课件：科内讲课脑脊液常规检验规范.ppt

脑脊液 常规检验规范,玉林市红十字会医院检验科临检组 2016年7月20日,脑脊液标本的采集与处理,1.脑脊液主要由临床医师采集，一般行腰椎穿剌，必要时从小脑延髓池或侧脑室穿剌采集。将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，每管l2ml： 第一管做化学或免疫学检査 第二管做病原微生物学检査 第三管做理学和显微镜检査。,2.标本采集后无特殊处理要求，应立即送检， 不超过1小时。久置可致细胞破坏，影响细胞计数及分类检査，葡萄糖分解使含量降低，以及病原菌破坏或溶解。病原微生物检验标本须室温条件下运送，以免冷藏致某些微生物死亡。,脑脊液标本的采集与处理,3.细胞计数管应避免标本凝固，遇高蛋白标本 时，可用EDTA盐抗凝（血常规管）。,脑脊液标本的采集与处理,检验项目,一般形状检查,化学检查,有形成分及病原微生物检查,免疫学检查,一般形状检查,颜色,正常脑脊液颜色为无色透明，病理情况下可有不同的改变： 1.红色：穿刺损伤出血，蛛网膜下腔出血，脑室出血。 2.黄色：颅内陈旧性出血。 3.米汤样：为白细胞增多，见于化脓性脑膜炎 4.绿色：可见于铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌引起的脑膜炎。 5.褐色或黑色 黑色可见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素瘤；褐色可见于脑出血的康复期。,透明度,welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience,1.正常为清澈透明；病理情况下可有不同改变的混浊 脑脊液中细胞数大于300106/L或含大量细菌、真菌时呈不同程度混浊。 2.结核性脑膜炎时呈毛玻璃样浑浊； 3.化脓性脑膜炎时呈脓性浑浊； 4.正常脑脊液可因穿刺过程中带入红细胞而呈轻度浑浊。,化学检验,Pandya试验： 脑脊液中球蛋白（glubin，Glb）与苯酚结合， 可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀， 即潘（Pandy)试验阳性,蛋白质定性试验,阴性：清澈透明，不显雾状。 阳性： ：极弱阳性微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。 1+：为灰白色云雾状； 2 + ：为白色浑 浊； 3 +：为白色浓絮状沉淀； 4 +：为白色凝块,结果判定,Pandya试验临床意义,正常时多为阴性。有脑组织和脑膜感染性疾患（如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、中 枢神经系统梅毒、脊髓灰白质炎和流行性脑炎等）、 蛛网膜下腔出血及蛛网膜下腔梗阻等时常呈阳性反 应。脑出血时多呈强阳性反应，如外伤性血液混入脑 脊液中，亦可呈阳性反应。,有形成分分析,一、红细胞计数： 1、澄淸标本：可混匀脑脊液后用滴管直接滴入血细胞计数池，静置1分钟，在高倍镜下.计数5个大方格内红细胞数，乘以2即为每微升红细胞数。 如用升表示，则再乘以106。,一、红细胞计数： 2、浑浊或血性标本：取混匀的脑脊液20l,加入红细胞稀释液0.38ml（稀释20倍），混匀后充池，静置下沉23分钟，计数中央大方格四角和正中中方格内红细胞数（5个中方格），乘以1000即为毎 升脑脊液的细胞总数。对压线细胞按“数上不数 下、数左不数右”的原则。,二、白细胞计数 1、非血性标本：小试管内加入冰酸酸12滴，转动试管，使内壁沾有冰酸酸后倾去，然后滴加混匀脑脊液34滴，待数分钟红细胞溶解后，混匀充池， 按白细胞计数法计数。,二、白细胞计数 2、混浊或血性标本：将混匀脑脊液用1%冰醋酸溶液按全血白细胞计数法稀释后进行计数。,二、白细胞计数 校正 因穿刺出血而来的白细胞数，用下式公式进行校正。 脑脊液白细胞校正数=脑脊液白细胞计数值出血增加的白细胞数 出血增加的白细胞数=外周血白细胞数脑脊液红细胞数/外周血红细胞数 总式,三、细胞分类 1、直接分类法 白细胞计数后，将低倍镜换到高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核形态分别计数单个核细胞（包括淋巴细胞、单核细胞）和多个核细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白细胞数少于100个，应直接写出单个核、多个核细胞的具体数字，用分数表示。如：白细胞50个中淋巴细胞有30个，报告：淋巴细胞30/50。,三、细胞分类 2、染色分类法 如直接分类法不易区分细胞或临床需要分类结果时，可将脑脊液离心沉淀1500转5分钟，取沉淀物2滴，加正常血清1滴，推片制成薄膜，置室温或37温箱内待干，行瑞氏染色（经验：染液3滴+缓冲液7滴，染3分钟。否则染黑不易辩认细胞类型）。用高倍镜或油镜分类。如见有不能分类的细胞，应请有经验技术人员复核，并另行描述报告，如脑膜白血病细胞或肿瘤细胞、内皮细胞等。 如果用玻片离心沉淀仪，则取0.5ml脑脊液制片。 如果白细胞总数在30个以下，可不做分类计数。,四、仪器法细胞计数、分类 仪器：血细胞分析仪 要求： 标本无凝固物； 清洗仪器管道，直至细胞本底为0。 最好使用体液细胞模式（专用通道） 检测标本。,细胞计数参考区间,红细胞计数：0106 /L。 白细胞计数： 成人（08）106/L; 儿童（015）106/L； 新生儿（030）106/L。,细胞分类参考区间,成人： 淋巴细胞40% 80% 单核细胞15% 45%， 中性粒細胞6%。 新生儿 ： 淋巴细胞5%35% 单核细胞 50% 90% 中性粒細胞8%。,脑脊液常规检验注意事项,1.计数应在标本采集后1小时内完成。如放置过久，细胞会破坏、沉淀或纤维蛋白礙集，导致计数不准确。 2.细胞计数时，应注意新型隐球菌与白细胞区别。前者不溶于醋酸，加优质墨汁后可见荚膜。 3.使用计数板后应立即淸洗，以免细胞或其他成分黏附在计数板上，影响使用。,脑脊液常规检验临床意义,1、中枢神经系统病变时，脑脊液细胞数可增多， 增多程度及细胞种类与病变性质有关。 2、病毒性脑膜炎、结核性膜炎或真菌性脑膜炎 时，细胞数可中度增加，常以淋巴细胞为主，早 期伴有中性粒细胞及单核细胞。 3、细菌感染时，如化脓性脑膜炎，细胞数显著增 加，早期以中性粒细胞为主。,脑脊液常规检验临床意义,4、脑寄生虫病时，可见较多嗜酸性粒细胞。 5、脑室或蛛网膜下腔出血时，脑脊液内可见多数 红细胞、红细胞吞噬细胞及含铁血黄素细跑。 6、脑膜白血病和脑膜癌时，可见白血病细胞或癌 细胞。,墨汁染色,墨汁染色原理：在菌细胞周围存在黏多糖荚膜物，应用墨汁湿片法能证明荚膜的存在，新型隐球菌的荚膜取代了墨汁中的胶状碳粒，呈现清楚无色透明的晕圈环绕着菌体,新型隐球菌染色镜检,1、将标本3000转离心10分钟，取10l沉淀 物放于载玻片上。 2、 取10l墨汁加于沉淀物上，再覆盖上盖 玻片，注意先将盖玻片一边接触墨汁而后 缓缓斜放下，使其不产生气泡。 3、在低倍镜下寻找有荚膜的菌细胞，找到 后，转换高倍镜确认。,新型隐球菌染色镜检,4、结果报告 (1)如果涂片在墨汁的黑背景下呈现清楚的晕圈，并且在晕圈内可见菌细胞，报告“墨汁染色阳性”。 (2)如果涂片在墨汁的黑背景下无清楚的晕圈， 报告“墨汁染色阴性”。,新型隐球菌染色镜检注意事项,1、加的墨汁不要太多，以免加盖玻片时外溢造成污染。 2、脑脊液墨汁染色阳性则高度怀疑新型隐球菌。 3、注意将隐球菌与白细胞进行仔细鉴别， 隐球菌菌体中央有折光颗粒，而白细胞没有。,新型隐球菌染色镜检注意事项,4、因为墨汁染液不能高压灭菌，每次操作应进行阴性对照，以防墨汁污染造成假阳性。 5、阳性标本要求送微生物室培养鉴定，同时请主管辨认复核。,脑脊液常规检验分析后质量控制： 1、危急值报告。 2、复查复核、审核签发。 3、保留标本。 4、特殊交班。,Thank you!,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料