中国药科大学药物分析教研室鉴别试验

中国药科大学 药物分析教研室第八章 杂环类药物的分析Analytical of Heterocyclic drugsEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室本章 简 介本章介绍五类：本章介绍五类：1、吡啶类：异烟肼、尼克刹米和硝苯地平、吡啶类：异烟肼、尼克刹米和硝苯地平2、喹啉类：硫酸奎宁、奎尼丁、盐酸环丙沙星等、喹啉类：硫酸奎宁、奎尼丁、盐酸环丙沙星等3、托烷类：硫酸阿托品、氢溴酸东莨菪碱等、托烷类：硫酸阿托品、氢溴酸东莨菪碱等4、吩噻嗪类：氯丙嗪、异丙嗪、奋乃静和盐酸硫利达嗪等、吩噻嗪类：氯丙嗪、异丙嗪、奋乃静和盐酸硫利达嗪等5、苯并二氮杂卓类：地西泮、奥沙西泮和氯氮卓等、苯并二氮杂卓类：地西泮、奥沙西泮和氯氮卓等杂环化合物：碳环中夹杂有非碳原子的环状有机化合物，其杂环化合物：碳环中夹杂有非碳原子的环状有机化合物，其中非碳原子称为杂原子，一般为中非碳原子称为杂原子，一般为 O、 S、 N等。在化学合成药等。在化学合成药中，已成为现代药物中应用最多、最广的一大类。中，已成为现代药物中应用最多、最广的一大类。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室第一节 吡啶类药物v结构与化学性质含有 N原子的六元单环，例如：异烟肼、尼克刹米和硝苯地平 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室主要化 学 性 质与鉴别 反 应v 弱碱性： 吡啶环 N原子为碱性原子，吡啶环 pKb为 8.8（水中）尼克刹米：尼克刹米： 除了吡啶环上的 N原子外，吡啶环 位被酰氨基取代，遇碱水解释放二乙胺。Chp2005鉴别：取本品 10滴，加氢氧化钠试液 3ml ，加热，即发生二乙胺的臭气， 能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室主要化 学 性 质与鉴别 反 应v还原性：还原性： 异烟肼吡啶环异烟肼吡啶环 位被酰肼所取代，有较强的还原性，可被不位被酰肼所取代，有较强的还原性，可被不同的氧化剂氧化，也可与某些含有羰基的化合物发生缩合反应。同的氧化剂氧化，也可与某些含有羰基的化合物发生缩合反应。异烟肼与硝酸银银镜反应Chp2005：取本品约 10mg，置试管中，加水 2ml 溶解后，加氨制硝酸银试液 1ml ，即发生 气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室缩 合反 应v Chp2005异烟肼鉴别：取本品约 0.1g，加水 5ml 溶解后，加10香草醛的乙醇溶液 1ml， 摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶；滤过，用稀乙醇重结晶，在 105 干燥后，依法 测定（附录 C），熔点为 228 231 ，熔融时同时分解。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室异 烟 肼 的其他 鉴别 反 应v 与亚硒酸作用，可将其还原为红色硒的沉淀 与 1,2-萘醌 -4-磺酸在碱性介质中，可缩合呈红色。红色Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室主要化 学 性 质与鉴别 反 应v吡啶环的特性： 吡啶环开环吡啶环开环 戊烯二醛反应（戊烯二醛反应（ kning反应）反应）适用于适用于 、 位无取代的异烟肼、尼克刹米位无取代的异烟肼、尼克刹米 Chp2005尼克刹米鉴别反应：取本品 1 滴，加水 50ml，摇匀，分取 2ml ，加溴化氰试液 2ml 与 2.5苯胺溶 液 3ml ，摇匀，溶液渐显黄色。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室主要化 学 性 质与鉴别 反 应v吡啶环的特性 ：二硝基氯苯反应（ Vongerichten反应）：在无水的条件下，吡啶及其衍生物与 3,4-二硝基氯苯混合共热或加热至熔融，冷却后，加醇制氢氧化钾溶液将残渣溶解，溶液呈紫红色。异烟肼氧化成羧基；尼克刹米水解成羧基 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室吡啶环 的 鉴别 反 应v形成沉淀的反应v可与 重金属盐类或苦味酸 形成沉淀尼克刹米的鉴别：取本品 2滴，加水 1ml ，摇匀，加硫酸铜试液 2滴与硫氰酸铵试液 3 滴，即生 成草绿色沉淀。 异烟肼、尼克刹米可与氯化汞形成白色沉淀。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室分解 产 物的 鉴别 反 应v异烟肼、尼克刹米等与无水碳酸钠或氢氧化钙共热，可发生脱羧降解，并有吡啶臭味逸出。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室紫外吸收光 谱鉴别v芳杂环在紫外光区有特征吸收药物 溶剂 max (nm) max (nm)异烟肼 HCl (0.01mol/L) 265 约 420水 266 234 378尼克刹米 HCl (0.01mol/L) 263 285NaOH (0.01mol/L) 255 840260 860硝苯地平 无水乙醇 333 140Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室有 关 物 质检查一、异烟肼中肼的检查异烟肼不稳定，游离肼即可能在原料中引入，又可能在贮藏过程中降解诱变剂和致癌物质1、 TLC检查方法：取本品，加水制成每 1ml 中含 50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼 加水制成每 1ml 中含 0.20mg（相当于游离肼50g ）的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录 B ）试验，吸取供试品溶液 10l 与对照溶液 2l ，分别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇丙醇 (3:2) 为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液， 15分钟后检视。在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。 限度： 0.02%。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室2、比浊法JP(14)采用样品中加水杨酸的乙醇溶液观察浑浊的方法专属性差3、差示分光光度法原理：肼对 -二甲氨基苯甲醛 黄色缩合物（对 -二甲氨基苯甲醛连氮） 465nm波长有最大吸收异烟肼对 -二甲氨基苯甲醛 缩合物（对 -二甲氨基苄叉） 465nm波长无吸收加入 3%丙酮，可使得黄色缩合物（对 -二甲氨基苯甲醛连氮）变为无色的二甲基甲酮连氮，继而作为参比，用于测定 A456nm，并以对照品比较法计算游离肼的含量。专属、准确、灵敏，最低检测限可达 0.1g/ml。有 关 物 质检查一、异烟肼中肼的检查一、异烟肼中肼的检查Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室有 关 物 质检查二、尼克刹米中有关物质的检查v TLCv 无杂质对照品高低浓度对比法检查方法：取本品，加甲醇制成每 1ml 中含 40mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇分别稀释成每 1ml 中含 0.4mg 和 40g的溶液，作为对照溶液 (1)和 (2) 。照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述三种溶液各 10l ，分别点于同一硅胶 GF254薄层板上，以氯仿丙醇 (75:25)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液 (2)的主斑点比较，不得更深 ；如有 1点超过时，应不深于对照溶液 (1)的主斑点。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室有 关 物 质检查遇光不稳定光化学歧化作用HPLC法检查(A) (B)三、硝苯地平中的有关物质检查三、硝苯地平中的有关物质检查Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室HPLC法 检查硝 苯 地平中的有 关 物 质检查v避光操作v 取本品，精密称定，加甲醇分别制成每 1ml中含 1mg和 0.2mg的溶液，作为供试品溶液 和 。v 取硝苯地平有关杂质对照品 A和 B各 10mg， 精密称定，置 50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液 。分别精密量取供试 品溶液 和对照品溶液 各 1ml，置 100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为对照品溶液 。v 照高效液相色谱法（附录 D）试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇 -水(3:2)为流动相；检测波长为 235nm。取对照品溶液 20l注入液相色谱仪，调节 检测灵敏度，使杂质 A和 B成分色谱峰的峰高为满量程的 20；杂质 A和 B之间，杂质 B与硝苯地平之间的分离度均应符合规定。v 取供试品溶液 和对照品溶液 各 20l，分别注入液相色谱仪。记录色谱图至主成分峰保留时间的 2倍。供试品溶液 如出现与对照品溶液 中杂质 A和 B相对应的峰，其峰面积不得大于对照品溶液 中杂质 A和 B的面积；如出现除杂质 A和 B以外的其他杂质峰，其峰面积不得大于对照品溶液 中硝苯地平的峰面积； 各杂质总量不得大于 0.5。供试品溶液 中小于对照品溶液 中硝苯地平峰面积的 10 以下的杂质峰忽略不计。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室第二节 喹啉类药物硫酸奎宁 硫酸奎宁丁 盐酸环丙沙星(quinine sulfate) (quinidine sulfate) (ciprofloxacin hydrochloride) 结构特点：含有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环，环上杂原子的反应性能基本与吡啶相同。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室主要化 学 性 质v 碱 性： 喹啉环上的 N原子具有碱性，与强酸成盐v 环丙沙星： 盐酸；v 奎宁、奎尼丁： 二元酸硫酸（喹核碱含脂环氮，碱性强）v 奎宁 (左旋体 )： pKb1为 5.07 pKb2为 9.7，饱和水溶液 pH为 8.8，易溶于氯仿无水乙醇 (2:1)v 奎尼丁 (右旋体 )： pKb1为 5.4 pKb2为 10，易溶于沸水或乙醇。v 旋 光 性： 硫酸奎宁 (左旋体 )，比旋度为 -237 至 -244硫酸奎宁丁 (右旋体 )，比旋度为 +275 至 +290盐酸环丙沙星，无旋光性v 荧光特性： 硫酸奎宁和硫酸奎宁丁在稀硫酸中显蓝色荧光，盐酸环丙沙星无荧光。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室鉴别试验一、绿奎宁反应（ Thalleioquin）用于奎宁和奎尼丁的鉴别鉴别方法 ：取本品约 20mg，加水 20ml溶解后，分取 5ml，加溴试液 3滴与氨试液 1ml ，即显翠绿色。 硫酸奎宁和硫酸奎尼丁的 反应机理 如图取其水溶液加溴试液 2 3滴和氨试液 1ml，即显翠绿色；加酸至中性显蓝色；酸性则呈紫红色；翠绿色可转溶于醇、氯仿中不溶于醚。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室鉴别试验二、光谱特征v紫外吸收光谱 盐酸环丙沙星：取本品，加0.1mol/L盐酸溶液制成每 1ml中含 8g 的溶液，照分光光度法 (附录 A) 测定，在 277nm与 315nm的波长处有最大吸收。 v荧光光谱 硫酸奎宁：取本品约 20mg，加水 20ml溶解后，分取溶液 10ml，加稀硫酸使成酸 性，即显蓝色荧光。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室鉴别试验v硫酸 奎宁、 硫酸 奎尼丁 硫酸根氯化钡白色沉淀v盐酸 环丙沙星 盐酸根硝酸银白色沉淀三、无机酸盐三、无机酸盐Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室特殊 杂质检查一、硫酸奎宁中的特殊杂质检查v 酸度酸性杂质取本品 0.2g，加水 20ml溶解后，测定 pH值应为 5.7 6.6 。 v 氯仿乙醇不溶物取本品 2g，加氯仿无水乙醇 (2:1) 的混合液 15ml，在 50 加热10min后，用称定重量的垂熔坩埚滤过，滤渣用上述混合液分 5 次洗涤，每次10ml ，在 105 干燥至恒重，遗留残渣不得过 2mg。 v 其他金鸡纳碱（ TLC）取本品，加稀乙醇制成每 1ml 含 10mg的溶液，作为供试品溶液；精 密量取适量，加稀乙醇稀释制成每 1ml 中含 50g 的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱 法（附录 B）试验，吸取上述两种溶液各 5l，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以氯 仿丙酮 二乙胺二乙胺 (5:4:1.25)为展开剂，展开后，微热使展开剂挥散，喷以碘铂酸钾试 液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室特殊 杂质检查二、盐酸环丙沙星中特殊杂质检查v 酸 度取本品，加水制成每 1ml中含 25mg的溶液，测定 pH值应为 3.0 4.5。 v 溶液的澄清度和颜色取本品 0.1g，加水 10ml溶解后，溶液应澄清；如显色，与黄色或黄绿色 4号标准比色液 (附录 A)比较，不得更深。 v 有关物质（ HPLC）ODS色谱柱；以 0.05mol/L枸橼酸溶液 -乙腈 (82:18)用三乙胺调节 pH值至 3.5为流动相；检测波长为 277nm。理论板数按盐酸环丙沙星峰计算应不低 于 2000，盐酸环丙沙星峰与相邻杂质峰的分离度应符合规定。 测定法 取本品适量，加水制成每 1ml中含 0.4mg的溶液，取 20l注入液相色谱仪，调节检测灵敏度 和记录仪衰减，使主成分的峰高为记录仪满量程的 2 4倍，记录时间应为主成分峰保留时间的 2倍。按面积 归一化法计算，杂质总量不得过 1.5。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室第三节 托烷类药物硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱(atropine) (scopolamine hydrochloride)结构特点：大多数为莨菪烷衍生的氨基醇与不同的有机酸缩合成酯的生物碱，常见的有颠茄生物碱和古柯生物碱。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.LOGO 中国药科大学 药物分析教研室化 学 性 质v水解性 （酯水解生成醇和酸）阿托品 莨菪醇 莨菪酸Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client