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文档简介

维生素A定性检验,陆嵘辉、方芳1502、1503班,1,脂溶性维生素的测定,1. 维生素、维生素的测定方法和原理,2. 维生素E、维生素K的检测方法,3. 维生素的生理功能,4. 维生素测定未来的发展趋势,2,它是指某些能溶于脂肪和大部分有机溶剂,而不能溶于水的维生素。脂溶性维生素的种类: 维生素A、维生素D、维生素K、维生素E,脂溶性维生素的定义:,3,检测的一般程序:,三氯化锑比色法,紫外分光光度法,荧光分析法,高效液相色谱法,分离富集,常用检测方法:,样品处理,排除干扰物质,检测,4,1维生素A测定原理 : 维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑作用生成蓝色物质,其颜色深浅与溶液中的维生素含量成正比。该蓝色物质虽不稳定,但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定。 VitA + SbCl3 蓝色物质 max 618nm620nm2适用范围 对于维生素A含量不高的使用皂化法处理样品, 对于维生素A高的样品使用研磨法处理样品,5,3.使用仪器:,721-紫外分光光度计,6,4.样品处理样品处理:根据样品性质,分为皂化法、研磨法。(1)皂化法(适用于每克样品中Va510ug)研磨 提取 浓缩 研磨:精确称25g样品 放入盛有35倍质量的无水Na2SO4研钵中 研磨至样品中水分被完全吸收,并均匀质化提取:小心地把均匀质化样品移入锥形瓶内 准确加入50100ml乙醚 振摇抽提2min,使Va溶于乙醚中 使其自行澄清(大约12h),或离心澄清(乙醚易挥发,温度高时应在冷水浴中操作)浓缩:取澄清提取乙醚液25ml,至于比色管内 在7080水浴上抽干 立即加入1ml三氯甲烷溶解,供比色使用,8,5.标准曲线制备: 准确取一定量Va标夜于45个容量瓶内,用三氯甲烷配置标准系列 再取相同数量比色管顺次取1ml三氯甲烷和标准系列使用液1ml 各管加入乙酸酐1滴,制成标准比色系列 于620nm波长处,以三氯甲烷调节吸光度至零点 将标准比色系列按照顺序移入光路前,迅速加入9ml三氯化锑-三氯甲烷溶液 于6s内测定吸光度 以吸光度为纵坐标6.样品测定 于一比色管中加入10ml三氯甲烷,加入一滴乙酸酐为空白液 另一管 加入1ml三氯甲烷,其他比色管分别加入1ml样液及1滴乙酸酐 以下步骤同标准曲线制备注意事项(1)三氯化锑腐蚀性强,不能沾在手上,三氯化锑遇水生成白色沉淀因此用过的仪器要先用稀盐酸浸泡后再清洗。(2)维生素A见光易分解,整个实验应在暗处进行,防止阳光照射,或采 用 棕色玻璃避光。,9,1,4,分子中仅含有碳、氢、氧三种元素,不溶于水,而溶于脂肪和大部分有机溶剂。,脂溶性维生素有相当数量贮存在动物机体的脂肪组织中,若动物吸收得多,体内贮存的也多,2,3,维生素K可在肠道内经微生物合成。动物皮肤中的7脱氢胆固醇可经紫外线照射转变为维生素D3。动物体内不能合成维生素A和维生素E,故均需由饲料提供。,脂溶性维生素共同特点,10,-VE主要用于预防习惯性流产,男妇不一一孕症的辅助治疗,延缓衰老,溶血性贫血,肌营养不良,动脉硬化,急慢性肝炎、肝硬化,胃溃疡,甲状腺和肾上腺机能减退症,痔,脑血管意外后遗症、放射线损伤等。,VA具有促进上皮细胞合成糖多糖,同时抑制角蛋白合成的作用,可维持上皮组织的正常结构和功能;也参与视紫红质的合成,维持暗视觉。,-VD具有促进骨钙化作用。常与VA一起共存于动物性食物中,如鱼肝油、肝脏、蛋黄、牛奶等;人体皮下组织中的7-脱氢 一胆固醇受紫外线照射后可转变为VD3。,一一一-VK治疗和预防骨质疏松症,维生素一一 K2生成骨蛋白质,再与钙共同生成骨质,增加骨密度,防止骨折,治疗维生素K2缺乏性出血症,促进凝血酶原的形成,加速凝血,维持正常的凝血时间。,功能,脂溶性维生素的功能:,11,脂溶性维生素测定未来发展趋势:,维生素的测定方法的研究发展迅猛目前的分析方法就有十几种,包括:分光度法、荧光法、高压液相色谱法、双电压法、示波法、气相色谱法等等。但一样品用不同方法检得到结果不尽相同给用者带来一定分析困难,同时检测时样品的前处理过程过于繁琐,分析时间过长混合物有效成分提取困难,所以未来的检测发展一定是朝着高灵敏度、高精密度、

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