延胡索的化学成分及质量标准研究

本科生毕业论文论 文 题 目 ： 延胡索的化学成分及质量标准研究 学 生 姓 名 ： 张瑞祥 学 号 ： 20061220 学 院 ： 药 学 院 专 业 方 向 ： 中药学 班 级 ： 2006 级 1 班 指 导 教 师 ： 蔡梅超 论文完成日期 ： 2010 年 6 月 毕业论文（设计）诚信声明书本人声明：本人 张瑞祥 （学号： 20061220 ）所提交的毕业论文 延胡索的化学成分及质量标准研究 是本人在指导教师 蔡梅超 老师指导下独立完成的，论文中所引用他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中加以说明；有关教师、同学和其他人员对本文的写作、修订提出过并为我在论文中加以采纳的意见、建议，均已在我的致谢辞中加以说明并深致谢意。论文作者： （签字） 时间： 2010 年 6 月 日指导教师已阅： （签字） 时间： 2010 年 6 月 日毕业论文（设计）版权使用授权书本毕业论文 延胡索的化学成分及质量标准研究 是本人 张瑞祥 （学号： 20061220 ）在校期间所完成学业的组成部分，是在指导教师 蔡梅超 老师的指导下独立完成的。因此，本人特授权山东中医药大学药学院可将本毕业论文的全部或部分内容编入山东中医药大学药学院本科生优秀毕业论文集（非正式出版） 。论文作者： （签字） 时间： 2010 年 6 月 日指导教师已阅： （签字） 时间： 2010 年 6 月 日1延胡索的化学成分及质量标准研究张瑞祥（2006 级中药学 1 班 学号：20061220）摘要 延胡索临床主要用于活血、理气、止痛。研究证明，延胡索的主要活性成分为延胡索乙素、延胡索甲素，而目前已在延胡索中发现的生物碱类化合物有 20 多种，单一或几种化学成分的研究已不能完全说明延胡索整体的功效，也不能形成完整的延胡索质量标准评价体系。因此，许多科研人员为制定出标准的质量评价体系，进行了大量的试验研究及突破。为探究延胡索的化学成分及延胡索质量标准化研究的方法，在大量文献的基础上,本文综述了延胡索的化学成分及质量标准的实验研究概况。关键字 延胡索；化学成分；质量标准Research progress on chemical compositions and quality standards of Corvdalis vanhusuo W.T.WangAbstract Corvdalis vanhusuo W.T.Wang as a medicine is mainly used for treatmenting invigorate, qi and pain in clinical. Studies show that the main active ingredients are tetrahydropalmatine and corydaline,but currently we have found more than 20 kinds of alkaloid in Corvdalis vanhusuo W.T.Wang,so researches for one or several chemical compositions have not explain the complete efficacy of Corvdalis vanhusuo W.T.Wang accurately,also cant form the system of the standard quality evaluation. In order to formulate the quality standards, mony scientific researchers do mony experiments. In order to explore the methods of researching chemical compositions and quality standards of Corvdalis vanhusuo W.T.Wang， this paper reviews the progress on the studies about chemical compositions and quality standards of Corvdalis vanhusuo W.T.Wang on the basis of much literature,and summarizes methods of the studies.Key words Corvdalis vanhusuo W.T.Wang; chemical compositions; quality standards延胡索为婴粟科(Papaveraceae) 荷包丹亚科紫堇属植物延胡索(Corvdalis vanhusuo W.T.Wang)的干燥块茎，生于海拔较低的旷野草丛或缓坡林缘，主要分布于河南、陕西的南部，以及江苏、安徽、浙江、湖北等地。1 延胡索的化学成分延胡索的主要化学成分是生物碱类化合物，目前从延胡索中分离得到的生物碱2类成分有 20 多种，其中叔胺类成分约占 65%，季胺类成分约占 30%1。延胡索生物碱成分的提取多是高浓度乙醇回流提取，提取物经多次萃取分离纯化各种化学成分，再结合质谱法、柱色谱法、核磁共振和 TLC 等多种定性方法对分离得到的化学成分进行定性分析和结构鉴定，以确定延胡索所含各种生物碱的成分。20 世纪 20-30 年代，研究者先后从延胡索中提出生物碱 13 种，分别称为延胡索甲素（即紫堇碱） 、乙素（dl-四氢巴马亭） 、丙素（厚鸦片碱） 、丁素（L-四氢黄连碱） 、戊素（dl-四氢黄连碱） 、己素、庚素（紫堇磷茎碱） 、辛素、壬素、癸素、子素、丑素、寅素（-高白屈菜碱） ，其中壬素和癸素均为 d-海婴粟碱，而己素、子素和丑素均为 L-四氢非洲防己胺。随着研究的深入，延胡索中被鉴定的生物碱己达 20 多种，除上述外，主要有黄连碱、去氢紫堇碱(即去氢延胡索甲素)、紫堇单酚、去氢延胡索胺等 2,3。此后，傅小勇等人从延胡索块茎的乙醇热提浸膏中又分离得到狮足草碱、二氢血根碱、去氢南天竹啡碱 4，首次从浙江省东阳元胡的块茎中分离 1 个为新生物碱，命名元胡宁(xvyuanhunine) 5。中国药科大学生药学研究室对延胡索 95%乙醇回流提取液经多次提取分离纯化,从延胡索总碱中分离得到了四氢小檗碱、异紫堇球碱、原托品碱、氯仿巴马亭、saulatine、脱氢海罂粟碱 6。其中生物碱 saulatine 为首次从罂粟科植物中分得, 异紫堇球碱为首次从延胡索中分得。张晓丽等对延胡索 85%的乙醇提取液分离纯化，首次分离得到四氢紫堇萨明、oxoglaucine、降氧化北美黄连次碱、山嵛酸、谷甾醇、胡萝卜苷、香草酸、对羟基苯甲酸 7。此后，张晓丽利用硅胶、氧化铝吸附柱色谱、凝胶柱色谱和 ODS 反相吸附柱色谱等分离方法，对中药延胡索 85%的乙醇回流提取物进行了化学成分研究，首次分离得到氧海婴粟碱、6-丙酮基-5, 6-二氢血根碱、-乙酰鸟氨酸、麦角哉-4-烯-3-酮,并且从该属植物中首次分离得到了反式阿魏酸酯的同系物(反式阿魏酸二十二烷醇酯、反式阿魏酸二十烷醇酯和反式阿魏酸十八烷醇酯)的混合物 8。综上可知，延胡索所含生物碱成分种类繁多，主要有延胡索甲素、乙素、丙素、丁素、戊素、己素、庚素、辛素、壬素、癸素、子素、丑素、寅素及其它们的去氢衍生物，另外还含有狮足草碱、二氢血根碱、去氢南天竹啡碱、xvyuanhunine、四氢小檗碱、原托品碱、氯仿巴马亭、saulatine、降氧化北美黄连次碱、山嵛酸、谷3甾醇、胡萝卜苷、香草酸、对羟基苯甲酸、氧海婴粟碱、6-丙酮基-5, 6-二氢血根碱、-乙酰鸟氨酸、麦角哉-4-烯-3-酮等。种类繁多的生物碱成分共同组成了延胡索的有效成分，使得其在活血、理气、止痛等临床功效上得到广泛的应用。除生物碱外, 延胡索中尚含有大量淀粉, 少量黏液质、树脂、挥发油等。汤雏清通过对延胡索及其种植环境的无机元素进行分析，证明了延胡索含有人体必须的元素 Fe, Zn, Mn, Co, Sr, Cu 等，其中 Fe, Zn, Mn 的含量较高 9。据古医药书籍记载延胡索为理气止痛，活血化瘀之要药，药理研究证明延胡索乙素为主要镇痛、镇静成分，去氢延胡索寅素对胃及十二指肠溃疡有疗效 10。2 延胡索的质量标准研究中药质量控制是影响中药现代化进程的关键所在。由于延胡索种质资源及其生长环境的多样性、炮制方法的多样性及化学成分的复杂性等，造成了延胡索药用质量的差异性。为了建立完善的质量评价体系，统一质量标准，许多科研人员对延胡索质量进行了大量的实验研究和探索。九十年代以前，测定延胡索总碱的方法主要有酸碱滴定法和薄层光密度法。朱敏等应用高效薄层层析技术结合薄层扫描仪对延胡索中 11 种生物碱进行了定量测定，以控制延胡索类中药的质量 11；傅小勇等人利用薄层光密度法测定了延胡索中 8 种主要叔胺碱的含量 12；邢振荣等以总生物碱和延胡索乙素的含量为指标，用酸碱滴定法测定生物碱含量，用薄层扫描法测定了延胡索乙素的含量 13。九十年代以后，随着中药化学、分析化学的快速发展，越来越多的实验方法和实验仪器被运用到延胡索质量控制的研究中，药材中几种成分含量的测定对质量的评价较一种成分的定量测定更为有效。曹碗如等用电位滴定法测定了醋制延胡索中总生物碱的含量并用高效液相色谱法测定了延胡索炮制品中延胡索乙素的含量 14。许翔鸿等采用 HPLC 法测定延胡索中主要 6 种生物碱含量，研究了我国野生延胡索种质资源的现状及其质量 15。窦志英等采用 HPLC 法对比测定了延胡索生品、醋炙品、酒炙品、醋烘品、醋煮品延胡索乙素的含量 16。2005 版中国药典一部以延胡索乙素为指标，对延胡索药材规定了 TLC 定性鉴别和 HPLC 含量测定方法，已成为延胡索及其制剂质量评价的重要依据 17。陈郁等采用 10%氨水湿润药材粉末并用氯仿回流提取总生物碱，利用高速逆流色谱法分离制备各生物碱成分并利用反相高效液相色谱法测定延胡索中四种生物碱4成分包括去氢紫堇碱、巴马汀、黄连碱、非洲防己碱的含量，建立了准确、快速分离、测定延胡索中生物碱成分的方法，适用于延胡索药材的质量控制 18。栗贝西 19在文献调研的基础上，系统研究了延胡索的化学成分及质量标准。通过对延胡索系统的化学研究及理化常数、核磁、质谱等测定，分离得到紫堇碱、四氢黄连碱、四氢巴马亭、四氢非洲防己胺、四氢小聚碱、原阿片碱、脱氢海婴粟碱，并利用 TLC, HPLC 法测定了 7 个化合物的纯度，均在 95%以上，可用于延胡索的全面质量研究。采用 HPLC 法建立了延胡索药材 HPLC 指纹图谱，并进行了指纹图谱的方法学研究及中药勾兑研究，标定了 12 个共有峰，对其中的 8 个峰进行了归属确认，认为延胡索中化学成分的组成和相对含量是影响其质量的关键。对延胡索 70%乙醇提取液进行总生物碱含量滴定，并采用 HPLC 法，建立了延胡索中 4 种典型生物碱(紫堇碱、四氢巴马亭、原阿片碱、四氢非洲防己胺)同时进行含量测定的方法，为完善及修订延胡索药材质量标准提供了依据。现代延胡索质量标准的研究方法多集中于高效液相色谱法以及对多组分指纹图谱和谱效关系的研究上，传统的定性定量研究方法逐渐成为 HPLC 研究延胡索质量标准的一种辅助方法，多种定性定量方法的相互结合，将有利于延胡索质量标准的研究与完善。由于延胡索成分复杂，其药效往往是多种生物碱共同作用的结果，以单一延胡索乙素的含量或几种生物碱成分含量为指标的的质量评价并不能准确评价延胡索的质量，因此，要律立完善的延胡索质量评价体系，仍需要不断地研究和探索。延胡索为中医临床理气止痛之要药，由于中药的多组分性、多方向性和多靶位性，传统的化学滴定方法和单一的色谱层析及单一研究某种化学成分定然不能完全说明延胡索的功效特点，因此，多种化学成分的综合研究及高效液相色谱法等先进方法的引入及改进，以及延胡索指纹图谱的建立和完善、中药勾兑研究及谱效学的研究，已成为现代延胡索化学成分及质量标准研究的方向与重点。建立完整的延胡索质量标准评价体系，将有助于延胡索在临床和科学研究的应用。5参考文献 1 贺凯,高建莉,赵光树等.延胡索化学成分、药理作用及质量控制研究进展J.中草药, 2007,38(12): 19091912.2 国家中医药管理局.中药大辞典M.上海:上海科学技术出版社，2002,919.3 江苏中学院.现代中药学大辞典M.北京:人民卫生出版社，2001,857.4 傅小勇，梁文藻，涂国士. 延胡索生物碱的化学研究-元胡块茎中的生物碱J.中草药，1986,17(2):5.5 傅小勇，梁文藻，涂国士.元胡生物碱的化学研究-东阳元胡地上部分的生物碱J.药物分析杂志,1986,6(l):6. 6 许翔鸿,王峥涛,余国奠等.延胡索中生物碱成分的研究.中国药科大学学报,2002,33(6):483-486.7 张晓丽,曲扬,侯家鸣等.延胡索的化学成分.沈阳药科大学学报, 2008,25(7):3.8 张晓丽.延胡索的化学成分研究D.沈阳药科大学硕士学位论文,2007.9 田明