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热点练十选修31(15分)我国拥有自主知识产权的抗虫棉,是将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因导入到棉花的叶肉细胞中培育而成的。请回答下列问题。(1)在该基因工程中,Bt毒蛋白基因属于_,离体棉花叶肉细胞属于_。Bt毒蛋白基因可从基因组文库中获取,也可从cDNA文库中获取,含有基因中启动子的文库是_文库。(2)获取的Bt毒蛋白基因需要与载体结合构建基因表达载体。在基因工程中使用的载体有质粒、噬菌体的衍生物、_等,其中质粒的化学成分是_。(3)科学家最初做抗虫棉实验时,虽已经检测出棉花植株中含有抗虫基因,但让棉铃虫食用棉花叶片时,棉铃虫并没有被杀死,这说明Bt毒蛋白基因_。为此,科学家对抗虫棉植株中的Bt毒蛋白基因进行了修饰,结果食用了棉叶的棉铃虫中毒死亡了,从变异类型分析,这种对Bt毒蛋白基因的修饰属于_。(4)转基因植物存在一定的安全性问题,为避免Bt毒蛋白基因通过花粉传播进入其他植物,一般将Bt毒蛋白基因转入棉花细胞的_(填“细胞核”或“叶绿体”)。2(15分)(2017河北衡水中学三模,38)油菜中的油酸为不饱和脂肪酸,能降低人体血液的胆固醇含量,减少人体患心血管病的风险。F基因控制合成的油酸酯氢酶催化油酸形成饱和脂肪酸,转反义F基因油菜能提高菜籽油的油酸含量。请分析回答下列问题。(1)从油菜细胞的染色体DNA获取F基因后进行大量扩增的方法为_。利用该方法扩增目的基因的前提是_。(2)构建反义F基因表达载体时,需要用到的工具酶有_;农杆菌可用来将反义F基因表达载体导入油菜细胞,从分子角度分析,其具有的特点是_。构建反义F基因表达载体时没有设计标记基因,其可能的原因是_。(3)Le启动子为种子特异性启动子,将F基因反向连接在Le启动子之后构建了反义F基因。检测转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量,结果表明,因杂交形成双链RNA,细胞内F基因的mRNA水平下降。由此推测,反义F基因的转录抑制了F基因的_(填“复制”“转录”或“翻译”)过程。若F基因转录时,两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链,则反义F基因转录时的模板链为_。3(15分)(2017辽宁沈阳铁路中学模拟,38)下图为某单克隆抗体制备过程示意图。请回答下列问题。(1)经过程和过程,细胞全能性的变化情况分别是_(填“变大”“变小”或“不变”)。(2)X细胞和Y细胞融合成Z细胞依据的原理是_。过程需要在_性培养基上培养。通过过程得到的抗体的主要优点是_。(3)在临床试验中,将抗癌细胞的单克隆抗体与_、化学药物或细胞毒素相结合制成“生物导弹”,注入体内,借助单克隆抗体的_作用将药物带到癌细胞所在位置并将其杀死。4(15分)(2017山西太原三模,38)Rag 2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag 2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图:请回答问题。(1)步骤中,在核移植前应去除卵母细胞的_。(2)ES细胞除来源于早期胚胎外,还可来源于_,它在形态上的特性是_;在功能上的特性是_。(3)步骤中,需要构建含有Rag 2基因的表达载体。可以根据Rag 2基因的_设计引物,利用PCR技术扩增Rag 2基因片段。用Hind和Pst限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag 2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体上,所选择的表达载体上应具有_的酶切位点。(4)为检测Rag 2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的_,用抗Rag 2蛋白的抗体进行杂交实验。【答案与解析】1(1)目的基因受体细胞基因组(2)动植物病毒DNA(3)没有成功表达基因突变(4)叶绿体【解析】(1)在该基因工程中,Bt毒蛋白基因属于目的基因,离体棉花叶肉细胞属于受体细胞。Bt毒蛋白基因可从基因组文库中获取,也可从cDNA文库中获取,含有基因中启动子的文库是基因组文库。(2)在基因工程中使用的载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等,其中质粒的化学本质是小型环状DNA。(3)科学家最初做抗虫棉实验时,虽已经检测出棉花植株中含有抗虫基因,但让棉铃虫食用棉花叶片时,棉铃虫并没有被杀死,这说明Bt毒蛋白基因没有成功表达。因为目的基因能否表达受到基因结构中非编码区上游的调控序列的控制,因此,要想解除非编码区上游对基因表达的抑制,必须对非编码区上游的调控序列进行修饰,所以从变异的角度分析,这种基因修饰属于基因突变。2(1)PCR技术有一段F基因的核苷酸序列(2)限制酶、DNA连接酶其Ti质粒上的TDNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上无标记基因表达产物,有利于食品安全(3)翻译a2【解析】(1)PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术,采用该技术能在短时间内获得大量目的基因,在扩增目的基因之前要利用一段F基因的核苷酸序列合成特定的引物。(2)构建基因表达载体时,首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子;因农杆菌的Ti质粒上的TDNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,故农杆菌转化法为常用的将目的基因导入植物细胞的方法;标记基因表达产物,可能会对食品安全构成威胁,所以构建反义F基因表达载体时没有设计标记基因,这样不会产生标记基因表达产物,有利于食品安全。(3)mRNA是翻译的模板,转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量下降,可见反义F基因的转录抑制了F基因的翻译过程。F基因转录形成的RNA能与反义F基因转录形成的RNA互补配对,若F基因转录时,两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链,则反义F基因转录时的模板链为a2。3(1)变大、变小(2)细胞膜的流动性选择特异性强、灵敏度高,并可以大量制备(3)放射性同位素导向【解析】(1)据图可知,相当于脱分化过程,获得的诱导干细胞的全能性较大,细胞分裂能力强,过程是定向诱导分化过程,形成特定的组织细胞,细胞全能性减小。(2)过程为细胞融合过程,依据的原理是细胞膜的流动性;X细胞和Y细胞融合后在培养基上会出现3种细胞,为获得杂交瘤细胞,应将过程获得的细胞放在选择培养基上进行培养;通过过程获得的单克隆抗体与普通抗体相比具有特异性强、灵敏度高,并可以大量制备的优点。(3)将单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成“生物导弹”,注入病人体内,可以在原位杀死癌细胞,该过程利用了单克隆抗体的特异识别癌细胞的作用(导向作用)。4(1)细胞核(2)原始性腺体积小、细胞核大、核仁明显具有发育的全能性,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞(3)核苷酸序列Hind和Pst限制酶(4)蛋白质【解析】(1)动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,因此在核移植之前应去除卵母细胞的细胞核。(2)ES细胞来源于早期胚胎或者原始性腺,它在形态上的特性是体积小、细胞核大、核仁明显;在功能上的特性是具有发育的全能性,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。(3)不同基因的核苷酸序列不同,而引物与核苷

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