛肝菌多糖提取率达391。【关键词】牛肝菌;多糖;响应面法;提取中图分类号TS2023文献标识码A文章编号100098682011O8一O16OO3美味牛肝菌又名大脚菇,牛肝菌科。菌盖直径415ERA,扁半球形或稍平展、不粘、光滑、边缘钝、呈黄褐色、土褐色或赤褐色。主要分布于河南、四川、云南、内蒙古、福建、陕西等地,属于优质野生食用菌,其子实体厚而细软,味道鲜美,也可入药。可治腰腿疼痛,手足麻木,筋骨不舒,四肢抽搐,其中的多糖和碱性蛋白可抗肿瘤、病毒,调节人体的免疫功能。多糖提取多采用水浸提法,影响因素主要有浸提温度、料液比和浸提时间。本文通过单因素试验及二次回归交组合设计试验,研究确定了美味牛肝菌多糖的提取工艺条件,为美味牛肝菌深加工利用提供理论依据。1_22牛肝菌多糖测定采用苯酚一硫酸法测定牛肝菌多糖。将干燥恒重的葡萄糖配制成浓度为01MGML标准葡萄糖溶液用于制作标准曲线。然后按照下列公式计算多糖提取率多糖提取率蒿1O。123试验设计通过单因素试验分别探讨浸提温度、液料比、浸提时间3个因素对牛肝菌多糖提取率的影响。在单因素试验基础上,根据BOXBENHNKEN设计原理,确定中心组合试验的因素与水平。以多糖得率为响应值,通过响应面分析对提取条件进行优化,并确定各提取条件的最佳组合。1试验材料与方法2结果与分析11试验材料与仪器原料与试剂新鲜美味牛肝菌市售;苯酚、硫酸、葡萄糖、95乙醇、正丁醇和氯仿均为国产分析纯。仪器UNICUVVIS一2802PC,上海尤尼克仪器有限公司;低速台式大容量离心机,上海安亭科学仪器厂。1_2试验方法1_2_1牛肝菌多糖提取工艺新鲜关味牛肝菌子实体粉碎一分别精密称取10G样品若干设定浸提温度、料液比、提取时间进多糖浸提浸提完毕后过滤,取滤液一用95乙醇进行醇析4H4000RMIN离心10MIN,取沉淀采用SEVAGE法脱蛋白并干燥至恒重即得牛肝菌多糖I6】翻乱瓶一21提取温度确定选用料液比130,浸提时间4H,分别在温度60、70、80、90和100条件下进行牛肝菌多糖提取试验,结果如图1所示。浸提温度,图1浸提温度对多糖得率的影响由图1可知多糖提取率随浸提温度的升高呈现先增后降的趋势,当温度90时,提取率最大,所以选择8O、90、100OC作为中心组合试验的3个水平。22料液比确定选用浸提温度90CLC,时问4H,料液比分别为110、120、130、140和150条件下进行牛肝菌多糖提取试验,结果如图2所示。僻醛料液GGML。图2料液比对多糖得率的影响由图2可知多糖提取率随料液比的增加提取率也不断增加,当达到料液比130时,提取率则基本保持水平。在多糖的提取过程中,溶剂用量与多糖的溶出有一个对应的平衡关系,溶剂用量的最低限度是保证物料刚被完全浸没,随着溶剂用量的增加,物料的溶出量逐渐增加,到达饱和溶出度后,多糖得率不再改变。因此,选取120、L30和140作为中心组合试验设计料液比的3个水平。23浸提时间确定选用浸提温度90,料液比130,分别在浸提时间1、2、3、4和5H进行牛肝菌多糖提取试验,结果如图3所示。斟浸提时间,H图3浸提时间对粗多糖得率的影响由图3可知多糖提取率随浸提时间延长呈现先增后降的趋势,当浸提时间为4H时,有最大多糖提取率。食品工程TECHNIQUE技术因此,选择3、4、5H作为中心组合试验的3个水平。24响应面设计方案及结果分析241响应面设计选取浸提温度、液料比、浸提时间3个因素设计中心组合试验。试验以美味牛肝菌多糖提取率为响应值Y,分别用XL、X3表示提取温度、提取时间和料液比3个自变量,并以一1、0、1分别代表变量的3个水平。根据BOXBEHNKEN设计原理安排了15个处理组合,每个处理组合设3个平行样,分别测定多糖提取率Y,试验设计方案、结果及预测见表1。表1响应面分析方案及试验结果应用DESIGNEXPERT70软件对表1的试验结果进行多元回归拟合,获得牛肝菌多糖提取率Y,对提取温度X、提取时间X2和料液比3个自变量的二次多项式回归模型为Y3960087X10032X20100070XLX20095XLX30035X2X3050X一029一019X32。对回归模型进行方差分析,结果见表2。由表2可知模型的F检验结果为P00005005不显著,复相关系数R09856,说明模型拟合程度好。校正系数R09596,说明该模型能解释9596A应值的变化,仅有总变异的404不能用此模型来解释。因此,试验值与预测值较接近,可以用此模型来分析和预测牛肝菌多糖的提取工艺条件。根据表2方差分析结果,3个因素中对多糖提取率影响最大的是料液比,其次是浸提温度,最小的是浸提时间。20如捌圜L6】技术TECHNIQUE保持值图4温度和时间及其交互作用对多糖得率影响的响应面保持值图5温度和料液比及交互作用对多糖得率影响的响应面242响应面解析由图4、图5和图6可知当固定其中一个因素不变时,试验初期随另一因素量的增大多糖提取率提高,但达到一定程度后多糖提取反而受到一定抑制,导致多糖提取率降低,规律与单因素试验基本一致。图4、图5和图6底部的等高线形状为圆形,图5底部的等高线形状为椭圆形,表明浸提时间与浸提温度之间以及料液比与提取温度之间交互作用不显著,而浸提时间与料液比的负向交互作用显著,与方差分析结果一致。表2多糖得率二次多项回归模型方程方差分析注POO1极显著水平,PO05显著水平根据对响应面图的优化分析,当浸提温度为91、浸提时间为4H、料液比为132时,美味牛肝菌多糖理论提取率为397955。考虑到试验的可操作性,把上述优化提取条件修正为浸提温度90C、浸提时间4H、料液比130,重复3次进行验证试验,得到牛肝菌多糖平均提L62圜如瓤一竹保持值图6时间和料液比及交互作用对粗多糖得率影响的响应面取率为391,相对预测值的误差为006,二者非常相近,证明了模型的可行性。因此应用响应面法优化美味牛肝菌多糖提取获得的工艺参数可靠,具有较高实用价值。3结论在单因素试验的基础上,应用响应面法优化牛肝菌多糖的提取工艺,结果表明浸提温度、料液比及各因素二次项对多糖提取率均有显著影响,浸提温度与料液比间存在显著的负向交互作用。回归分析和验证试验结果表明该方法切实可行,所得优化条件为浸提温度90、浸提时间4H、料液比130,牛肝菌多糖提取率达391。参考文献收稿ET期20110322作者简介万国福1977一,男,河南人,硕士,讲师,主要从事食品生物技术研究工作。通信地址223003江苏准安市一8艺一一一一桃一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一生三程食品,LI斜妓,33,NO09,2012牛旰萤藏你发酵件昀优化郭永月,陶明煊,周斌,程光宇,金邦荃1南京师范大学金陵女子学院,江苏南京210097;2南京师范大学生命科学学院,江苏南京2L0046摘要讨论了黑牛肝菌液体的发酵培养基最佳组成及培养条件。采用响应曲面法分析了葡萄糖、蛋白胨、装液量三个关键影响因素对菌丝体生物量的影响、结果表明黑牛肝菌发酵的最佳培养基为葡萄糖375G、蛋白胨85GL、KH2P042GL、MGSO7H20IG1、VB001GL、CACOJ2G1;培养务件为装液96ML,培养温度28,转速】60FFMIN,初始PH55。此时可达到最大菌丝体生物量254801GL关键词黑牛肝茵,响应曲面法,液体发酵,菌丝体生物量OPTIMIZATIONOFTHEGROWTHCONDITIONSINSUBMERGEDFERMENTATIONOFBOLETUSAEREUSGUOYONGYUE,TAOMINGXUAN。ZHOUBIN,CHENGGUANGYU,JINBANGQUAN1GINLINGCOLLEGE,NANJINGNORMALUNIVERSITY,NANJING210097,CHINA2SCHOOLOFLIFESCIENCE,NANJINGNORMALUNIVERSITY,NANJING210046,CHINAABSTRACTTHEOPTIMALCULTUREMEDIUMANDFERMENTATIONCONDITIONSOF日OLETUSAEREUINSUBMERGEDFERMENTATIONWERESTUDIEDRESPONSESURFACEMETHODOLOGYWASUSEDTOANALYZETHEEFFECTSOFTHETHREECRITICAIFACTORSONMYCELIABIOMASSTHETHREECRITICALFACTORSWEREGLUCOSEPEPTONEANDBROTHFERMENTATIONCONTENTTHERESULTSSHOWEDTHATTHEOPTIMALCOMPOSITIONSWEREASFOLLOWSGLUCOSE375GL,PEPTONE85GL,KH2PO42GL,MGSO47H2O1GL,VB1O01GL,CACO32GLTHEFERMENTATIONCONDITIONSWEREBROTHCONTENT96ML,TEMPERATURE28ROTATINGSPEED160RMINANDTHEINITIALPH55UNDERTHEOPTIMALCONDITIONS,THEMAXIMAIMYCELIABIOMASSWAS254801GLKEYWORDSBOLETUSAEROUS;RESPONSESURFACEMETHODOLOGY;SUBMERGEDFERMENTATION;MYCELIABIOMASS中图分类号TS2013文献标识码A文章编号L0020306201209018304黑牛肝菌BOLETUSOERCUS学名枣铜色牛肝菌,属层前纠,伞菌H,牛月十科,卜旰菌属II。黑牛肝菌生长于海拔9002200M2_口J的松栎混交林或砍伐不久的林缘地带,生长期为每年JTJ卜旬至十月中旬,在我国四川I、南、贵州等地分布广泛,在欧洲、非洲等地也有分布,是一种世界性珍稀食,FJ菌II。其味道鲜荚、营养价值较高、含有丰富的矿质元素及多种人体必需氨基酸IL。该菌具有清热解烦、养血和中、追风散寒、舒筋和血等功效L7I,可治疗妇女白带症及不孕症I。据报道,黑牛肝菌水提物具有抗痛抗病毒作用19121。然而,黑牛肝菌了实体的栽培受钊气候、季节、原材料等限制,且实体栽培投资大、技术要求高、生,周期、生产效率低,导致人工戕培非常收稿日期2011一O8一】8通讯联系人作者简介郭永月1988一,女,硕士研究生,研究方向生物活性物质与保健功能因子基金项目江苏省高校自然科学基础研究项目1OKJD550003;江苏省普通高校研究生科研创新计划项目CXLXIL_0895;教学创新团队建设18L220001517优秀课程建设18L2000006209、困难L。日自黑牛肝菌人I栽培的子实体产量已经不能满足国内外市场的需求,而采用液体发酵技术生产蒲幺幺体及代谢产物代替了实体在食品和医药方面的应已成为一个新的发展方向III。液体培养发酵比固体栽培牛产实体简便、快速、易操作17181。食川菌液体培养发酵具有生产周期短、菌龄致、菌种成本低等优点,II前关于牛月十菌菌丝体液体培养的研究尚未报道。本实验采川响应曲面法RMS埘黑,卜肝蔺液体发酵培养基和培养条件做了初步探究,并优化了黑F朋菌液体发酵条件。1材料与方法11材料与设备黑,IF芮于四川省绵市食用菌研究所。YXQLSS1I全自动立式电热压力蒸汽灭菌锅_J海1尊迅实LK限公司医疗设备,;DHG一9140电热温鼓风F燥箱卜海精宏实验没备有限公司;SWCJ一2F舣人双面净化T作台苏州净化设备有限公;HD一930组合式恒温振荡器太仓市实验设备厂一。食昌,II斜技SCIENCEANDTECHNOLOGROFFOODINDUSTRY12实验方法121培养基菌种活化培养基PDA固体培养基;种子液培养基葡萄糖20GL、酵母膏5GL、KH2PO2GL、MGSO7H01GL、PH自然4820】;发酵培养基葡萄糖30GL、酵母膏7L、KH2PO42GL、MGS047H20LGL、VB1001GL、CACO32GL,PH自然48。122培养方法1221菌株的活化将在4CC保存的黑牛肝菌菌株转接至新鲜PDA培养基上,在28L3D,待用。1222种子液制备用接种针挑取活化后的菌丝体适量接种至装有10MLQ子液培养基的试管中,培养温度2802,摇床转速140RMIN,培养4D即得发酵用种子液。1223液体发酵培养25ORAL锥形瓶中装入60ML发酵培养基,在121CC卜高压灭蔺20MIN后,按装液量的3接种种子液,培养温度28,摇床转速140RMIN,培养8D。每个处理过程重复7次。1224菌丝体生物量测定方法取待测发酵液过滤,用水冲洗至洗液不再带有发酵液颜色为止。在65恒温干燥箱中烘干至恒重,在干燥器中冷却到常温,称重。实验数据采用DPS软件处理21。123液态发酵培养基组成的单因素实验1231最适碳源的筛选本实验选取蔗糖、麦芽糖、乳糖为供试碳源。分别将供试碳源以30GL替代121中发酵培养基中的葡萄糖,按1223法进行发酵,测定菌丝体生物量,确定最适碳源。1232最适氮源的筛选本实验选择蛋白胨、牛肉膏、硫酸铵和硝酸钾作为发酵供试氮源,分别以7GL的上述试剂替代发酵培养基中的酵母膏,发酵后测定菌丝体生物量,确定最适氮源。124液体培养条件的单因素实验1241最适培养温度的筛选按1223分别在24、26、28、30、32OC进行发酵培养,发酵结束后取菌丝体生物量平均值为指标,确定最适培养温度。1242最适初始PH的筛选实验分别设定发酵培养基的初始PH为35、45、55、65、75及自然PH48,按1223发酵结束后测定菌丝体生物量,确定发酵最适初始PH。1243最适转速的筛选分别设定摇床转速为100、120、140、160RRAIN,按1223发酵8D后,称量菌丝体生物量来确定最适转速。1244最适装液量的筛选在250ML锥形瓶中发酵,分别设定装液量为45、60、75、90ML,按1223发酵结束后称量菌丝体生物量,确定最适装液量。125响应曲面法优化液态发酵条件在单因素实验的基础上,应用DESIGNEXPERT700软件,根据BOX一表1响应面分析因子及水平TABLE1FACTORSANDLEVELSOFTHERESPONSESURFAEE生程BEHNKEN中心组合实验设计原理,以菌丝体生物量YD为响应值,设计三因素三水平响应面分析实验,对黑牛肝菌液体发酵条件进行优化,因子编码及水平见表1。2结果与讨论21液态发酵培养基组成的单因素实验结果211最适碳源的确定由表2可以看出,当葡萄糖作为碳源时,可获得最大菌丝体生物量为240531GL。且菌丝球体大小均匀,密度大,发酵液呈均匀的淡黄色。葡萄糖做碳源时,相比于麦芽糖、蔗糖、乳糖,菌丝体生物量达到1极显著水平。所以,选择葡萄糖为黑牛肝菌的最适碳源。表2不同碳源对黑牛肝菌液体发酵菌丝体生物量的影响TABLE2EFIEETOFDIFFERENTCARBONSOURCESONMYEELIABIOMASSOFBOLETUSAEFEUINSUBMERGEDFERMENTATION注不同字母表示差异显著,相同字母表示差异不显著;表3表7同。212最适氮源的确定由表3可以看出,对不同氮源,黑牛肝菌的利用情况差异显著。对蛋白胨和酵母膏利用情况较好,菌丝体生物量分别可达253817GL和24053LGL;蛋白胨与其他四种氮源相比,菌丝体生物量达到了极显著差异。而无机氮源不大适合黑牛肝菌菌丝体的生长。采用硝酸钾做氮源的培养基中,菌丝球体大小参差不齐,发酵液颜色呈深黄色。因此,选择蛋白胨为黑牛肝菌的最适氮源。表3不同氮源对黑牛肝菌液体发酵菌丝体生物量的影响TABLE3EFFECTOFDIFFERENTNITROGENSOURCESONMYCELIABIOMASSOFBOLETUSORELSINSUBMERGEDFERMENTATION22液体培养条件的单因素实验结果221最适培养温度的确定由表4可知,在28OC时,菌丝体生物量达到最大值24053LGL,而之后随着温度的增加,菌丝体生物量降低,可能是温度影响黑牛肝菌内酶活力的原因。但在5和1显著水平表4不同温度对黑牛肝菌液体发酵菌丝体生物量的影响TABLE4EFFECTOFDIFFERENTTEMPERATURESONMYCELIABIOMASSOFBOLETUSAEREUINSUBMERGEDFERMENTATION生物三连食品,II斜枝,不同温度对黑牛肝菌生长的影响几乎无差异。因此,确定黑牛肝菌最适的培养温度为28OC。222最适初始PH的确定由表5可知,不同初始PH对菌丝体生长无显著影响。当PH55时,生物量达到最大值253594GL。菌丝体在偏酸性Y4,境中长势稍好,而在偏碱性环境中菌丝体生物量略有减少。选择55为黑牛肝茼的最适初始PH。表5不同初始PH对黑牛肝菌液体发酵菌丝体生物量的影响TABLE5EFFECTOFDIFFERENTINITIALPHONMYCELIABIOMASSOFBOLETUSOEREUINSUBMERGEDFERMENTATION223最适转速的确定由表6可以看出,在160RRAIN时,菌丝体生物量达到最大值253592GL。按菌丝体生物量排序为160RMINL40RMIN120RMINLOORMIN,随着转速的增加,菌丝体生物量也增多。这与培养基中溶解氧程度有关,转速越高,溶解氧越多,比较适合菌丝体生长。但从表6中町以看,在5显著水平上,转速为100RRAIN时,菌幺幺体生物量与其他I个转速有显著差异,这是由于转速小岛,溶解氧稍低的缘故。但在1显著水平,转速的高低对菌丝体生物量的影响无极显著差。儿转速小的培养基叶L菌丝球生长都较均匀,发酵液颜色几乎无差异,均为淡黄色。综合考虑,选择160RRAIN为最适转速。表6不同转速对黑牛肝蔺液体发酵丝体生物量的影响TABLE6EFFECTOFDIFFERENTROTATINGSPEEDONMYCELIABIOMASSOFBOLETUSAEREUINSUBMERGEDFERMENTATION224最适装液量的确定由表7可明显看出,在5显著水平上,不同装液量对菌丝体生物量影响显著;在1极显著水平上,装液量为75ML与45ML和90ML差异极为显著。在装液量为45ML时,菌丝体生物量仅有224584GL,菌丝球少且不饱满,大小差异很大,这是由于培养基营养物质缺乏引起的。而当装液量为90ML时,菌丝体生物量略有减少,这与氧气的溶解量有关。综,确定75ML为最适装液量。表7不同装液量对黑牛肝菌液体发酵菌丝体生物量的影响TABLE7EFFECTOFDIFFERENTBROTHCONTENTONMYCELIABIOMASSOFBOLETUSCLEREUINSUBMERGEDFERMENTATION装液量ML菌丝生物量GL5显著水平1极显著水平33,NO09,201223响应曲面法优化液态发酵条件结果综合因素实验的结果,发现碳源、氮源、装液量这三个因素对黑牛肝菌菌丝体发酵影响差异显著。以葡萄糖A、蛋白胨B、装液量C这一个关键影响素为白变量,以菌丝体生物量Y为变量设立17个实验组及所得结果见表8。表8BOXBEHNKEN设计方案及响应值TABLE8BOXBEHNKENDESIGNANDCORRESPONDINGVALUE231【口归方程的建立设计按照DESIGNEXPERT软件中的BOXBEHNKENDESIGN模型对实验获得的菌丝体生物量进行回归,建立二次回归模型。回归方程为Y2597016A07B052C031AB021AC一0015BC131A069B2_040C式1对旧归方程式1进行检验,相关系数R09814,PO0001,表明回归模型显著,拟合程度好,FF实际应用意义。其中蛋白胨BP0O001为极度显著影响因素,装液量CP0O1为高度显著影响因素,葡萄糖AP0079影响较为显著。232响应面分析与优化采用响应面分析关键点值,其编码坐标为0743,0725,0828,对应的实际值为3743,845,9569,此时可以得到最大菌丝体生物量为257726GL。图1图3为通过DESIGNEXPERT得到的响应面分析图,每个响应面分别代表着2个独IL变量之问的交互作用,此时第三个变量保持在最佳水平。由图1图3可以看出葡萄糖、蛋白胨、装液VL随O0I图1葡萄糖与蛋白胨交互作用影响菌丝体生物量FIG1INTERACTIVEEFFECTOFGLUCOSEANDPEPTONEONMYCELIABIOMASSFSDENCEANDTECOLOGROFFOODINDUSTRYO0GL葡萄糖与装液量交互作用影响菌丝体生物量INTERACTIVEEFFECTOFGLUCOSEANDBROTHCONTENTONMYCELIABIOMASS罔3蛋白胨与装液量交互作用影响菌丝体生物量FIG3INTERACTIVEEFFECTOFPEPTONEANDBROTHCONTENTONMYCELIABIOMASS量与菌丝体生物量存在相关性。蛋白胨对菌丝体生物量影向十分显著,曲线非常陡峭。装液量影,IAJR2_,最后是葡萄糖,响应面分析显著性与方程分析结果一致。233优化与验证为操作方便,将上述最佳条件优化为葡萄糖375GL,蛋白胨85GL,装液量为96MI,按此条件重复实验7次,所得菌丝体生物量均值为254801GL,误差为113,实验结果与模拟方有较高的一致性。_大J此该方程充分验证了所建模型的_LF_确性,说明响应面法适用于黑牛肝茼液体发酵产菌丝体的回归分析和参数优化。3结论本实验在单因素实验的基础上,利用实验设软DESIGNEXPERT,采用BOXBEHNKENDESIGN建了葡萄糖、蛋白胨与装液量和茼丝体生物量之间的二次多项数学模型式1,对式1回归方程进行检验,市H关系数R09814,P00001,表明回归模型显著,拟合程度好,有实际应用意义。利用模型的响应面对影响黑牛肝菌菌丝体生物量的关键因子及其相瓦作用进行探讨,优化出黑牛肝荫液体发酵培养的最件条件。最佳培养基组成为葡萄糖375L、蛋白胨85GI、KH2PO42GL、MGSO47H2O1GL、VBL001GL、CACO32GL;最佳培养条件为装液一L,培养温度282,转速160RMIN,初始PH为55。菌丝体牛物量的预测值为257726GL,验证值为254801GL,误差为113。因此此模型是合理可靠的,可用于实际预测。参考文献生王程1李泰辉,宋斌中国食用牛肝茵的种类及其分布IJJ食用菌学报2002922230,F21OWENL,MCCONNELL,ERNSTEBOTHBOLETUSDUPAINIIINNORTHAMERICAJFIELDMYCOLOGY,2002,33103104F31邓百万,陈文强美味牛肝菌营养茵丝体与野生子实体品质分析JI中国食用菌,2004,2354446【4周庆珍,苏维词贵州野生多汁乳菇营养成分分析【JI营养学报,2003,2521301325阮海星,张卫国,付家华,等香菇多糖及营养成分分析微量元素与健康研究,2005,2233536【6DENTINGERABTM,AMMIRATIJF,BOTHEE,ETA1MOLECULARPBYLOGENETICSOFPORCINIMUSHLOONLSBOLETTASSECTIONBOLETUSLJIMOLECULARPHYLOGENETICSANDEVOLUTION,2010,573127612927】殷建忠,周玲仙云南野生菌维生素B、BZ舍量分析营养学报,2003,252L63一L66【8】吴学谦,李海渡,吴庆其,等黄靛牛肝菌子实体营养成分分析评价【J1食用菌学报,2005,1221923【9李志洲美味牛肝菌多糖的抗氧化性JI食品与发酵工业,2007,334495110】王一心,杨桂芝,狄勇,等黑牛肝菌对高脂血症大鼠血脂及抗氧化能力的影响LJ1中华预防医学杂志,2004,3856811王茂盛,连宾美味牛肝菌研究J1贵州林业科技,2003,3133437F121李平,李娟,汤婕美味牛肝茵及其深层发酵液中风味物质的研究IJ】食品与发酵工业,2007,3310L一5【13赵永勋食药用菌液体发酵的现状和展望【J农业与技术,2004,24311111314GRAZYNAJ,EMILIABEFFECTSOFPRETREATMENT,FREEZINGANDFROZENSTORAGEONTHETEXTUREOFBOLETUSEDULISBULLFRMUSHROOMSLJ】INTERNATIONALJOURNALOFREFRIGERATION,2010,33487788515HELENOSA,BARROSL,SOUSAMJ,ETA1TARGETEDMETABOLITESANALYSISINWILDBOLETUSSPECIESJLWTFOODSCIENCEANDTECHNOLOGY,20L1,4461343134816】CENGIZS,BEKTAST,MUSTATAYEVALUATIONOFTHEANTIOXIDANTACTIVITYOFFOUREDIBLENMSHROOMSFROMTHECENTRALANATOLIA,ESKISEHIRTURKEYLTWTARIUSDETERRIMITS,SUILLUSCOLLITINUS,BOLETUSEDULIS,XEROCOMUSCHRYSENTERONLJ1BIORCSOURCETECBNOLOGY,2008,99146651665517陆建明,张锡凤食用茵液体菌种制备的研究进展FJ中国食用茵,2003,22615一L718王淑芳,庆梅,刘进杰,等液体浅层静置培养食用菌菌种技术LJ1湖北农业科学,2006,45220320419王允祥,陆兆新,吕凤霞,等牛肝茵摇瓶发酵条件优化研究LJ1食品与发酵工业,2004,307677】【20刘芳,李平,刘博乳牛肝菌液态发酵生长备件的优4EIJ生物学杂志,2010,27158I21唐启义,冯明光实用统计分析及其DPS数据处理系统LM】北京科学出版社200225109_L_軎粗RI划翘第28卷第3期2012年5月OODMACHINERYVO128。NO3MAY2012泡沫分离法优化美味牛肝菌多糖分离工艺STUDYONOPTIMIZATIONSEPARATIONCONDITIONSOFPOIYSACCHARIDEINBOLETUSEDULISBULLBYFOAMFRACTIONATION李志洲LIZHIZHOU陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西汉中723001SCHOOLOFCHEMISTRYANDENVIRONMENTALSCIENCEOFSHAANXIUNIVERSITYOFTECHNOLOGY,HANZHONG,SHAANXI723001,CHINA摘要采用间歇式泡沫分离法研究美味牛肝茵水提物中的多糖分离工艺条件。结果表明常温下,每批投料量为200ML时,间歇式泡沫分离美味牛肝茵多糖的最佳工艺条件为PH6、原料液浓度0640MGML、气体流速300MLJMIN、表面活性剂用量O02MGML25ML、浮选时间55MIN,回收率可达831。结果显示间歇式泡沫分离美味牛肝菌多糖是一种可行、有效的分离方法。关键词牛肝茵;多糖;泡沫分离;气浮法;浮选时间;模拟;动力学ABSTRACTTHEOPTIMALSEPARATIONCONDITIONSOFP0LYSACCHARIDEINBOLETUSEDUHSWERESTUDIEDBYINTERMITTENTFOAMFRAETIONATIOMTHERESULTSSHOWEDTHATTHEOPTIMALSEPARATIONCONDITIONSUNDERNORMALTEMPERATUREANDPERINVENTORY200MIWEREPH6,CONCENTRATIONOFRAWMATERIALTOFIQUID0640MGML,AIRFLOW300MLMIN,CONSUMPTIONOFSURFACTANT002MGMI25ML,TIMEOFFOAMSEPARATION55RAINANDRECOVERYRATE831THEINTERMITTENTFOAMFRACTIONATIONWASFEASIBLEANDEFFICIENTMETHODTOP01YSACCHARIDEINBOLETUSEDULISKEYWORDSBOLETUSEDULIS;PO1YSACCHARLDE;FOAMFRACTIONATION;AIRFLOATATION;THEFOAMSEPARATIONTIME;SIMULATION;DYNAMICS美味牛肝菌BOLETUSEDUIS又称大脚菇,属于担子菌纲伞菌目牛肝菌科牛肝菌属。它含有多种氨基酸、维生素、矿物质和多糖等,是一种食药兼用经济价值较高的优质真菌之一。其菌肉厚而细软,味道鲜美,可药用;该菌子实体的水提取物对小白鼠肉瘤180的抑制率为100,对艾氏腹水癌的抑制率为9O。该菌还是“疏筋丸”的主要成分之一_】。多糖是生物体内除蛋白质和核酸以外的一类重要生物基金项目陕西省教育厅科研资助项目编号11JK0596作者简介李志洲1969一,男,陕西理工学院副教授,硕士。EMAILLIZHIZHOUL36SINACORN收稿日期20120220130分子,具有抗感染、免疫促进、肿瘤防治、病毒性肝炎、类风湿症、艾滋病等免疫损伤或免疫缺损症和抗氧化等功能,被称为“生物应答效应物”BIOLOGICALRESPONSEMODIFIER,BRM或活性多糖。目前已有报道的天然多糖化合物约有300多种,如真菌多糖、植物多糖、藻类多糖等口,其广泛存在于植物、动物和微生物组织中。目前香菇多糖、云芝多糖等已广泛应用于临床,使多糖生物资源的开发利用和研究日益活跃,成为天然药物、生物化学、生命科学的研究热点。传统的食用菌多糖大多采用水提醇析法,为提高多糖提取率,试验中所采用的提取剂量一般为固体原料的2O4O倍,提取液中多糖浓度一般较小,而醇析浓度一般为7585_1“,如此需要大量的乙醇,且操作周期长,试剂耗损率高,为此探究经济实用的分离工艺也就成为多糖的研究热点之一。泡沫分离法FOAMFRACTIONATION又称气浮法AIRSTRIPPING,它是以气泡作分离介质来富集表面活性物质的一种新型分离技术。近年来,它还被广泛用于许多不溶性物质和可溶性物质的分离,如溶液中的金属阳离子、阴离子蛋白质、染料、中草药中有效成分等的分离浓缩,它的最大优点在于在低浓度下分离特别有效,因此适用于溶液中低组分的分离回收,但在多糖分离工艺中未见报道。本试验采用间歇式泡沫分离法,研究美味牛肝菌提取液中多糖分离的最佳条件,为该法在多糖分离应用奠定一定的理论基础。1材料与方法11材料和试剂牛肝菌产地陕西汉中;葡萄糖、苯酚、十二烷基磺酸钠、氢氧化钠分析纯,西安化学试剂厂;浓硫酸98,西安三浦化学试剂有限公司。提取与活性2012年第3期12主要仪器泡沫分离柱13M012M,本实验室自制;泡沫收集器2I,本实验室自制;空气压缩机RT0128,福建泉州日田机械有限公司;紫外分光光度计721型,上海精密科学仪器有限公司;气体玻璃转子流量计LZB一4DKF,常州市成丰流量仪表有限公司。13试验方法131试验原理泡沫分离试验流程见图1。该装置由泡沫分离柱,供气系统和泡沫收集器组成。泡沫分离柱为内径012M,高度13M的有机玻璃柱,底部装有气体分布器。原料液从塔顶注入泡沫分离柱内,体积为200ML,利用空气压缩机的气泵向泡沫分离柱内通入空气,转子流量计调节气体体积流量,由塔底气体分布器产生气泡;随着气泡的上升在泡沫分离塔的主体液层上面形成泡沫层,泡沫离开泡沫塔,进入泡沫收集器被收集,并通过其中的消泡装置形成消泡液。对泡沫分离柱里剩余液体进行取样,取2ML定容到5OML容量瓶中,分别取稀释液2ML置于各个试管中,分别向其中加入1MI5的苯酚溶液,然后加入5ML浓硫酸,置于沸水中加热15MIN,冷却到室温,然后利用紫外分光光度计测其吸光度,计算其多糖含量。泡沫区气体转子流量计。匡垂驷。气体分布器图1泡沫分离试验流程示意图FIGURE1FOAMSEPARATIONTESTPROCESSSCHEMATICDRAWING13,2多糖的测定根据文献1采用苯酚一硫酸法进行葡萄糖标准曲线的绘制及测定提取液中多糖的浓度。1葡萄糖标准曲线的绘制分别配制浓度为0005,0010,0030,0050,0070MGMI的葡萄糖溶液,分别吸取2MI置于带塞试管中,加入LMI5的苯酚水溶液,加入5MI浓硫酸,沸水浴15RAIN,冷却至室温在490NM处测定吸光度A蒸馏水作空白对照,以吸光度为纵坐标,葡萄糖含量为横坐标绘制标准曲线,得到吸光度A与葡萄糖含量MGMI关系曲线,其回归方程为Y一91657X00343,R。09992。2美味牛肝菌粗提液的制备将美味牛肝菌干燥至衡重,粉碎,过20目筛,备用;取美味牛肝菌粉末250G,加入4000MI蒸馏水,充分搅拌,然后经微波快速反应系统反应功率600W,温度65,时间15MIN,把反应后的液体经离心处理,取上清液,抽滤,滤液即为美味牛肝菌粗提取液,备用。取2MI提取液,稀释至25MI,吸取2MI置于带塞试管中,按照1321所示方法测定提取液中多糖浓度,为0489RAGML。133浮选分离效果评价本试验以回收率和富集比两个参数为指标来评价分离效果。在单因素、正交试验中以回收率作为评价指标;最后在最佳分离效果的评价中加入富集比予以评价。回收率和富集比分别按式1、2计算回收率一。1富一篙。目原料液中的多糖浓度2结果与分析本试验主要选取浮选时间、表面活性剂加人量、浮选液的PH、气体流速、原料液浓度作为影响条件,通过单因素试验及正交试验获取浮选分离美味牛肝菌多糖的最佳条件。21单因素试验结果211空气流速对浮选效果的影响取200MI原料液加入浮选分离柱,调整PH值为5,加入表面活性剂15MI,浮选时间设置为55RAIN,改变气体流速,研究气体流速对浮选分离效果的影响,结果见图2。譬I气体流速111EAIRFLOWMLRAIN图2气体流速对浮选效果的影响FIGURE2THEEFECTOFGASVELOCITYTOFLOTATION由图2可知,气体流速增大,多糖去除率增大,当气体流速达到400MLMIN时,达到最大,此后略有降低。究其原因,气体流速较小时,产生的泡沫相对较少,而一旦流速大于400MIMIN时,虽然分离效果增大,但泡沫夹带的液滴也增多,带出液量变大,泡沫收集器经消泡处理后,富集液体积明显增大,使得后期的醇析工艺所用乙醇量自然增加,因此选择最佳气体流速为400MIMIN。212PH值对浮选效果的影响取200MI原料液加入浮选分离柱,调整气体流速为400MIMIN,加入表面活性剂15MI,浮选55MIN,调整原料液的PH值,测定PH值对浮选分离效果的影响,结果见图3。由图3可知,当PH为6时所得到的回收率较高,随着PH值继续增大,回收率逐渐降低。究其原因,溶液PH可能会影响溶液中待浮选物分子的存在形式,从而影响浮选分离3】第28卷第3期李志洲泡沫分离法优化美味牛肝菌多糖分离工艺董墼匿LPHPH值对浮选效果的影响THEEFFECTOFPHTOFLOTATION的效果,美味牛肝菌多糖在酸性条件下的富集效率好,所以随着富集液PH值的增大,回收率逐渐降低。因此本试验选择最佳PH为6。213表面活性剂的用量对浮选效果的影响取200ML原料液于浮选分离柱,操作条件气体流速400MLMIN,PH值为6,浮选时间55MIN,调整表面活性剂的用量,考察活性剂用量对浮选分离效果的影响,结果见图4。浮选分离法就是利用表面活性剂的不同极性,与美味牛肝菌多糖结合,在气体的作用下,以泡沫的形式得到富集,从而达到从美味牛肝菌原料液中分离多糖的目的,因此表面活性剂的用量对浮选效果有着很重要的影响。由图4可知,浮选效果随着活性剂加入量的增加呈先增加后降低的变化趋势,活性剂用量在20ML时,浮选效果最佳。究其原因表面活性剂量太少的时候,泡沫层不明显,收集泡沫比较困难,随着表面活性剂用量的增加,去除率逐渐升高,浮选效果逐渐变好;但当活性剂用量超过某个值后,其浮选效果反而下降;分析认为活性剂用量加大,产生的气泡数量急剧增加,小气泡之间碰撞合并变成大气泡,表面张力下降,所吸附的物质丢失,造成分离效果下降。褂回表面活性剂用量THECONSUMPTIONOFSURFACTANFFML图4表面活性剂的用量对浮选效果的影响FIGURE4THEEFFECTOFSURFACTANTCONSUMPTIONTOFLOTATION214原料液浓度对浮选效果的影响配制不同浓度的原料液,取200ML原料液,调整气体流速为400MLMIN,PH值为6,表面活性剂的用量20ML,浮选时间55MIN,研究不同原料液浓度对浮选分离效果的影响,结果见图5。132董芒墼回I者原料液浓度THECONCENTRATIONOFRAWMATERIALLIQUIDMGML9图5原料液浓度对浮选效果的影响FIGURE5THEEFFECTOFRAWLIQUIDCONCENTRATIONTOFLOTATION由图5可知,总体而言随着料液中多糖质量分数的增大,去除率增加;但浓度为0489MGMI依据曲线回收率变化与浓度变化之比获得此数据似乎为去除率变化的分界点,浓度小于该值,去除率变化很大;而浓度大于此值,去除率变化缓慢,究其原因,应该与原料液的界面张力有关,当浓度小于0458MGML时,溶液界面张力有所变化,但变化不大,而溶液中多糖含量增加,使得浮选分离的去除率增加;一旦浓度大于该值,溶液的界面张力发生显著变化,从而导致浮选分离效率受到制约,增加缓慢,因此试验选择浮选分离最优原料液浓度为0489RAGMI。215浮选时间对浮选效果的影响取200ML原料液浓度为0489MGML,调整气体流速为400MIMIN,PH值为6,表面活性剂的用量为20MI,研究不同浮选时间对浮选效果的影响,结果见图6。誊I1O152O25303540455055606570浮选时间THEFOAMSEPARATIONTIMEMIN图6浮选时间对浮选效果的影响FIGURE6THEEFFECTOFTHETIMETOFLOTATION由图6可知,随着浮选时间的增加,去除率总体呈增加趋势,当浮选时间大于50RAIN后,去除率变化趋缓,在55RAIN,去除率达到最大。究其原因,随着浮选时间的增加,泡沫层厚度、泡沫数量等逐渐增加,在55RAIN左右浮选达到平衡状态,当浮选时间超过55RAIN后,浮选效果下降,主要是因为泡沫不能及时被移走,一部分重新返回水相,因此浮选平衡时间的把握和泡沫的及时移出显得尤为重要。鲫加如譬霉E0兰0L提取与活性2012年第3期22正交试验结果与分析单因素表明浮选法分离美味牛肝菌多糖的最佳工艺条件为原料液浓度0489MGML,PH值为6,表面活性剂的用量20ML,空气流速400MLMIN,浮选时间55MIN。通过对各类影响因素分析可知,在浮选时间为55MIN时,反应系统基本达到平衡,因此,确定浮选时间为55MIN。在其他各因素最佳值附近分别取3个水平表1。依据I。3正交试验表进行设计表2,做4因素3水平正交试验,得出提取浮选法分离美味牛肝菌多糖的最佳工艺参数。表1正交试验因素水平表TABLE1ORTBOGONALTESTACTORSTHELEVELOFTABLE表2正交试验设计及结果TABLE2THEDESIGNANDRESULTSOFORTHOGONALEXPERIMENT试验组数ABCD回收率11111755212228113133379142123807522317836231275673132797832138O493321744178567786337716776067K278200799337873378800K378167763677903380067R0400356618664000由表2可知,影响美味牛肝菌多糖分离的诸因素的主次关系依次是原料液多糖浓度、原料液PH值、表面活性剂用量和空气流速;其最优的浮选工艺为ABC。D,即空气流速300MIMIN,原料液PH值为8,原料液浓度0640MGML,表面活性剂的用量25MI,浮选时间55MIN。在最佳操作条件下对美味牛肝菌多糖进行浮选分离的验证实验,其多糖的回收率为831;所收集的泡沫经消泡处理后获得34MI的消泡液,测定其中多糖的浓度计算回收率值为7943,富集比为62;回收率表现的误差主要是浮选柱内还有部分泡沫未被收集。3模拟宏观动力学研究根据泡沫分离的机理,分离过程主要有2个物理过程,即表面活性物质吸附过程以及泡沫排水过程。前者决定了多糖的吸附量,而后者决定了泡沫的持液量。二者与泡沫中多糖的富集程度密不可分,是多糖泡沫分离模型中必须包含的2个影响因素。由于气泡的鼓入产生了新的气一液界面,气泡在浮力的作用下向上运动,运动过程中在气泡表面与主体溶液间发生吸附。这一过程在金属铬离子的分离研究中一般呈一级动力学特征】。在美味牛肝菌多糖的浮选分离过程中,虽然所分离的多糖分子量变化区间较大,可模拟为一级反应动力学。故可用模拟反应速率方程来描述分离过程的速率,即DDUA一一半一KC30在此基础上采用数学模型法进一步深入研究分离效率、等效反应级数和等效速率常数。在最佳工艺条件下,即原料液浓度0640MGML,PH值为6,表面活性剂的用量25ML,空气流速300MLMIN,根据不同浮选时间,采取间歇法进行浮选分离,在不同时刻进行取样,测定美味牛肝菌多糖的浓度,用INC。C对浮选时间TMIN作图,研究泡沫分离法对多糖分离的模拟动力学过程,结果见图7。一_量反应时间THEREACTIONTIMEMIN图7模拟反应动力学曲线FIGURE7THECURVEOFSIMMULATIONREACTIONKINETICS由图7可知,美味牛肝菌多糖的泡沫分离的过程可等效为一级化学反应,其等效速率常数K一022MIN,等效速率方程为UA一022C。4结论1本试验得出的最佳分离工艺条件为原料液浓度0640MGMI,PH值为6,表面活性剂的用量25MI,空气流速300MLMIN,浮选时间55MIN
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