二十九章人乳头瘤病毒.ppt

第二十九章 人乳头瘤病毒 (Human Papillomavirus, HPV),是乳多空病毒科（Papovaviridae）、乳头瘤病毒属的一个种。 引起人皮肤、粘膜的增生性病变，临床表现为良性疣或乳头状瘤。 HPV也是尖锐湿疣（condyloma acminatum，CA）的病原体。 某些型别的HPV可使组织发生癌变，引起子宫颈癌等。,球形，直径52-55 nm，20面体对称，无包膜，环状dsDNA，3个基因区组成 早期区 含有6 个ORF E1、E2基因:与病毒复制转录调控有关 E5、E6、E7基因:诱导细胞转化， 晚期区 编码结构蛋白L1和L2 是衣壳的主要蛋白和次要蛋白。 上游调控区 复制起点和调控元件,一）生物学性状,HPV增殖方式独特，与上皮细胞的分化阶段相关，因此不能在常规组织细胞中培养。 成熟病毒仅在角质细胞中产生，抗原接触免疫系统的机会少，免疫原性低，易形成持续感染。,一）生物学性状,HPV具有高度的宿主和组织特异性，对人的皮肤和粘膜上皮细胞具有特殊的亲嗜性，在易感细胞核内增殖形成核内嗜酸性包涵体，使感染细胞转变为空泡细胞。 HPV不能在实验动物中增殖，组织培养也未成功。,一）生物学性状,培养特性,二）致病性与免疫性,扁平疣：常由HPV 3和10型引起。 6、11、16、18、31和33等型别为粘膜嗜性HPV，感染泌尿生殖道及口腔。 生殖器疣又称尖锐湿疣（condylemata acuminata）：性传播疾病（STD），主要由HPV-6感染所致，也可由HPV-11引起。,77个血清型，根据感染部位不同可将HPV分为嗜皮肤性和嗜粘膜性两大类，两类之间有一定交叉。,二）致病性与免疫性,某些型别HPV与一些肛门、生殖器肿瘤发生密切相关。根据HPV的致癌潜力将其分为： 高危型：主要包括HPV 16、18、31、33、45、35、39、51、52和58等型别，其中16、18、33型与子宫颈癌发生密切相关； 低危型：主要包括HPV6和11型。,二）致病性与免疫性,三）微生物学检查,（一）醋酸白试验 （二）细胞学检查 （三）组织病理学检查 （四）核酸分子杂交技术 1. 斑点杂交法 2.原位杂交法 3. DNA印迹法 （五）聚合酶链反应（PCR）,防治：加强教育、严格社会管理 治疗: 1. 局部敷药，如5% 5-咪奎莫特，5% 5-氟尿嘧啶；25%竹叶脂液。 2. 用激光、冷冻、电灼或者手术去除疣； 3. 局部注射干扰素。 4. 复发应连续或者综合治疗。,四）防治原则,第三十一章 狂犬病毒 （Rabies virus）,狂犬病是人畜共患的自然疫原性传染病，目前尚无有效的治疗方法，一旦发病，死亡率近乎100%。 狂犬病病毒是一种嗜神经性病毒。属于弹状病毒科 (Rhabdoviridae)、狂犬病毒属 (Lyssavirus)。 多种野生动物和家畜等可以发生狂犬病病毒的自然感染与传播，并且可以通过咬伤、抓伤或密切接触等形式感染人类而引起狂犬病。,一）生物学性状,形态与结构,子弹头形状: 一端钝圆，另一端扁平，平均大小为130-300 nm60-85 nm 核酸：-ssRNA RNA基因组编码5种蛋白:3-N, P, M, G, L-5 有一层磷脂层包被，包膜上嵌有钉状突起,在易感动物或人的中枢神经细胞、主要是大脑海马回的锥体细胞中增殖时，可以在胞质内形成一个或多个、圆形或椭圆形、直径为20-30nm的嗜酸性包涵体，称内基小体（Negri body）。,培养特性,一）生物学性状,糖蛋白G: 病毒表面，刺激机体产生中和抗体、血凝抑制抗体和细胞免疫应答； 核蛋白N：病毒核心，属特异性抗原，能够以核蛋白(RNP)的形式诱生保护性的细胞免疫应答，但不能刺激机体产生中和抗体。,主要抗原,一）生物学性状,野毒株（wild strain）或街毒株（street strain）: 从自然感染的动物体内分离到的病毒，潜伏期长，毒力强 固定毒株（fixed strain）： 将野毒株接种实验动物脑内，并连续传50代以上获得的潜伏期为4-6天的毒株，潜伏期短，毒力弱。,变异,一）生物学性状,病毒抵抗力不强。 对热敏感，60 经30 min或100 2 min即可灭活。 易被强酸、强碱、乙醇、乙醚等灭活。 肥皂水、离子型或非离子型去垢剂亦有灭活作用。,抵抗力,一）生物学性状,主要是病犬（80-90%），其次是由猫和狼。发达国家的野生动物如狐狸、食血蝙蝠、臭鼬和浣熊等逐渐成为重要传染源。隐性感染的犬、猫等动物亦有传染性。 患病动物唾液中含有大量的病毒，于发病前5d即具有传染性,传染源,二）致病性与免疫性,病毒主要通过被咬伤、抓伤的皮肤损伤处进入人体。粘膜也是病毒的侵入门户，如患病动物的唾液污染眼结膜等，也可发病。,传播途径,二）致病性与免疫性,狂犬病的传播,发病机制,人被病犬咬伤 病毒随犬唾液经伤口进入人体 （病毒在入侵部位的肌细胞中增殖） 通过神经肌肉接头侵入外周神经 细胞-细胞间传递形式 神经节直至中枢神经系统（脑组织中病毒迅速增殖扩散） 沿传出神经传至唾液腺及其他组织。,二）致病性与免疫性,laboratory diagnosis dogs and cats in a rabies endemic area should beheld for 10 days for observation Histopathology : Negri bodies Rapid virus antigen detection therapy wound treatment passive immunization horse anti-rabies serum human rabies immune globulin active immunization :inactivated vaccine,犬患狂犬病按症状分为狂暴型和麻痹型两种： 狂暴型分前驱期、兴奋期、麻痹期； 麻痹型病犬以麻痹症状为主，兴奋期极短或无。犬狂犬病整个病程不超过5-6 d。 病猫以狂暴型为多，病程较短，症状与犬相似。因其与人接触密切，咬伤人的危险性甚大。,二）致病性与免疫性,前驱期 发热、头痛、乏力、周身不适等症状，对痛、声、光等刺激较敏感，并有咽喉紧缩感。约5080%病人伤口部位及其附近有麻木或蚊走感； 兴奋期或痉挛期 处于兴奋状态，如极度恐惧、烦燥，对水声、风等刺激非常敏感，易于引起发作性咽肌痉挛、呼吸困难等。部分患者出现特殊的恐水症状，在饮水、见水、流水声或谈及饮水时，可引起严重咽喉肌痉挛，称为“恐水症”（hydrophobia）。随后，部分病人出现精神失常、定向力障碍、幻觉、谵妄等。病程进展很快； 麻痹期 痉挛减少或停止，出现弛缓性瘫痪，神志不清，最终因呼吸麻痹和循环衰竭而死亡。,二）致病性与免疫性,典型临床表现,体液免疫：感染后机体产生中和抗体。有中和游离状态的病毒、阻断病毒进入神经细胞内的作用。 细胞免疫：杀伤性T淋巴细胞特异性地作用于病毒的蛋白抗原，引起病毒溶解；单核细胞产生的IFN和IL-2具有抑制病毒复制和抵抗病毒攻击的作用。,免疫性,二）致病性与免疫性,(一 )标本直接检查 1显微镜检查内基小体 2. 抗原检查 （1）免疫荧光法 （2）免疫酶法 （3）斑点免疫结合法（DIA） 3核酸检测：用RT-PCR法检测标本中狂犬病病毒RNA。,三）微生物学检查法,（二）分离培养 （三）抗体检测 （四）捕捉动物观察,捕捉消灭野犬，加强家犬的管理和普及接种犬用狂犬疫苗是预防狂犬病的重要措施。 人被患病动物咬伤、抓伤或其他带毒的实验用具伤害皮肤和肌肉时，应采取妥善处理伤口和特异性防治相结合的措施。,四）防治原则,伤口处理 立即用20%肥皂水、清水充分冲洗数分钟，然后用5%碘酒烧灼伤口。若伤口过深，可作清创术。再用3%H2O2溶液，0.1%高锰酸钾或0.1%新洁尔灭处理。最后伤口周围用抗狂犬病病毒免疫球蛋白作浸润性注射。剂量为40 IU/kg。,四）防治原则,预防接种 接种狂犬疫苗是预防发病的重要措施。即所谓的预防性治疗。由于狂犬病的潜伏期长，从被咬伤到发病一般经过几十天或几个月，在此期间尽早接种疫苗可免于发病。 严重咬伤者，除应给予高效价免疫血清进行被动免疫外，仍需要接种狂犬疫苗，可收到更佳效果。,四）防治原则,第三十二章 朊粒（prion）,传染性蛋白粒子 (proteinaceous infectious particle) 个体微小(300 nm)，不含核酸，构象异常的蛋白酶抗性蛋白，称为朊蛋白(PrP)。 对各种理化作用的抵抗力强，具有传染性。 传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies, TSEs)的病原体。,是一种不含核酸和脂类的疏水性糖蛋白。 细胞朊蛋白(cellular isoform of PrP, PrPC)： 正常人和动物的神经细胞编码的一种糖基化膜蛋白，分子量为33-35103，称为PrP33-35，命名PrPC，它对蛋白酶、去污剂敏感。 羊瘙痒病朊蛋白(scrapie isoform of PrP, PrPSC)： 分子量为27-30103，称为PrP27-30，能抵抗蛋白酶的消化作用。 PrPC和PrPSC的一级结构完全相同，但其空间结构不同,一）生物学性状,PrPc和PrPsc主要区别,对理化因素的抵抗力强 对甲醛、乙醇、蛋白酶和放射性核素等具有抵抗力 消毒常用5%次氯酸钠或2 mol/L的氢氧化钠浸泡手术器械2 h，高压灭菌需用202 kPa、134 处理1 h，以彻底灭活朊粒,一）生物学性状,抵抗力,共同特征：潜伏期长（可达数年至数十年之久）一旦发病即呈慢性进行性发展，最终死亡。 病理特点：朊粒致中枢神经系统退化性病变，大脑和小脑的神经细胞融合、消失，形成多数小空泡并伴有星状胶质细胞增生，出现海绵状改变为特征，病变部位无炎症反应，而是由朊粒蛋白（PrP）大量堆积在神经组织里，形成淀粉样斑块,二）致病性与免疫性,脑组织海绵样改变，空泡形成,临床表现：痴呆、共济失调、震颤等中枢神经系统症状。 致病机制：未明。目前认为，PrPC转变为PrPSC是疾病发生的基本条件，PrPSC在中枢神经系统细胞内聚集而导致疾病的发生。,二）致病性与免疫性,人和动物prion病,normal,在欧洲已流行了近300年（第一个被发现的TSE）,感染动物表现为消瘦、步态不稳、脱毛、麻痹等，因病羊由于瘙痒而常在围栏上摩擦身体而得名，病死率极高。,1. 羊瘙痒病 (scrapie of sheep and goat),俗称疯牛病(mad cow disease)，1986年首次在英国报道。该病潜伏期4-5 y，发病初期表现为体质变差，体重减轻，产奶量下降等非特异性症状。随后神经系统症状逐步明显，出现运动失调、震颤等，由于病牛常表现出感觉过敏、恐惧甚至狂乱，因此俗称“疯牛病”。,2. 牛海绵状脑病 (bovine spongiform encephalopathy, BSE),3. 颤抖病 （Kuru Disease）,病人小脑受损，产生共济失调和震颤。“Kuru”一词是当地方言，用来形容本病颤抖和跳动的特征 Kuru病的潜伏期为5-30年，早期症状为运动失调、颤抖，晚期出现痴呆。病程一般不超过1年，大多在6-9个月内死亡 当地有宗教性食尸恶习，这是感染本病的原因,Kuru disease,4. 克雅病（CJD),又称传染性痴呆病或早老性痴呆病，是一种致命性人海绵状脑病 潜伏期可达数十年，开始出现精神、感觉方面的症状，随后出现运动失调，晚期出现肌肉痉挛并伴有痴呆，多在5-12个月内死亡 现已证实此病是由朊粒蛋白PrPSC大量沉积在神经组织里，形成淀粉样斑块，引起致死性中枢神经系统慢性退化性疾病,有传染型、家族遗传型和散发型等三型 传染型：占10%，主要由医源性传播，如角膜移植和硬脑膜移植等，或使用污染的手术器械，或使用人垂体制备的生长激素等，多于手术后18个月发病 家族遗传型：占10-15%， GSS综合征:主要临床特征是小脑运动失调，眼球震颤和步态异常，后期出现痴呆； 致死性家族性失眠:是一种特别罕见的遗传性失调，临床特点是睡眠紊乱与智力下降 散发型：最为常见，占75-80%,一种新型的人类传染性海绵状脑病，1996年由英国CJD监测中心首次报导。本病与典型的CJD在好发年龄、临床特征、脑电图和病理等方面有明显变化，因此被认为是新变种(new variant CJD,v-CJD)。,5. 克-雅病变种 (variant CJD, v-CJD),1.免疫组化技术 是目前确认TSE的有效手段。 2.免疫印迹技术 蛋白印迹(Western blotting)检测PrPSC是一种简单而敏感的诊断方