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豆类作物种子粗蛋白质测定法 GB2905 82谷类豆类作物种子粗蛋白质测定法 豆类 作物 种子 蛋白质 测定法

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内容简介：

中华人民共和国国家标准谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法 ( 半微量凯氏法)UDC 6 3 3 . 1 / . 8 : 5 4 3. 8 5. 0 6GB 2 9 0 5一 8 2Me t h o d f o r i nd e t e r m i n a t i o n o f c r u d e p r o t e i nc e r e a l s a n d b e a n s s e e d s( S e m i 一mi c r o k j e l d a h l m e t h o d)1 适用范围 本标准适用于测定谷类、豆类作物种子粗蛋白质含量。2 仪器、设备2 . 12 . 22 . 32 . 42 . 52 . 62 . 7分析天平: 感量。 . 0 0 0 1 克。实验室用粉碎机。半微量 凯氏 蒸馏装置 ( 推荐使用龙科半微量滴定管: 容积1 0 毫升。硬质凯氏烧瓶:容积2 5 毫升，5 0 毫升锥形瓶:容积1 5 0 毫升。电炉:6 0 0 瓦。一A型半微量蒸馏装置)。3 试剂 3 . 1 盐酸 ( G B 6 2 2 -7 7 )或硫酸 ( G B 6 2 5 -7 7 ) 。 分析纯。0 . 0 2 N、 0 . 0 5 N标准溶液 ( 邻苯二甲酸氢钾法标定) 3 . 2 氢氧化钠 ( G B 6 2 9 -7 7 ):工业用或化学纯。 4 0 溶液( W/ V ) 3 . 3 硼酸一 指示剂混合液。 3 . 3 . 1 硼酸 ( G B 6 2 8 -7 8 ):分析纯。2 %溶液 ( W/ V ) 3 . 3 . 2 混合指示剂: 嗅甲 酚绿 ( H G 3 -1 2 2 0 -7 9 ) 0 . 5 克，甲基红 ( H G 3 -9 5 8 -7 6 ) 0 . 1 克， 分别溶于9 5 写乙醇中，混合后稀释至1 0 0 毫升。将混合指示剂与2 % 硼酸溶液按 1: 1 0 0 比例混合，用稀酸或碱调 节p H 值为 4 . 5 ，使呈 灰紫色。即为 硼酸一指示剂 混合 液。 注:此溶液放置时间不宜过长，斋在一个月之内使用。 3 . 4 加速剂:五水合硫酸铜 ( G B 6 6 5 -7 8 )分析纯，1 0 克， 硫酸钾 ( HG 3 -9 2 0 -7 6 ) 分析纯，1 0 0 克，在研钵中研磨，仔细混匀，过4 0 目筛。 3 . 5 浓硫酸 ( G B 6 2 5 -7 7 )比重1 . 8 4 ，无氮。 3 . 6 3 0 % 过氧化氢 ( H G 3 -1 0 8 2 -7 7 ):分析纯。 3 . 7 3 0 % 过氧化氢一 硫酸混合液 ( 简称混液):3 0 % 过氧化氢、硫酸、水的比例为3 ， 2 ， 1 ， 即在1 0 0 毫升蒸馏水中 慢慢加人2 0 0 毫升浓硫酸，待冷却后，将其加人3 0 0 毫升3 0 过氧化氢，混匀。 注: 此混液可一次配制5 0 0 -1 0 0 0 毫升 贮藏于试剂瓶中备用。夏天最好放人冰箱或荫 凉处 贮藏，室温 ( 2 0 C ) 上、 下时不必冷藏，贮藏时间不超过一个月。 3 . 8 蔗糖 ( HG 3 -1 0 0 1 -7 6 ):分析纯。国家标准总局1 9 8 2 一 ,02 一 2 1 发布1 9 8 3一5 1 1 一0 1 实施免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t )免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 2 9 0 5 -8 24 试样的选取和制备4 . 1用 一 选取有代表性的种子 ( 带壳种子 需脱壳) 挑拣干 净， 按四分法缩减取样， 取样量不得少于 2 0 克。将种 I 放1 6 0 - - 6 5 C烘箱中于 燥8 小时以上 ，用粉碎机磨碎， 9 5 %通过4 0 目筛， 装人磨口瓶备5 测定步骤 5 . 1 称样称取0 . 1 克试 样两份( 含氮1 一7 毫克) ，准确至。 . 0 0 0 1 克，同时测定试样的水分含 量。 5 . 2 消煮: 5 . 2 . 1 将试样置于2 5 毫升凯氏瓶中， 加人加速剂粉末。 除水稻为1 克外，其他均为2 克。然后加3毫升浓硫酸，轻轻摇动凯氏瓶，使试样被硫酸湿润，将凯氏瓶倾斜置于电 炉上加热，开始小火，待泡沫停止后加大火力， 保持凯氏 瓶， f ， 的液体连续沸腾， 沸酸在瓶颈中部冷凝回流。待溶液消煮到尤微小的碳粒并呈 透明的蓝绿色时， 谷类继续消煮3 0 分钟，豆类继续消煮6 0 分钟。 5 . 2 . 2 将试样置于 5 0 毫升凯氏瓶中，加人0 . 5 克加速剂和3 毫升混液， 在凯氏瓶上放一曲颈小漏斗 、倾斜置于电炉七 加热， 开始小火( 用调压器将电压控制在1 7 5 伏左右) ，保持凯氏瓶中液体呈微沸状态。5 分 钟后加大火力( 将电 压控制在2 0 0 伏左右) ， 保持凯氏 瓶中 的 液体连续沸腾。 消煮总时间， 水稻、 高粱为3 0 分钟， 其他均为4 5 分钟。 注: 采用5 . 2 . I 或5 . 2 . 2 消煮，其准确度与精密度一致，可任取一种。 5 . 3 蒸馏、 消煮液稍冷后加少量蒸馏水， 轻振摇匀。移人半微量蒸馏装置的反应室中，用适量蒸馏水冲洗凯氏 瓶4 一5 次。蒸馏时将冷凝管末端插到盛有1 0 毫升硼酸一 指示剂混合液的锥形瓶 、 ，向反应室中加人4 0 氢氧化钠溶液1 5 毫升* *，然后通蒸气蒸馏，当 馏出液体积约达5 0 毫升时，降下 锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1 一2 分 钟，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶 1 ， 。 5 . 4 滴定谷类以。 . 0 2 N,豆类以0 . 0 5 N盐酸或硫酸标准溶液滴定至锥形瓶内的溶液由蓝绿色变成灰紫色为终点。 5 . 5 空白 用0 . 1 克蔗糖代替样品作空白测定。消耗酸标准溶液的体积不得超过0 . 3 毫升。s 测定结果的计算6 。 1 计算公式粗蛋白质，% ( 干基)( w , 一v , )x Nx0 . 0 1 4 0 x Kx1 0 0W x ( 1 0 0 一X)x 1 0 0式中:v 2 -滴定试样时消耗酸标准溶液的体积 ( 毫升); 巧 -滴定空白时消耗酸标准溶液的体积 ( 毫升); N 酸标准溶液的当量浓度，Ns K氮换算成粗蛋白质的系数， W试样重量 ( 克) ， X-试样水分含量; 0 . 0 1 4 00 . 0 1 4 0 每毫克当 量氮的克 数。: 一:平行测定的结果用算术平均值表示，保留 小数后二位。测定两类作物种子 粗蛋白 质的平行测定结果为1 5 %以下时， 其相对 相差不得大于3 %t 1 5 % - 3 0 %时为2 %;3 0 %以上时为1 %o6 . 4 结果报告中必须注明氮换算成粗蛋白质的系数。换算系数见下表。应加热有硫酸部位的瓶底.不使瓶壁的温度过高，以免按盐受热分解造成氮的损失。采用消煮条件5 . 2 . 2 时加1 0 毫升即可。免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t )免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 2 9 0 5 - 8 2不同作物种 t 含氮量换算成粗蛋白质之系数币 P了换算系数K麦类、U类水稻高粱人皿其他吞类5 . 7 05 . 9 55 . 8 36 . 2 56. 2 51 7 9免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t )免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 2 9 0 5 - 8 2 附录A参考资料 ( 参考件)A . 1 化学L生物，Vo l 4，No t , 1 9 6 6 年。A. 2 J . o f A OA C, Vo l 5 9 , No 6 ， 1 9 7 6 年。A. 3 I n t e r n a t i o n a l A s s o c i t i o n f o r C e r e a l C h e m i s t r y ( I CC) S t a n d a r d Nr . 1 0 5 oA . 4 I n t e r n a t i o n a l St a n d a r d I SO 1 8 7 1 0A . 5 A A C C Me t h o d 4 6 一1 0 .A. 6 F e r t i l i z e r