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第4章 生物化学与分子生物学技术实践 第1节 生物成分的分离与测定技术学业分层测评 (建议用时:45分钟)学业达标1下列关于蛋白质的提取的说法,不正确的是()A一般用机械方法破碎生物组织B破碎细胞常用的方法有研磨法、超声波法和酶解法C一般来说,酸性蛋白质要用酸性溶液抽提D抽提得到的蛋白质粗提取物可用离心法去除固体杂质【解析】蛋白质呈溶液状态释放出来后,要根据蛋白质的不同特性,选择不同的溶液进行抽提,如酸性蛋白质可以用偏碱性溶液抽提。 【答案】C2在水蒸气蒸馏装置中,从进水口通入水的作用是()A加热B防止过度沸腾C过滤 D冷凝【解析】在使用水蒸气蒸馏法提取植物芳香油时,需要用到蒸馏装置,在装置中,进、出水口之间水是不断流动的,以降低装置温度,使水蒸气与芳香油混合物冷却成为液体,便于分离。【答案】D3仔细观察下图,所带负电荷最少的球蛋白是()血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱示意图A1球蛋白 B2球蛋白C球蛋白 D球蛋白【解析】对于几种球蛋白来说直径相差不大,引起泳动速度的差异主要来自于所带电荷多少,由图可知球蛋白由右向左泳动,因右侧为负极。且球蛋白距点样处最近,所以球蛋白所带负电荷最少。【答案】D4相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的分离过程可表示为下列哪一项() AB CD【解析】相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部,通过的路程较短,移动速度较快;相对分子质量较小的蛋白质分子可以进入凝胶颗粒内部,通过的路程较长,移动速度较慢。因此,样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出,相对分子质量较小的蛋白质后流出。【答案】B5电泳实现样品中各种蛋白质分子的分离是利用了() 【导学号:67850053】A各种分子带电性质的差异B分子本身的大小不同C分子形状的不同D以上都正确【解析】电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。【答案】D6水蒸气蒸馏法的基本原理是()A植物芳香油易溶于水B植物芳香油沸点比水高C水蒸气蒸馏法得到的油水混合物性质稳定D植物芳香油挥发性较强,易被水蒸气带出,冷却后又与水分离【解析】水蒸气蒸馏法的原理是植物芳香油易挥发,冷凝后易与水分离。【答案】D7下列关于提取橘皮中芳香油的说法,正确的是()A橘皮芳香油只适用水蒸气蒸馏法提取B在蒸馏时,芳香油流出形成蒸气,经导管流入收集瓶C蒸馏结束后,锥形瓶中收集液经分离即可得到纯净芳香油D采用分液漏斗可以相对准确地分离到芳香油【解析】橘皮芳香油可以用蒸馏法提取,也可以用压榨法提取;在蒸馏时,随温度升高,芳香油流出并随水一起形成蒸气,蒸气再通过冷凝器,经过导管流入收集瓶;由于油的密度比水小,蒸馏结束后,收集液经过静置使油浮于水面,再用分液漏斗分离得到的芳香油,还需进一步处理,才能得到纯净的芳香油。【答案】D8植物芳香油生产的原料采自植物的花、茎、叶、果实、根等部位,出油量的多少及油的品质与多种因素有关,其中在对材料的处理上,下列哪项是错误的()A应及时采收B摘收部位要符合要求C对原料应及时进行处理D摘收后不能马上加工,应停放一段时间后加工【解析】影响材料出油量的因素很多,主要有采收时间、取材部位、处理时间是否及时等。【答案】D9有关植物芳香油的提取方法的叙述正确的是()植物芳香油具有较强的挥发性,能随水蒸气蒸发,因此可利用蒸馏法提取压榨法是利用机械压力榨出芳香油将新鲜的植物材料浸泡在用于萃取的有机溶剂中,然后蒸去溶剂,即可获得植物芳香油,此为萃取法A BC D【解析】水蒸气蒸馏法适用于提取挥发性较强且不溶于水的芳香油;压榨法是用机械压力榨出芳香油;萃取法则是用有机溶剂提取芳香油。【答案】D10某生物兴趣小组在学习完“蛋白质的提取和分离”后,联系相关实验,准备从猪肝脏研磨液中初步提取过氧化氢酶,设计的“过氧化氢酶提取、分离流程图”如下。试回答下列问题:实验准备(配制缓冲液及肝细胞悬液)样品处理(洗涤、破碎、离心等)蛋白质粗分离(透析)纯化、纯度鉴定(凝胶色谱法、电泳等)(1)向肝细胞悬液中加入一定量的pH7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎肝细胞,破碎细胞的原理是_。与使用蒸馏水相比,使用缓冲液的优点是_。(2)蛋白质粗分离阶段透析的目的是_。(3)电泳利用了待分离样品中各种分子_等的差异,而产生不同的迁移速度,实现各种分子的分离。(4)实验小组以3%过氧化氢溶液和获得的过氧化氢酶为材料进行温度对酶催化活性影响的探究,得到如下图所示的结果,根据实验结果得出“过氧化氢酶能耐受100 高温”的结论,请问这一结论是否可靠?为什么?_。【解析】动物肝脏细胞没有细胞壁,可以用浓度低于细胞内液的溶液使细胞吸水涨破,为保证酶溶液pH基本稳定,避免因pH变化影响过氧化氢酶活性,可使用缓冲溶液。蛋白质粗分离阶段透析可除去小分子杂质。电泳时利用待分离样品的所带净电荷的多少、分子大小、形状等的差异实现各种分子的分离。据图可知在100 高温时过氧化氢分解,但是这时酶很有可能已经失活,因为高温也能促进过氧化氢分解加快。【答案】(1)渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破)可以保证酶溶液pH基本稳定,避免因pH变化影响过氧化氢酶活性(2)除去小分子化合物(杂质)(3)所带净电荷的多少、分子大小、形状(答对两项即可)(4)不可靠,高温也能使过氧化氢分解加快能力提升11(多选)对用萃取法来提取芳香油的解释下列叙述正确的有() 【导学号:67850054】A用萃取法来提取芳香油,要求原料尽可能细小B用萃取法提取的芳香油要易溶于有机溶剂C在浸泡植物材料时,要选用低沸点的有机溶剂D芳香油充分溶解于有机溶剂后,再把芳香油蒸发出来,剩余有机溶剂,从而使芳香油和有机溶剂分离【解析】萃取法是使植物芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发出溶剂即可获得提取物,此方法要求原料尽可能细小,而且有机溶剂的沸点要低于芳香油的沸点。【答案】ABC12下面说法错误的是()A在一定范围内,缓冲溶液能够抵抗外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变B缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成C电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内【解析】透析袋一般用硝酸纤维素制成,又称玻璃纸。透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。【答案】D13已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其相对分子质量大小、电荷的性质和数量情况如图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是()A分子甲与分子乙所带电荷性质不同B若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最慢C若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min,分子丁存在于沉淀中,则分子甲也一定存在于沉淀中D将样品装入透析袋中透析12 h,若分子丙保留在袋内,则分子乙也一定保留在袋内【解析】凝胶色谱法是依据相对分子质量的大小分离蛋白质,相对分子质量较大的蛋白质在凝胶颗粒外部移动,路程短、移动速度较快。甲的相对分子质量最小,移动速度最慢。【答案】B14下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:甲乙(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有_功能。(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是_;乙装置中,C溶液的作用是_。(3)甲装置用于_,目的是_。用乙装置分离蛋白质的方法叫_,是根据_分离蛋白质的有效方法。(4)用乙装置分离血红蛋白时,待_时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。【解析】用透析法(如图甲)对血红蛋白进行粗分离,将血红蛋白溶液装入透析袋中,可以去除样品中相对分子质量较小的杂质。血红蛋白的纯化采用凝胶色谱法(如图乙),血红蛋白相对分子质量较大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路径较短,移动速度较快,可以收集到红色的蛋白质。【答案】(1)运输(2)磷酸缓冲溶液洗脱血红蛋白(3)透析(粗分离)去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱法相对分子质量的大小(4)红色的蛋白质接近色谱柱的出口15下列是与芳香油提取相关的问题,请回答:(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取,其理由是玫瑰精油具有_的性质。蒸馏时收集的蒸馏液_(填“是”或“不是”)纯的玫瑰精油,原因是_。(2)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和_。当原料量等其他条件一定时,提取量随蒸馏时间的变化趋势是_。(3)如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会_,原因是_。(4)密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度_的地方,目的是_。(5)某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如下图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为_d左右。(6)从薄荷叶中提取薄荷油时_(填“能”或“不能”)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是_。【解析】(1)根据玫瑰精油的化学性质确定提取的方法;蒸馏时,玫瑰精油会随水分一起蒸馏出来,因此蒸馏得到的是油水混合物。(2)影响玫瑰精油提取的因素很多,如蒸馏的时间、温度等。(3)蒸馏过程中如果不进行冷却,部分玫瑰精油会随水蒸气蒸发而流失,导致精油提取量下降。(4)由于玫瑰精油具有易挥发的特点,因此,如果瓶装的玫瑰精油密封不严,最好放在温度较低的环境中,以减少挥发。(5)分析题图可以看出,a d时花

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