课件：第二十七章免疫增殖病及检验.ppt

,免疫学检验,第二十七章 免疫增殖病及检验,免疫增殖病的概念和分类 单克隆丙种球蛋白病的概念 常见的单克隆丙种球蛋白病 本周蛋白、M蛋白的概念 单克隆丙种球蛋白病的检测,本章要点,目 录,免疫增殖病（immunoproliferative disease）是免疫系统异常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要临床表现包括免疫球蛋白数量和功能的异常，因此通过异常免疫球蛋白的检测，可以为该类疾病的诊断提供重要依据，检测异常免疫球蛋白已经成为临床免疫检验的重要检测内容。,前 言,第一节 概述,免疫增殖病的概念 免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生（包括良性或恶性）所致的一组疾病。,免疫增殖病的分类,免疫增殖病的分类,免疫球蛋白病的概念 由于B细胞或浆细胞异常增殖所引起的免疫球蛋白的异常增加，从而导致机体病理损伤的免疫增殖病。,分类,单克隆免疫球蛋白病（单一克隆、恶性）,多克隆免疫球蛋白病（全面、良性或继发）,第二节 单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征,突出特点：患者血清存在异常增多的单克隆免疫球蛋白 M蛋白（monoclonal protein）：单克隆免疫球蛋白理化性质十分均一，但是多无免疫活性，可以是IgG、IgM、IgA、IgE或IgD，也可以是或轻链中的任何一型。 本周蛋白（Bence-Jone protein）：M蛋白的轻链分子量较小，容易从尿中排出，最早由Bence-Jones测知。,一、多发性骨髓瘤,多发性骨髓瘤（multiple myeloma）是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤，因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。近年发病有增高趋势，男性多发，男女比约为2:1，平均发病年龄是46.5岁。,临床表现： 骨痛 贫血 感染 高黏血症表现 肾功能损害,患者骨破坏所致头颅肿物及眼球突出,特点： 血清中有大量单克隆M蛋白或尿中有大量本周蛋白 免疫球蛋白含量明显降低 骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤 原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松,不同类型的多发性骨髓瘤特点,二、原发性巨球蛋白血症,原发性巨球蛋白血症（macroglobulinemia）是以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病，好发于老年男性。 主要表现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾肿大等为主要体征并伴有血黏滞过高综合征。,实验室检查： 血清中患者血清IgM水平往往超过300mg/dl 血清分离不出或呈胶冻状，电泳时血清有时难以泳动，集中于原点是该病的电泳特征 骨髓象可见淋巴细胞、浆细胞和介乎两者之间的浆细胞样淋巴细胞明显增多 有些IgM分子具有冷球蛋白的特征 有约40的病人可出现本周蛋白尿,三、良性单克隆丙种球蛋白病,良性单克隆丙种球蛋白病（benign monoclonal gammopathy）是指血清中出现高水平免疫球蛋白，但并无浆细胞恶性增殖的疾病。一般无临床症状，往往因其它疾病就诊时发现血中有M蛋白，但其并不呈进行性增加，在少部分正常老年人群中也可出现上述情况。,三、恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别诊断,恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别,四、冷球蛋白血症,冷球蛋白（cryoglobulin）：指温度低于30 时易自发形成沉淀，加温后又可溶解的免疫球蛋白 冷球蛋白血症：当血中含有冷球蛋白时称为冷球蛋白血症,特点： 多见于某些原发性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病 患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度、红细胞凝集、血栓形成等病理表现。 常见症状有雷诺现象（即寒冷性肢端紫绀）、皮肤紫癜、坏死、溃疡、寒冷性荨麻疹、关节痛、肾损害、神经系统病变（如感觉麻木、运动障碍等）以及肝、脾等器官损害。,五、淀粉样变性,淀粉样变性（amyloidosis）是组织器官中有淀粉样物质沉积的一种病理现象。该病比较少见，常可累及各种不同的组织和器官，但以小动脉、肾小球、肝、脾和肾上腺最为常见。,第三节 单克隆丙种球蛋白病的检测方法,血清蛋白区带电泳 免疫球蛋白定量检测 免疫球蛋白的分类鉴定 本周蛋白检测 冷球蛋白检测,一、血清蛋白区带电泳,血清区带电泳是测定M蛋白的一种定性实验，常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。 M蛋白在电泳时出现于区代中，不同类型的M蛋白的电泳后所处位置。,二、免疫球蛋白定量检测,免疫球蛋白定量测定较常用的方法有单向扩散法与免疫比浊法，前者较为简便，后者更为准确迅速。 恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种球蛋白的显著增高。 在良性丙种球蛋白病的血清标本中，M蛋白的升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高,三、免疫球蛋白的分类鉴定,免疫电泳 免疫选择电泳 免疫固定电泳,免疫电泳： 免疫电泳是将琼脂糖电泳和免疫双向扩散相结合的一项技术。 血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定的抗血清进行免疫扩散，阳性样本的M蛋白将在适当的部位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、电泳位置及沉淀弧的形状可以对M蛋白作出判定。,正常及某些患者免疫电泳图谱,上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白 a：抗正常人血清；b：抗IgG血清；c：抗IgA血清；d：抗IgM血清 e：抗血清；f：抗血清A：IgA/型骨髓瘤； B：IgG/型骨髓瘤； C：IgG重链病,免疫选择电泳： 制备含抗或血清的薄层琼脂板，打孔并加入待测标本进行火箭电泳，待形成相应的火箭样沉淀峰后，于孔的两侧各挖一槽，加入抗某类免疫球蛋白血清或另一型抗轻链血清，温育扩散后，根据沉淀弧形成的情况，进行分析鉴定。,免疫选择电泳图谱示意图,琼脂中含抗及抗抗血清，示例孔中为血清标本， 槽中为抗IgA重链抗血清 A：正常人；B：重链病；C：IgA骨髓瘤,免疫固定电泳： 免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反应相结合的定性实验。 与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵敏性，M蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界限明确的区带，而多克隆增殖或正常血清球蛋白区带则比较弥散。,IgG/型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱,四、本周蛋白检测,3.直接定量分析,尿液透析浓缩50倍后进行,2.免疫固定电泳,1.本周蛋白定性检查(筛查),五、冷球蛋白检测,冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质，在4时自发沉淀，加温至37时又可溶解，故常利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进行测定。,取患者外周血，分离出血清置4冰箱中，一般在24h72h出现沉淀，若1周仍不出现沉淀者方可判断为阴性。 如形成沉淀，再置37温育使其复溶，也可将冷沉淀物离心洗涤后做定性与定量分析,异常免疫球蛋白检测的应用原则 凡检出无法解释的免疫球蛋白异常增高，都应建议做进一步的检查。 初筛实验：区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测或尿本-周蛋白定性。 确证实验：免疫电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋白亚型定量和血清及尿中轻链等检测。,免疫增殖性疾病是指由于淋巴细胞发生恶性转化所导致的一组疾病。免疫球蛋白的多克隆增殖多为良性；单克隆增殖多呈恶性发展趋势。 浆细胞异常增殖产生大量无正常功能及完整结构的异常免疫球蛋白，可导致相应器官的功能障碍。 免疫球蛋白异常增殖病的免疫检测方法有：血清区带电泳；免疫电泳；免疫固定电泳；血清免疫球蛋白定量等。 一般应采用两种以上的检测方法互相印证。,小 结,小 结,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用