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Protocol of qualitative PCR for the detection of genetically modified components in tobacco a3=. 3.2. 13 TrisI tris (hydroxymethyl) arninomethane,Z(% 4 S)JfilSEfl ti2 a 3.2. 14 DNA I dexribonucleic acid, li#$I. 3.2. 15 dNTPs 1 dTTP,dATP,dCTP,dGTP. 3.2. 16 dTTP I deoxyribonucleoside triphosphate,M#VZ#l 3.2. 17 dATPl deoxyadenosine triphosphate,ll#BP3Ra 3.2. 18 dCTPl deoxycytidlne triphosphate,W#lekB3fEl#l. 3.2. 19 dGTPl deoxyguanosine kphosphate,%4 3.2.20 dUTPI deoxyuridine triphoaphate, lR#R%Z119B!. 3.2.21 bptbase pair,f * I % # . RHJ$BBUWa NF#SBM5619S8H83iMJ3=91%i 35s G NPT-I1 r # !B 19% l8obp 173bp 299bp 202bp bB % Blk39t;llW %B!hl MIY1111 %Yr$l! 9 4 5-gctcctacaaatgccatca-3 5-gatagtgggattgtgcgtca-31 5-gaatcctgttgccggtcttg3 5-ttatcctagtttgcgcgcta-3 5-gga tctcctgtcatct-3 5-gatcn tcctgatcgac-3 5-cccactagttaacaatttgnttgga-3 5-ccgaagctttaggactgtaggt-3 5-aagacgttggcagctggtcg-3 5-ctcgbatttgaatcgcgu-3 *88?4M 9t. a 9t.m 9 b t!l fim 4tdM trN#( IOO PI.- 1 OOO ILL) , t$lt*;t$lNJR%!%IBIJtrIrH#NKl#NRA#alt- Zoo mg YfT#B9YfiM=EZ*HBfiS*tRfibA4t%W. 8.3 DNA H#!r)C%irtt-bn$?lFRb)(F?M t Bp V;5 000 r/rnin at 10 rnin,Srl.Ej$m. 8.3.2.7 M 8o%Zs5r%B-M3g9T.Mt?Z 11.7-1.9 kMfl,Re PCR ISI%A-%KIRJL$TP *fiAffiX-#%JIlo% CTAB RtlBB#%,sE/Q,SbnA 7B;#$R=gl%-WBB(24 1 ,liAH CTAB tKB#%li#i, 15 000 r/min,Rt 10 rnin,B. 8.3.3.5 (S?fE,tQco. 5 pg/mL)lj4l a % j m t B B DNA $fhj8fi PCR M , P B X $ J . P # B X A N H - B J T M 550 bp M I PCR WJ. AHMR PCR PC%V*,RII xn# DNA RQafi%graa,iJt wmlicp;a-11 PCR E C I ( I B F l;.5 rnin 7 2 C ,5 nlln 72C ,5 rnln 7 2 C , 5 mln SEIB# 7 2 t ,5 mln 72 ,5 mn 7 2 t $6 min 7 2 t ,5 min 7 2 t ,5 mln WS#LW Bt CMV-CP TMV 54KD TMV-CP PVY-CP * iY 9 4 t ,10 min 9 4 t , 10 rnin 9 4 t ,10 rnin 9 4 t , 1 0 min , I . 9 4 t , 10 min rS# 94C ,45 s 5 5 C , 1 min 7 2 t ,2 mln 9 4 t , 1 rnin 5 5 t , 1 min 7 2 t ,2 min 9 4 t , 1 min 6 0 t ,1 min 7 2 t , 2 rnin P 4 t ,I mln 5 5 t , 1 m n 7 2 t ,2 rnin 9 4 t ,60 s 5 5 t ,75 6 7 2 C ,50 6 30 30 35 30 30 r#lT;l#WBl94,J?$BER: -10% CTAH (a#B) I - 0 . 7 mol/l. S4k9)tl. rtr 7;PJ#BEB: -1% CTAU; -50 mmol/I, Tris-HC (pH -10 mmol/l, EDTA (pH8.0). Ib-FPlVE!fdt:

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