畜牧兽医免疫学课件

1,动物免疫学基础,2,绪 论,一、什么是免疫（Immune)？ 免疫是机体识别自我物质和排除异己物质的复杂的生物学反应，是人和动物长期进化中所形成的一种生理功能。,3,二 、免疫的基本特性,1、识别自身与非自身 免疫功能正常的动物机体能识别自身与非自身的大分子物质，是机体产生免疫应答的基础 2、特异性 动物机体的免疫应答和免疫力具有高度的特异性 3、免疫记忆 免疫具有记忆功能,4,三、免疫的功能,1、免疫防御 正常时：病原微生物侵入时，机体即迅速动员全身防御力量，将该侵入者消灭、清除。 异常时：过强超敏反应 过弱免疫缺陷 2、自身稳定 正常时：维持体内细胞的均一性，不断清除衰老的和受损伤的细胞。 异常时：生理功能紊乱，出现自身免疫性疾病。,5,3、免疫监视 正常机体具有识别及清除体内经常出现的突变细胞的功能。这些突变细胞可以自发发生，也可以由病毒感染或理化因素诱变产生。 异常时，免疫监视功能失调，这些突变细胞就有可能无限地增生而形成肿瘤。,6,四、免疫学发展史,1、免疫学的初创期： 12世纪我国南宋发明人痘苗，17世纪我国普遍接种人痘苗，并传入邻国和欧洲； Jenner首创牛痘苗。 2、传统的免疫学时期： 1）人工主动和被动免疫疗法的建立； 2）细胞免疫和体液免疫学说的初步建立和统一； 3）免疫病理概念的提出； 4）经典血清学技术的建立；,7,3、近代免疫学时期： 1）细胞转移迟发性超敏反应的成功； 2）免疫耐受和自身免疫耐受学说的提出； 3）克隆选择学说的建立； 4）免疫球蛋白基本结构的阐明； 4、现代免疫学时期： 1）免疫系统的建立； 2）免疫应答的深入研究； 3）免疫球蛋白及其基因的研究进展； 4）白细胞分化抗原的研究； 5）细胞因子的研究； 6）免疫技术的发展；,8,第一章 免疫学基础理论,9,第一节 机体的免疫系统,免疫系统是在生物种系发生与发育过程中逐步进化而建立起来的，是指动物机体内参与对抗原的免疫应答，执行免疫功能的一系列器官、细胞和分子，包括： 免疫器官 免疫活性细胞,10,一、免疫器官(Immunological organs),1、中枢免疫器官 包括胸腺、法氏囊和骨髓，它们的共同特点是：在胚胎早期出现，为淋巴样上皮结构，对机体免疫反应具有控制作用，是诱导淋巴细胞分化增殖成为免疫活性细胞的器官。,11,位置： 胸腔前部纵隔并向颈部延伸。 功能： 能诱导骨髓的淋巴干细胞中的前T细胞，分化成熟为胸腺依赖淋巴细胞，简称T淋巴细胞或T细胞； T细胞随淋巴液和血流迁移到外周免疫器官，参与细胞免疫、辅助和调节体液免疫； 切除胸腺后，T淋巴细胞减少，细胞免疫功能下降或缺失。,1）胸腺,12,位置： 禽泄殖腔背侧。 功能： 诱导来自骨髓淋巴干细胞中的前B淋巴细胞，分化成熟为囊依赖性淋巴细胞，简称B淋巴细胞或B细胞； 切除或破坏，抗原刺激后则不能产生相应的抗体。,2) 法氏囊,13,位置： 骨髓腔内，尤其是长骨。 功能： 是造血器官和淋巴干细胞的发源地，也是人类和哺乳动物B细胞成熟的场所。,3) 骨髓,14,2、外周淋巴器官,脾脏中含有大量B细胞、T细胞和巨噬细胞，其中约3336为T淋巴细胞，50一60为B淋巴细胞，脾脏是抗体产生的主要部位。,1） 脾脏,15,淋巴结是过滤淋巴、进行免疫应答、清除微生物和其他异物的器官，分布有大量巨噬细胞、B细胞和T细胞，T细胞约占70%。 鸟类只有很少发育不良的淋巴节如盲肠扁桃体，它们产生抗体的主要器官是脾脏，但在强烈的抗原刺激下，其他器官也可能出现淋巴样细胞群和生发中心。,2）淋巴结,16,3）粘膜免疫系统 包括肠粘膜、Peyers淋巴集结、肠系膜淋巴结、阑尾等淋巴组织，共同组成一个粘膜免疫应答网络，故称为粘膜免疫系统。,4）禽哈德腺 位于眼窝中腹部，眼球后中央，是对抗原进行免疫应答的部位。,17,18,二、免疫活性细胞 （Immuno-competent cell）,免疫活性细胞又称免疫敏感细胞，是指受到抗原刺激后，能特异地识别抗原结合表位并发生免疫反应的一类细胞，它包括： T淋巴细胞(简称T细胞)，参与细胞免疫反应； B淋巴细胞(简称B细胞)，参与体液免疫反应； K细胞，NK细胞和树状突细胞等也参与免疫应答反应。,19,1、T细胞 经抗原刺激后可分化成为淋巴母细胞，除少数成为记忆细胞外，多数继续分化增殖成为具有免疫效应作用的致敏淋巴细胞(Sensitized Lymphocytes)，参与细胞免疫反应。 2、B细胞 受到抗原刺激后分化成为浆母细胞。除少数成为记忆细胞外，多数进一步分化增殖成为浆细胞(Plasma Cells)，合成抗体球蛋白，参与体液免疫反应。,20,3、巨噬细胞和树突状细胞 巨噬细胞和树突状细胞具有多种免疫功能，除了非特异性免疫功能之外，在特异性免疫的形成上也起着重要的作用。,21,第二节 抗原和抗体,一、抗原： 一类能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并与之进行特异性结合的物质，称之为抗原（Antigen）。,22,1、免疫原性 能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞，或诱导机体形成免疫应答的特性。 2、反应原性 能与其所诱导而产生的抗体或致敏淋巴细胞发生反应，或激发机体发生免疫应答反应，此一性质称反应原性。,（一）抗原具有两种属性：,23,1、异物性 在正常情况下，机体能识别自体物质和异体物质。只有异体物质进入体内才有可能具免疫原性。抗原一般为异种或同种异体物质。 2、一定的物理性状 抗原应是大分子量(一万以上)的高分子物质(高分子胶体)，有一定的化学组成和结构。 3、抗原结合表位（antigen epitope） 抗原分子的活性和特异性，通常决定于暴露在分子表面的几个活性基团，此种决定抗原活性的基团称为抗原结合表位或抗原决定簇。,（二）抗原的普遍性质,24,抗原种类名称繁杂，可以根据抗原来源不同，根据性能，也可根据微生物抗原结构、动物遗传性等来分。 1、完全抗原与不完全抗原 2、蛋白质抗原与多糖、类脂抗原 3、天然抗原和人工抗原 4、细菌抗原和病毒抗原,(三)抗原的种类,25,二、抗 体,（一）抗体、免疫球蛋白的区别 1、抗体是在抗原物刺激机体的B细胞，由B细胞转化成浆细胞所产生的一类能与相应抗原发生特异结合的免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig）。主要存在于血液的血清中。 2、具有抗体活性以及化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。 3、含有抗体的血清称为抗血清或免疫血清。 4、所有抗体都是免疫球蛋白，而免疫球蛋白并不都是抗体，免疫球蛋白除抗体外，尚包括一些其他球蛋白如骨髓瘤或巨球蛋白血症病人体内出现的异常免疫球蛋白。 5、抗体是生物学及功能的概念，而免疫球蛋白是结构和化学的概念。,26,（二）抗体的分子结构和功能 1、免疫球蛋白的分子结构基本上都是相似的，都是由四条多肽链所组成，其中两条相同的短链称为轻链(L链)，两条相同的长链称为重链(H链)，两条重链借二硫键连接起来，呈Y字形，两条轻链又通过二硫键连接在Y字的两侧； 2、在多肽链的羧基(C)端，氨基酸排列顺序比较稳定，称为不变区或稳定区(C区)；而在氨基(N)端，氨基酸排列顺序可因抗体的种类不同而有所变化，这部分称为可变区(V区)。抗体多样性与特异性均由可变区反映出来；,27,3、Ig的H链结构不同，分别以小写希腊字母、代表二条H链，因此抗体又可分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五种不同的Ig； 4、所有的Ig的L链结构均相同，根据其氨基酸序列和抗原性不同，可分为链和链。,28,1、IgG是哺乳动物最主要的血清免疫球蛋白，约占免疫球蛋白总量的7075，占血清总蛋白的18，IgG有抗菌和抗病毒作用，能中和毒素使其失去活性，在体液免疫中效果最为显著。 2、IgM为5个球蛋白单体分子聚合而成的大分子球蛋白，抗原刺激后，血清中最早出现的免疫球蛋白。 3、IgA约占免疫球蛋白总量的1722，占血清总蛋白的5.5，有抗菌和抗病毒作用 ，是粘膜的重要体液防御因素。,（三）三种重要免疫球蛋白的基本特性：,29,（四）抗体在体内的形成规律,1、自然感染或人工接种抗原后，出现最早的是IgM，但它消失也快，在血液中只能维持数周或数月。 2、IgG出现稍迟，但维持时间长，可达数年以上。在血清中IgG含量最高，在体液免疫中起着重要作用。,30,3、IgA能在粘膜表面发挥其抗菌或抗病毒作用，对由呼吸道或消化道侵入的病原微生物，此种局部的分泌抗体起着重要的防御作用。 4、在这些免疫球蛋白中，只有IgG能通过人的胎盘传给胎儿，IgA则通过初乳传递给新生儿或幼畜。幼畜不易患传染病的原因，就是因为从母体获得此类抗体所致。马、牛、羊、猪的胎盘不能通过IgG，只能从初乳中获得母体抗体，故不吃初乳的幼畜成活率低。禽类则自卵黄中获得抗体。在给幼畜、幼禽免疫时，母体抗体亦常影响活疫苗的免疫效果，应予注意。,31,(五) 抗体的分类,1、抗体除按化学结构分成IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五种类型。 2、根据产生情况区分可分为免疫抗体和天然抗体。 如动物的血型抗体、异嗜性抗体等均是天然抗体。 3、根据抗体与抗原结合后是否出现可见反应，可将抗体分为完全抗体与不完全抗体。大多数抗体都属完全抗体，它与相应抗原结合后，在电解质存在下，可出现肉眼可见的凝集或沉淀现象。不完全抗体虽然可与相应抗原结合，但看不出有此可见现象。,32,4、根据作用对象区分：有抗菌抗体、抗病毒抗体、抗毒素、溶血素和抗蛋白质抗体中的抗抗体等。抗菌抗体又有H抗体、O抗体等；抗病毒抗体则又根据反应性质区分为中和抗体、血凝抑制抗体、补体结合抗体等。 5、根据抗体由来区分：可分异种抗体、同种抗体和自体抗体。,33,三、补体系统,补体：是存在于人和脊椎动物血清与组织液中一组经活化后具有酶活性的不耐热的大分子，是一族参予免疫效应的球蛋白。,什么是补体？,34,一、补体分子的组分和命名,进入20世纪60年代后，由于蛋白质化学和免疫化学技术的进步，自血液中分离、纯化补体成分成功。 并证明了补体不是单一的成分 它是由三组球蛋白大分子组成。即 ：,35,第一组分,是由9种补体成分组成， 分别命名为C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9。 其中C1是由三个亚单位组成， 命名为Clq、Clr、Cls， 因此第一组分是由11种球蛋白大分子组成。,36,第二组分,在20世纪70年代又发现一些新的血清因子参予补体活化 但它们不是经过抗原抗体复合物的活化途径，而是通过旁路活化途径。 这此些因子包括： B因子 D因子 P因子,37,第三组分,其后又发现多种参与控制补体活化的抑制因子或灭活因子，如： CI抑制物、I因子、H因子、 C4结合蛋白、过敏毒素灭活因子等。 这些因子可控制补体分子的活化，对维持补体在体内的平衡起调节作用。,38,1、产生,二、补体分子的产生和理化性质,分别由肝细胞、巨噬细胞以及肠粘膜上皮细胞等多种细胞产生。,39,2、理化性质 对理化因素敏感，性质不稳定 如：61 2min或56 30min 均可将其灭能。 全部补体分子的化学组成均为多糖蛋白， 大多是球蛋白，少数几种属a或球蛋白， 各补体成分的分子量变动范围很大， 在25390KD之间。,二、补体分子的产生和理化性质,40,2、理化性质 补体成分在血清中的含量相对稳定 以C3为最高，达1300g/ml， 其次为C4、S蛋白和H因子，各约为C3含量的1/3； 其他成分的含量仅为C3的1/10或更低。 但不同动物的含量不一致 能与抗原抗体复合物结合并被激活 代谢率高,二、补体分子的产生和理化性质,41,三、补体系统的激活,生理情况下，大多数补体系统成分以酶前体形式存在，当其被激活物质活化之后，才表现出各种生物学活性。 补体的激活过程是一系列扩大的连锁反应：,经典途径 由抗原抗体复合物从结合C1q启动激活的途径,旁路途径 由细胞脂多糖、凝聚的IgG、IgA等越过C1、C2、C4，而从C3开始激活的途径,42,两条激活途径的比较,43,两条途径的不同之处,44,补体系统是人和某些动物种属，在长期的种系进化过程中获得的非特异性免疫因素之一，它也在特异性免疫中发挥效应，它的作用是多方面的。 补体系统的生物学活性，大多是由补体系统激活时产生的各种活性物质（主要是裂解产物）发挥的。,四、补体的生物学作用,45,补体系统的功能可分为两大方面： 补体在细胞表面激活并形成MAC，介导溶细胞效应； 补体激活过程中产生不同的蛋白水解片段，从而介导各种生物学效应。如： 调理作用 引起炎症反应 清除免疫复合物 免疫调节作用 等,46,1、细胞毒及溶菌、杀菌作用 2、调理作用 3、免疫粘附作用 4、中和及溶解病毒作用 5、炎症介质作用,补体系统的功能,47,补体成分及其裂解产物的生物活,48,第三节 机体的免疫,一、免疫类型,非特异性免疫或先天性免疫,特异性免疫或获得性免疫,生理屏障作用 体液因素 吞噬作用 炎症反应 机体组织的不感受性,天然自动免疫 天然被动免疫 人工自动免疫 人工被动免疫,49,50,人工主动免疫 指用人工接种的方法给机体输入疫苗或类毒素等抗原性生物制品，使其刺激机体自动地产生保护性抗体，以抵御病原体的侵袭。 例如： 给人体接种乙肝疫苗就是为了刺激人体产生乙肝病毒抗体，从而抵御乙肝病毒的侵袭。,51,1、疫苗（Vaccine） 由病原微生物、寄生虫及其组分或代谢产物制成，接种动物后能产生主动免疫、预防疾病的一类生物制剂 包含：细菌性菌苗、病毒性疫苗和寄生虫性虫苗 2、类毒素（Toxiod） 又称脱毒毒素。 毒素经化学药品（如甲醛）处理后，成为无毒性而保留免疫原性的生物制剂,52,免疫接种失败原因分析,53,人工被动免疫免疫血清,将保护性抗体（如含抗体的血清或抗毒素）注入机体，使机体迅速获得特异性免疫力。 由于这样的抗体不是其本身自动产生的，而是被动得到的，故称为“被动免疫”。 如注射破伤风抗毒素、丙种球蛋白等都属于人工被动免疫。,54,表：自动免疫和被动免疫的区别,55,二、特异性抗感染机制,1、体液免疫的抗感染作用 1）对吸附作用的抑制； 2）溶菌作用； 3）对毒素的中和作用； 4）调理素作用。 2、细胞免疫的抗感染作用 在原生动物、真菌、细胞内寄生细菌(如破伤风芽胞杆菌、结核杆菌)、某些病毒以及肿瘤的免疫中起着重要作用。,56,第四节 机体免疫应答,一、免疫应答的形成过程 机体在抗原物质的刺激下，免疫应答的形成过程一般可分为三个阶段： 1、致敏阶段 2、反应阶段 3、效应阶段,57,二、体液免疫(Humoral immunity),抗原进入机体，作用于体内B细胞，诱导B细胞增殖、分化成浆细胞，产生特异性抗体（Antibody），抗体存在于血清和体液之中以清除抗原，这一过程称为体液免疫。,58,（一）抗体形成的一般规律 ：,1、初次反应 抗原初次进入机体后，须经一段潜伏期才能产生抗体。潜伏期的长短与抗原的性质有关，如菌苗需5-7天，类毒素需要23周。初次反应产生的抗体量不高，持续时间也较短。 2、再次反应 一定时间后再次注射同样抗原，抗体量(IgG型)迅速大量增加，可达初次反应水平的10100倍，在体内维持的时间也较长。 3、回忆反应 初次反应所产生的抗体在体内完全消失后，若再注入抗原，可使已消失的抗体突然快速上升，称为回忆反应。,59,60,(二) 影响抗体产生的因素,1、抗原方面： 1)抗原的性质 2)抗原的用量 3)佐剂(Adjuvant) 4)注射的途径 5)注射的次数和间隔时间 2、机体方面： 1)年龄因素 2)其他因素,61,（三）体液免疫的作用,1、抗菌、抗外毒素和抗病毒等多种的免疫功能 2、通过激活补体系统引起免疫溶解作用 3、增强吞噬细胞吞噬和杀灭病原体的能力 4、中和外毒素或病毒等等，以抵抗和清除相应的病原微生物或其毒素的有害作用。,62,三、细胞免疫(Cellular Immunity),细胞免疫亦称细胞介导免疫(CellMediate Immunity)，是指抗原进入机体， 刺激T细胞，产生淋巴因子和细胞毒性T细胞以清除抗原的过程。,63,（一）细胞免疫的作用,1、抗感染作用 1）抗细菌感染 2）抗真菌感染 3）抗病毒感染 2、对于组织移植的作用 3、抗肿瘤作用,64,（二）免疫效应因子细胞因子,淋巴因子不是抗体，而是致敏淋巴细胞受到相应抗原的刺激而产生和释放的具有免疫活性物质，它们的产量虽然很少，但无论在体内或体外都具有重要的生物学作用。 如：白细胞介素、集落刺激因子、干扰素等。,65,四、机体免疫反应的调节,机体的免疫反应是整体性的，一般认为它依靠神经系统的兴奋与抑制作用进行调节，通过下丘脑、脑垂体、肾上腺皮质系统来维持相对的稳定。,66,当抗原(外来的或自身的)作用于机体时， 一方面由于抗原的非特异性刺激，借助神经体液的途径，使下丘脑致脑下垂体处于活跃的状态， 另一方面由于抗原的特异性刺激，抗原物质被巨噬细胞吞噬和处理，将抗原信息传递给免疫活性细胞T淋巴细胞和B淋巴细胞，使它们分化增殖成为致敏淋巴细胞和浆细胞，产生特异性细胞免疫和体液免疫。 致敏淋巴细胞释放出的活性物质(淋巴因子)和浆细胞产生的抗体又对下丘脑和脑下垂体起反馈作用。,67,第五节 超敏反应（Hypersensitivity）,一、超敏反应的基本概念 在正常情况下，机体对抗原的免疫反应，起着消灭体内抗原异物，保护机体健康的作用。但在某些情况下，被抗原致敏的机体，再次接触同样抗原时，产生损伤机体组织和扰乱机体功能的免疫反应，这一过程称为超敏反应，也称为变态反应。,68,二、各类超敏反应的类型与特点,型超敏反应 又称过敏反应、速发型变态反应 型超敏反应 II型超敏反应又称细胞毒型超敏反应 型超敏反应 也称免疫复合物型超敏反应 型超敏反应 又称迟发型超敏反应,69,型超敏反应： 机体第一次接触异种血清、青霉素等过敏原后，产生IgE，吸附在肥大细胞或嗜碱性粒细胞上，集体处于致敏状态。相同过敏原再次进入致敏机体，与IgE作用，至使上述细胞释放大量组织胺等活性物质，引起毛细血管扩张，腺体分泌增加和平滑肌强烈收缩，表现为荨麻疹、风疹、甚至过敏性休克。,70,型超敏反应： 抗体（IgG和IgM）与相应细胞上的抗原特异结合，在补体系统或单核巨噬细胞参与下，引起细胞的溶解称之为II型超敏反应。 如初生幼畜溶血反应、输血反应、磺胺类药物引起的溶血等。,71,型超敏反应 抗原抗体在机体内形成较小的免疫复合物，不易从血液中及时清除，可能进入血管壁内沉积于基底膜，在补体系统和巨噬细胞参与下，损伤周围组织，引起血管炎、肾小球炎或关节炎等，也称免疫复合物型超敏反应。 如血清病。,72,型超敏反应： 机体第一次接触抗原后产生的致敏淋巴细胞，再次接触同样抗原时，释放多种淋巴因子，吸引淋巴细胞和大单核细胞聚集于抗原存在部位，引起炎症反应。临床上常见的有传染性变态反应，奶牛结核病，异体器官移植等。,73,第六节 单克隆抗体的研制及其应用,单克隆抗体(Monoclonal Antibody，McAb)是近二十多年来发展起来的一项免疫技术。它的出现为生物学科的研究工作提供了有力武器，也为医学研究提出了新的希望，并在生物制品开发利用方面掀起了一场令人振奋的技术大革命。,74,两个概念：,多克隆抗体（Polyclonal antibodies）：人体或动物体受抗原刺激后产生的由多种抗体组成的混合物，即多克隆抗体，简称多抗。 单克隆抗体（McAb）：抗原刺激后，每个B淋巴细胞系只能产生一种它专有的、针对一种它能识别的特异性抗原结合表位的抗体，这种从一株单细胞系(单克隆)产生的抗体称它为单克隆抗体或单抗。,75,单克隆抗体的特点：,单克隆抗体是一种高纯度、均一的抗体物质； 单克隆抗体可在体外通过杂交瘤细胞大量地生产； 单克隆抗体具有高度专一的特异性，可以与抗原分子上单个结合表位起结合反应，可用来进行血清学反应试验； 单克隆抗体特异性强，敏感性高。,76,第二章 免疫学实验技术,77,第一节 抗原抗体反应,抗原和相应的抗体能发生特异性结合，在一定的条件下，可以出现各种肉眼可见的反应。由于抗体主要存在于血清中，在体外进行抗原与抗体结合反应时，一般采用血清进行试验，故此类反应又称血清学反应。,78,抗原抗体反应,79,一、 抗原抗体反应的一般规律,1、特异性和类属性 抗原与抗体的结合有高度特异性。 2、最适比例和带现象 当抗原抗体比例最适合时，反应物的量最多，反应最明显、出现最快。 抗原过剩或抗体过剩，造成聚合作用被阻滞，不出现肉眼可见的反应，谓之带现象。 3、反应的多样性 4、反应的敏感性,80,二、 影响抗原抗体反应的因素,1、电解质 最常用的电解质是NaCl，最适当的浓度为0.15mol/L，即生理盐水。 2、PH 大多数抗原抗体反应的最适氢离子浓度为pH6-8。 3、温度 反应的最适温度通常为37C。 4、振荡 机械振荡能增加了分子或颗粒间的互相碰撞，加速抗原抗体反应，但强烈的振荡则可使抗原抗体的结合物离解。 5、杂质,81,第二节 凝聚性反应,凝集反应 沉淀反应,82,一、凝集反应,分类： 根据试验方法 平板凝集 试管凝集 根据反应的性质 直接凝集 间接凝集 凝集抑制试验,颗粒性抗原的悬液与相应抗体混合，在电解质(0.85生理盐水)参与下，形成肉眼可见的凝集物(即抗原抗体复合物)，这种现象叫凝集反应。,反应中的抗原叫做凝集原，抗体叫做凝集素。,83,1、直接凝集反应,用抗原与相应抗体直接结合所发生的凝集现象。 玻片法 试管凝集法,84,2、间接凝集反应,将已知抗原(小分子胶体状态抗原如病毒等)吸附在一种载体(如红血细胞、白陶土、聚苯乙烯乳胶等)颗粒表面，然后与相应被检抗体混合。若血清中有相应抗体存在，便发生凝集现象，称为间接凝集反应。 如猪的伪狂犬病诊断。,85,3、反向间接血凝,以提纯的抗体致敏血球，然后与相应抗原反应，产生的一种凝集现象称之为反向间接血凝，常用来检测抗原物质的存在。 如检测口蹄疫病毒。,86,二、沉淀反应,可溶性抗原和相应的抗体混合后，在电解质参与下，经过一定时间后混合液发生白色絮状沉淀的现象，称为沉淀反应。,参加反应的抗原叫做沉淀原，抗体叫做沉淀素。,一般可分为两种：,固相沉淀反应在琼脂凝胶上进行,液相沉淀反应在液体中进行,常用的为琼脂扩散反应，当它与电泳技术结合，又发展为免疫电泳、对流电泳、火箭电泳等技术。,87,88,1、液相沉淀反应,抗原抗体均为透明液体，二者均需十分澄清，抗原抗体结合后即出现白色沉淀。 1)环状沉淀反应(重叠法) 2)絮状沉淀反应(最适比例法) 抗原抗体在试管内混合，比例最合适者，出现沉淀最快，沉淀物最多。抗原或抗体过剩均能抑制沉淀反应的出现。,89,2、固相沉淀试验,琼脂凝胶含水量极大(达99以上)，能允许分子量在20万以下的物质自由通过。绝大多数抗原抗体的分子量在20万以下，能在琼脂凝胶中自由扩散。二者在琼脂凝胶中相遇，在最适比例处发生沉淀，此沉淀物因颗粒较大而不能扩散，形成沉淀带，称为琼脂免疫扩散或琼脂扩散。,免疫电泳,琼脂扩散试验,对流电泳 火箭免疫电泳 琼脂扩散的抑制试验,90,91,第三节 补体结合反应,补体能和任何一组抗原抗体复合物结合而引起反应，结合后不再游离，但不能与游离的抗原或抗体结合，且肉眼不可见。 如果与红细胞-红细胞抗体复合物结合，