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文档简介

1,第五章,血小板血型系统及检测技术,2,目的要求,掌握: 适合性血小板输注 熟悉: 血小板血型检测技术 血小板血型抗原分类及其临床意义,3,教学内容,血小板血型抗原及其抗体 血小板血型检测技术 血小板血型的临床意义 适合型血小板输注,4,第一节 血小板血型抗原,5,血小板血型抗原,定义: 指用同种免疫抗体检测出 的血小板表面抗原 分类:血小板相关抗原 血小板特异性抗原(由血小板特有的决定簇组成,表现出血小板独特的遗传多态性,在其他细胞和组织上不能发现。),6,一、血小板相关抗原,血小板表面存在的与其他细胞或组织共有的抗原 包括:红细胞的血型系统(ABO等) 人类白细胞抗原(HLA),7,(一)血小板上的红细胞血型抗原,存在ABO、Lewis、I、i和P抗原 缺失Rh、Duffy、Kell、Kidd系统的抗原,8,(二)血小板HLA系统血型抗原,Chromosome 6,DP,DQ,DR,B,C,A,Class II,Class I,存在HLA-A和B位点的抗原 HLA-C位点的抗原? 未发现HLA-DP、DQ和DR等位点抗原 经细胞因子刺激,可产生HLA-DR抗原,9,(二)血小板特异性抗原,即人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA) 血小板特有的,其他组织细胞没有 表现血小板独特的遗传多态性 均存在于血小板膜糖蛋白(GP)上,10,血小板特异性抗原,血小板特异性抗原是通过相应抗体的检出而发现的,具有独特的型特异性。被国际输血协会组织确认的血小板特异性抗原已有28个抗原(使用血清学方法检出的),正式命名的有23个。,11,HPA的命名,12,命名规定如下:,13,血小板抗原频率调查与日本人、白种人比较,14,人类血小板同种抗原频率,15,血小板糖蛋白的功能和血小板同种抗体,16,血 小 板,特异性抗原,相关抗原,17,同种抗体,抗原,自身抗体,血小板抗原与抗体,18,DUZOa抗原,19,二、血小板抗体,20,21,第二节血小板血型的临床意义*,22,23,一、血小板输注无效 (platelet transfusion refractoriness,PTR),24,1、PTR定义,25,2、PTR原因,26,同种异体免疫 血小板抗体17%-25% 反复输注血小板血小板同种抗体再次输注血小板血 小板抗原和抗体的免疫反应 血小板迅速破坏、计数不生反降 血小板输注治疗无效 HLA同种抗体 50%-80% HLA抗原性较强多次输血HLA抗体输注随机血小 板(血小板膜上存在的HLA-A、B抗原)抗体与输入的血小 板反应血小板减少血小板输注治疗无效,27,非免疫因素 患者有发热、败血症、脾肿大、弥散性血管 内凝血等情况时,也可以导致发生血小板输注后记 数不增高的无效状态。因此当出现输血反应时,应 及时判断是否存在非免疫性血小板消耗的原因,并 检测HLA和HPA抗体,28,二者区别 同种异体免疫 输入的血小板很快破坏,输注后1小时 和24小时均不见计数增高 非免疫因素 输注后1小时血小板计数增高,但24小时计数不增高或受影响,29,3、PTR的判定指标,临床:出血趋势不减轻,或出现输血性紫癜,出血加重。 血小板计数较输注前不仅不增高,有时还会下降。 校正血小板计数增加值( corrected count increment,CCI): CCI =(输注后血小板计数- 输注前血小板计数) 体表面积(m2) 输入血小板总数(1011L) PTR判定标准: 1小时CCI 7.5109L 20-24小时CCI 4.5 109L 输前立即计数、输后1小时及24小时计数,同时 要计数输入的血小板总量,30,血小板回收率( percentage platelet recovery ,PPR): PPR =(输注后血小板数输注前血小板数)血容量(L) 输入血小板总数2/3 PTR判定标准:1hPPR30% 20-24hPPR 20% 血小板回收率的影响因素有:发热、感染、DIC、出血、脾肿大等,而最重要的是患者体内是否存在血小板同种抗体。血小板抗原抗体的同种免疫是左右血小板输注效果的重要因素,31,4、PTR的预防措施,32,5、PTR的处理流程,33,PTR的病因及处理,34,PTR的处理,35,2019/4/20,36,可编辑,37,二、输血后紫癜 (posttransfusion purpura, PTP),定义:指输注全血或血小板后引起的急性、暂时性的同种免疫性血小板减少综合征 临床表现: 在输血后1周左右突然发生 瘀点、瘀斑和黏膜出血,严重者有内脏和颅内出血,发热反应,血小板计数下降 大多数的患者是女性,有输血或妊娠史 病因:特异性血小板同种抗体,形成血小板抗原 抗体复合物,破坏血小板,38,PTP预防和治疗措施,39,三、新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜 (neonatal alloimmune thrombocytopenic purpura,NAITP),定义:是由于胎儿和母亲的血小板血型不合,使母亲产生同种抗体,通过胎盘进入胎儿体内,与胎儿血小板反应而导致胎儿和新生儿的血小板减少。 常见,病死率较高,约13%,40,临床症状 内脏和中枢神经系统出血 脑水肿 出生时有严重而广泛的瘀点和瘀斑 出生时正常,2-3天后出现血小板显著减少 实验室检查 血小板抗原的鉴定 血小板抗体的检查 (诊断:母体血小板抗体检测,抗原检定 患儿血小板抗体(表面、游离)检测),41,NAITP治疗措施 主要是给患儿输入与母体血清中同种抗体无反应性的血小板 对患儿进行换血治疗,纠正患儿的血小板减少 新生儿一般静脉注射免疫球蛋白 预防 随时监测母亲血清中血小板抗体 效价高时可对母亲作血浆置换治疗,降低母亲血浆中抗体的含量,42,四、被动免疫血小板减少症 (Passive allo-immune thrombocytopenia, PAT),定义:由于患者输入了被免疫的供血者提供的含有血小板特异性同种异体抗体的血浆引起的血小板减少;输血后立即发病,大约维持1周。 处理:一旦发现献血员患有这种病症,应暂停献血。 主要发病的抗原:HPA-1a、HPA-5b,43,五、移植相关的同种免疫血小板减少症 (Transplantation-associated alloimmune thrombocytopenia, TAAT),发病机制:骨髓移植后,宿主淋巴细胞残余物的混合嵌合性使得从HPA-1a阳性移植物中得到的血小板与HPA-1a抗体发生免疫反应。 治疗:免疫球蛋白疗法和脾切除术能使血小板记数恢复正常 主要发病抗原:HPA-1a、HPA-5b,44,六、血小板的自身免疫作用 特发性血小板减少性紫癜 (idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP),定义:患者体内存在抗血小板自身抗体,使血小板大量破坏,是一种自身免疫疾病 临床表现:出血症状,45,发病机制 血小板自身抗体可与自身和同种血小板结合,破坏血小板 血小板自身抗体与巨核细胞结合,影响血小板的生成 血小板自身抗体的分布 血小板相关免疫球蛋白(PAIgG):与血小板上的相关抗原结合,PAIgG升高的水平与血小板减少的程度有关 游离抗体,46,在患者体内存在抗血小板自身抗体,使血小板大量被破坏,表现为出血症状,是免疫性外周血血小板破坏增加而引起的最常见的出血性疾病。 血小板自身抗体在体内的存在形式: 1、多数为IgG,极少数为IgM,吸附在血小板表面 2、游离在血清中,可也结合补体。,47,ITP的治疗,血小板输注不仅没有疗效,还有可能因血小板表面各类血小板抗原的同种免疫作用,导致输血后紫癜等输血反应 治疗方法 应用皮质激素等免疫抑制剂脾切除术作为 ITP 的主要治疗方法 大量血浆置换大剂量静脉注射免疫球蛋白等治疗,达到降低血 小板抗体效价、减缓血小板破坏、升高血小板计数和纠正出血症状的目的。 国内报道长春生物碱类药物偶联单采血小板,给难治型ITP患者输注,获得较好疗效,48,适合性血小板输注,49,影响血小板输注效果的因素,50,适合型血小板输血的措施,适合型:ABO、 HLA、HPA同型输注 适合型输注措施: 血小板抗体筛选 血小板交叉配合试验 HLA配合:血清学方法:淋巴细胞毒技术; PCR技术 HPA配合:血清学方法: (简易致敏RBC血小板血清学技术)SEPSA,凝胶微柱法等;PCR技术,51,国际上为了避免血小板输注无效、输血后紫癜的发生,有3点预防措施 1、同型输血:建立HLA、HPA已知型供血者档案 2、适合性血小板输血:做血小板抗体检查,输注交叉配型结果阴性的单采血小板 3、滤除白细胞或除去白细胞活性的血小板,52,血小板输血的适应症,血小板生成障碍引起的血小板减少 血小板减少的原因是血小板输血适应症的重要因 素。若血小板减少是由于血小板生成障碍性疾病,如 白血病、再生障碍性贫血、肿瘤、感染、药物或不明 原因的骨髓造血受抑制,血小板输血是有益的。,53,血小板功能障碍性疾病 血小板数虽正常,但有质的异常(即功能障 碍),如伴有严重出血及进行性手术或有损伤时, 即应输注血小板,54,预防性血小板输血 在大手术或严重创伤时,血小板少于5070x109/L 输血小板防止出血是有价值的。血小板少于20x109/L, 要作手术或有损伤时,必须输血小板;对免疫性血小 板减少性紫癜患者很少需要输血小板。,55,Thank you!,56,57,(六)混合被动血凝技术 (The mixed passive hemagglutination,MPHA),58,(七)混合细胞粘附试验(固相技术)(Mixed red cell adherence assay,solid phasetechnique),59,刘 涉及血小板输注无效和输血后紫癜的血小板特异性抗原: HPA-1a、 HPA-1b、 HPA-4a、 HPA-3a、 HPA-3b、 HPA-2b 等。 HPA-2b是黄种人中引起血小板输注无效发生的主要原因之一。,60,刘 血小板治疗无效和输血后紫癜的预防和治疗 为了预防和减少输注血小板治疗无效和输注 血小板后紫癜的发生,应积极提倡使用血小板交 叉配血试验,为患者选择合适的血小板供体,才 能达到有效的血小板治疗目的。对于输注血小板 治疗无效和输血后紫癜,最有效的治疗手段是血 浆置换疗法,使血小板抗体下降,同时输注“配 合”的浓缩血小板。,61,血小板输血,血小板输血近十余年来有了长足的发展,输血量显著增加,原因: 临床医师对血小板输血适应症,充分认识 化学疗法,免疫抑制疗法 成份制剂质量(分离法,浓缩法提高)的保证 血小板单采(血液成份分离机)术的普遍应用,62,血小板输血,一、血小板同种抗体的特异性 血小板特异性抗体的检出非常罕见。一般常与 HLA抗体共存 二、适合性血小板的选择 为了预防和减少输注血小板治疗无效和输血后紫 癜的发生,最好的对策是对患者进行血小板抗体筛选, 进而对含有血小板抗体的患者进行“适合性血小板输注”,63,国际上为了避免PTR、PTP的发生,有3点预防措施 1、同型输血:建立HLA、HPA已知型供血者档案 2、适合性血小板输血:做血小板抗体检查,输注交叉配型结果阴性的单采血小板 3、滤除白细胞或除去白细胞活性的血小板,64,移除大部分血浆的PLT-儿童、ABO不相容 洗涤PLT-有IgA抗体的患者 少(无)白细胞的PLT-预防HLA同种免疫反应 照射PLT-有严重免疫损害或抑制的病人,预防移植物抗宿主病GVHD 冰冻PLT-有同种免疫病人的自身血小板输血(二甲基亚砜和液氮-120C保存三年),特制血小板,65,血小板输血的适应症,血小板生成障碍引起的血小板减少 血小板减少的原因是血小板输血适应症的重要因 素。若血小板减少是由于血小板生成障碍性疾病,如 白血病、再生障碍性贫血、肿瘤、感染、药物或不明 原因的骨髓造血受抑制,血小板输血是有益的。,66,血小板功能障碍性疾病 血小板数虽正常,但有质的异常(即功能障 碍),如伴有严重出血及进行性手术或有损伤时, 即应输注血小板,67,预防性血小板输血 在大手术或严重创伤时,血小板少于5070x109/L 输血小板防止出血是有价值的。血小板少于20x109/L, 要作手术或有损伤时,必须输血小板;对免疫性血小 板减少性紫癜患者很少需要输血小板。,68,输注的血小板方法,选择有针对性的适应症,不要滥用 选择ABO、Rh及HLA血型相配合的血小板 最好输注单个供血者的血小板 输注前要了解受血者的血小板数或血小板功能、血容量及一般情况

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