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书书书 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖犜 进出口乳及乳制品中 内酰胺类药物残留检测方法 放射受体分析法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犫 犲 狋 犪 犾 犪 犮 狋 犪 犿 狊 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犿 犻 犾 犽犪 狀 犱犱 犻 犪 狉 狔狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊 犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 犚 犪 犱 犻 狅 狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 书书书 前 言 本标准的附录 为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位: 中华人民共和国广东出入境检验检疫局。 本标准主要起草人: 陆勤、 林峰、 朱柳明、 陈永红、 陈小雪。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 犛 犖犜 进出口乳及乳制品中 内酰胺类药物残留检测方法 放射受体分析法 范围 本标准规定了进出口乳及乳制品中 内酰胺类药物残留测定的制样和放射受体分析方法。 本标准适用于鲜奶、 奶粉、 乳清粉中阿莫西林、 青霉素、 氨苄西林、 头孢唑啉、 苯唑西林、 双氯青霉素、 邻氯青霉素、 头孢噻呋、 头孢氨苄药物残留的筛选检测。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件, 其随后所有 的修改单( 不包括勘误的内容) 或修订版均不适用于本标准, 然而, 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本适用于本标准。 分析实验室用水规格和试验方法 试样制备和保存 试样制备 从混合原始样品中取出部分代表性样品, 奶粉不少于 , 鲜奶不少于 , 均分两份, 装入洁 净容器内作为试样, 加封并标明标记。制样过程中应防止样品受到微生物或化学物的污染或发生残留 物含量的变化。 试样保存 干粉样品室温密封保存, 液体样品于冷藏保存, 以下冷冻可保存个月。 检测方法 方法提要 检测的基础是竞争性受体免疫反应。当样品中含有 内酰胺类抗生素时, 样品中的 内酰胺类抗 生素残留物与受体试剂中相应受体的结合位点结合, 从而阻止了 标记的青霉素 与受体试剂位 点结合。样品中 内酰胺类药物含量越高, 竞争的结合位点越多, 标记的青霉素结合的则越少, 用液体闪烁计数仪测定样品中 含量的 值( , 即每分钟脉冲数) 越低。样品中 内酰胺类抗生素残留量与 值成反比。 试剂与材料 除非另有说明, 所用试剂均为分析纯, 水为 规定的一级水。 牛奶中 内酰胺类抗生素 测定试剂盒 )( ) : 药片标识为。 受体试剂药片: 于 以下冷冻保存。 标记的青霉素 药物片剂: 于 以下冷冻保存。 ) 牛奶中 内酰胺类抗生素竞争性受体结合测试试剂盒是由 公司提供产品的商品名称。给出 这一信息是为了方便本标准的使用者, 并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果, 则可使 用这些等效产品。 犛 犖犜 阴性对照奶粉: 被证实不含抗生素的奶粉。 阳性对照品: 是含多种抗生素的标准品干粉。 闪烁液。 硅硼酸盐玻璃试管及试管塞。 具塞塑料离心管, 。 药片压杆。 仪器和设备 液体闪烁计数仪: 分析仪。 分析天平: 感量为 犵和 。 离心机: 大于等于 犵。 涡旋混合器。 恒温加热器: , 。 微量移液器: , , 。 分析步骤 阴性对照和阳性对照溶液的准备 阴性对照溶液的配制: 取试剂盒中阴性对照奶粉( ) 约 加 温水 溶解, 放 置在冰浴中待测。 阳性对照溶液的配制: 用稀释好的阴性对照溶液( ) 稀释阳性对照品( ) , 溶解 后的阳性对照液中含的青霉素 , 或者在阴性牛奶样品中加入一定量青霉素 , 使之浓度为 。放置在冰浴中待测。 样品的前处理 液态奶: 取 牛奶, 犵离心 , 除去上层脂肪层。冰浴冷却至待测。 奶粉、 乳清粉: 称取 样品, 加水 溶解。冰浴冷却至待测。 检测 取出检测试剂药片, 用药片压杆将受体试剂药片( ) 加入硅硼酸盐玻璃试管中。 加入 水, 用涡旋混合器振荡约 , 将药片溶解。 将 牛奶样品( ) , 或阴性对照溶液( ) 或阳性对照溶液( ) 加入试管中, 在涡 旋混合器上振荡 , 使之混匀。 置于恒温加热器中 温育 。 从恒温加热器中取出试管, 立即用药片压杆将 标记的青霉素 药片( ) 压入试管 中, 在涡旋混合器上振荡 , 上下来回 次。 置于恒温加热器中 保温 。 取出试管, 犵, 离心 ; 立即从离心机中取出试管, 倾去上清液。 倒置, 用棉签擦去试管内脂肪环并吸干液体, 注意勿触及沉淀物。 加 水, 用涡旋混合器混匀, 将沉淀物打碎。 加 闪烁液( ) 至试管中, 盖上试管塞, 涡旋混匀。 在液体闪烁计数分析仪的 频道进行 计数, 打印计数结果。 控制点的确定 控制点是判断样品阴性与初筛阳性的一个界定值。正常情况下, 新批号应设定一个新的 控制点。 按方法 测定个非重复的阴性对照溶液( ) 的计数值, 求出平均值乘上系数 , 即为 筛选水平的控制点。 犛 犖犜 结果判定 当样品的 值大于控制点时, 判定为“ 阴性” 。即样本中 内酰胺类含量低于筛选水平。 当样品的 值等于或小于控制点, 视为“ 初筛怀疑阳性” , 此时应重新测定样品、 阴性对照液 和阳性对照液的 值。当阴性对照液和阳性对照液的 值在正常范围波动( 参见附录 ) , 样本测 试结果 值大于控制点, 判定为“ 阴性” ; 若样本 值仍等于或小于控制点, 则判定样品为“ 筛选 阳性” 。 确证试验 被测样品中 内酰胺类抗生素残留筛选结果为初筛阳性的, 应用其他方法进行确证。 检测限 检测限见表。 表 检测限 抗生素 样 品 鲜奶 ( )奶粉、 乳清粉 ( ) 阿莫西林 青霉素 氨苄西林 头孢唑啉 苯唑西林 双氯青霉素 邻氯青霉素 头孢噻呋 头孢氨苄 犛 犖犜 附 录 犃 ( 资料性附录) 仪器和试剂的日常监控 犃 试剂的监控 犃 每一批新的试剂需测定零基准平均值, 测定三次阴性对照液 值, 其平均值即为零基准平均 值。当遇到样品“ 初筛怀疑阳性” 时, 通过测定阴性对照液( ) 和阳性对照液( ) 值与零基 准平均值的 值比较, 可确定试剂和液体闪烁计数仪是否正常。 犃 正常情况下, 阴性对照测定值一般在零基准平均值上下波动, 幅度约 。 犃 正常情况下, 阳性对照测定值小于控制点。 犃 如果 或 条件不符, 应重新测定零基准平均值和控制点, 并重新测定样品。 犃 新购试剂应首先检测阳性对照和阴性对照的比值, 若比值小于 , 表明试剂有效, 可以进行检 测; 若比值大于 , 表明试剂失效。 犃 仪器的监控 犃 犆 犺 犪 狉 犿 液体闪烁计数仪零点校准 取空的专用试管放入液体闪烁计数仪计数, 计数值需小于 , 否则需调零。如测得的计数值偏大, 可能由液体闪烁计数仪有大量静电存在所引起, 可用湿抹布将试管外壁湿润后放入液体闪烁计数仪进 行测定, 重复几次后可以达到正常值。 犃 犆 通道校准 取 标记的青霉素 片剂加入玻璃试管, 加 水, 振荡使沉淀物完全溶解。加 闪 烁液到试管内涡旋混匀。将试管放入液体闪烁计数仪内, 读 通道和 通道的 值。 通 道的 值应大于 , 且 与 通道的 值的比值应小于 。 犃 阴性对照的监控 如果原奶、 经巴氏消毒的牛奶或奶粉, 测得的 值在阴性对照的 值 范围内波动, 可认 为其不含 内酰胺类抗生素。可作为阴性对照使用。 犃 分析条件的监控 犃 测试的环境温度为 , 湿度小于 。 犃 每次同时运行 个样品最佳。 犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱 犃 狀 狀 犲 狓犃狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狀 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱犻 狊狌 狀 犱 犲 狉狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲 犱狅 犳犖 犪 狋 犻 狅 狀 犪 犾犚 犲 犵 狌 犾 犪 狋 狅 狉 狔犆 狅 犿犿 犻 狊 狊 犻 狅 狀犳 狅 狉 犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狑 犪 狊 犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱 犫 狔 犌 狌 犪 狀 犵 犇 狅 狀 犵 犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀 犪 狀 犱 犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲 犅 狌 狉 犲 犪 狌 狅 犳狋 犺 犲 犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犙 犻 狀犔 狌,犉 犲 狀 犵犔 犻 狀,犔 犻 狌 犿 犻 狀犣 犺 狌,犢 狅 狀 犵 犺 狅 狀 犵犆 犺 犲 狀犪 狀 犱犡 犻 犪 狅 狓 狌 犲犆 犺 犲 狀 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狀 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲狆 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狆 狉 狅 犿 狌 犾 犵 犪 狋 犲 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋 狋 犻 犿 犲 犛 犖犜 犇 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犮 犺,狋 犺 狉 狅 狌 犵 犺 狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊 犻 狀 狋 犺 犻 狊 狋 犲 狓 狋,犮 狅 狀 狊 狋 犻 狋 狌 狋 犲狆 狉 狅 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犉 狅 狉犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊,狊 狌 犫 狊 犲 狇 狌 犲 狀 狋犪 犿 犲 狀 犱 犿 犲 狀 狋 狊狋 狅,狅 狉狉 犲 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳, 犪 狀 狔狅 犳 狋 犺 犲 狊 犲狆 狌 犫 犾 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀 狊犱 狅狀 狅 狋 犪 狆 狆 犾 狔 犎 狅 狑 犲 狏 犲 狉,狆 犪 狉 狋 犻 犲 狊 狋 狅犪 犵 狉 犲 犲 犿 犲 狀 狋 狊犫 犪 狊 犲 犱狅 狀 狋 犺 犻 狊 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲犲 狀 犮 狅 狌 狉 犪 犵 犲 犱狋 狅犻 狀 狏 犲 狊 狋 犻 犵 犪 狋 犲狋 犺 犲狆 狅 狊 狊 犻 犫 犻 犾 犻 狋 狔狅 犳犪 狆 狆 犾 狔 犻 狀 犵狋 犺 犲犿 狅 狊 狋狉 犲 犮 犲 狀 狋犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳狋 犺 犲狀 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌 犿 犲 狀 狋 狊 犻 狀 犱 犻 犮 犪 狋 犲 犱犫 犲 犾 狅 狑 犉 狅 狉 狌 狀 犱 犪 狋 犲 犱 狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊,狋 犺 犲 犾 犪 狋 犲 狊 狋 犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲狀 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌 犿 犲 狀 狋 狉 犲 犳 犲 狉 狉 犲 犱 狋 狅犪 狆 狆 犾 犻 犲 狊 犌 犅犜 犠 犪 狋 犲 狉 犳 狅 狉犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾 犾 犪 犫 狅 狉 犪 狋 狅 狉 狔狌 狊 犲犛 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狋 犲 狊 狋犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊 犛 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狊 狋 狅 狉 犪 犵 犲 犛 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀 犚 犲 狆 狉 犲 狊 犲 狀 狋 犪 狋 犻 狏 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊,犪 犫 狅 狌 狋 犵犳 狅 狉犿 犻 犾 犽狆 狅 狑 犱 犲 狉犪 狀 犱 犿 犔犳 狅 狉犿 犻 犾 犽狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲狋 犪 犽 犲 狀犳 狉 狅 犿犪 犾 犾 狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊 犓 犲 犲 狆狋 犺 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犲 犱狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊 犻 狀 狋 狅狋 狑 狅犮 犾 犲 犪 狀犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀 犲 狉 狊,狊 犲 犪 犾 犪 狀 犱 犾 犪 犫 犲 犾 犐 狀狋 犺 犲犮 狅 狌 狉 狊 犲狅 犳 狊 犪 犿 狆 犾 犲 狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀,狆 狉 犲 犮 犪 狌 狋 犻 狅 狀犿 狌 狊 狋犫 犲狋 犪 犽 犲 狀狋 狅犪 狏 狅 犻 犱犿 犻 犮 狉 狅 犫 犻 犪 犾 犪 狀 犱犮 犺 犲 犿 犻 犮 犪 犾 犮 狅 狀 狋 犪 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 狉犪 狀 狔犳 犪 犮 狋 狅 狉 狊 狋 犺 犪 狋犿 犪 狔犮 犪 狌 狊 犲狋 犺 犲犮 犺 犪 狀 犵 犲狅 犳 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 犛 犪 犿 狆 犾 犲狊 狋 狅 狉 犪 犵 犲 犕 犻 犾 犽狆 狅 狑 犱 犲 狉狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊犽 犲 犲 狆犪 狋狉 狅 狅 犿狋 犲 犿 狆 犲 狉 犪 狋 狌 狉 犲犪 狀 犱犱 狉 狔 犜 犺 犲犾 犻 狇 狌 犻 犱狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲狊 狋 狅 狉 犲 犱犪 狋 犳 狅 狉狌 狆狋 狅犱狅 狉狊 狋 狅 狉 犲 犱犪 狋 犳 狅 狉狌 狆狋 狅狋 狑 狅犿 狅 狀 狋 犺 犛 犖犜 犕 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲狅 犳犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犜 犺 犲犫 犪 狊 犻 狊狅 犳狋 犺 犲狋 犲 狊 狋 犻 狊犮 狅 犿 狆 犻 狋 犻 狋 犻 狏 犲狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉 犻 犿犿 狌 狀 狅 犪 狊 狊 犪 狔 犜 犺 犲犅 犲 狋 犪 犾 犪 犮 狋 犪 犿 狊犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀 狋 犺 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊犫 犻 狀 犱狋 狅狋 犺 犲犫 犻 狀 犱 犻 狀 犵 狊 犻 狋 犲 狊狅 犳狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉犪 狀 犱狆 狉 犲 狏 犲 狀 狋狋 犺 犲 犆 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱狆 犲 狀 犻 狀 犮 犻 犾 犾 犻 狀 犌犳 狉 狅 犿 犫 犻 狀 犱 犻 狀 犵狑 犻 狋 犺狋 犺 犲犫 犻 狀 犱 犻 狀 犵 狊 犻 狋 犲 狊 犜 犺 犲犺 犻 犵 犺 犲 狉狅 犳犅 犲 狋 犪 犾 犪 犮 狋 犪 犿 狊犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀狋 犺 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲,狋 犺 犲犿 狅 狉 犲 狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉狊 犻 狋 犲 狊狋 犺 犲 狔犮 狅 犿 狆 犲 狋 犻 狋 犻 狏 犲 犾 狔犫 犻 狀 犱,狑 犺 犻 犾 犲狋 犺 犲犫 狅 狌 狀 犱 犆 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱狆 犲 狀 犻 狀 犮 犻 犾 犾 犻 狀 犌犪 狉 犲 犾 犲 狊 狊 犜 犺 犲 狀犪 犱 犱 狋 犺 犲狊 犮 犻 狀 狋 犻 犾 犾 犪 狋 犻 狅 狀 犳 犾 狌 犻 犱犪 狀 犱犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犲犫 狔犪 犾 犻 狇 狌 犻 犱狊 犮 犻 狀 狋 犻 犾 犾 犪 狋 犻 狅 狀犮 狅 狌 狀 狋 犲 狉 犳 狅 狉 狋 犺 犲犮 狆 犿(犮 狅 狌 狀 狋 狆 犲 狉犿 犻 狀 狌 狋 犲)狅 犳 狋 犺 犲 犆 犻 狀狋 犺 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲 犜 犺 犲狏 犪 犾 狌 犲 狊狅 犳犮 狆 犿 狑 犲 狉 犲犻 狀 狏 犲 狉 狊 犲狑 犻 狋 犺犅 犲 狋 犪 犾 犪 犮 狋 犪 犿 狊犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狊狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀 狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊 犚 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊犪 狀 犱犿 犪 狋 犲 狉 犻 犪 犾 狊 犝 狀 犾 犲 狊 狊狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犾 犲 犱,犪 犾 犾 狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊狌 狊 犲 犱狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲狅 犳 犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾 犵 狉 犪 犱 犲,犪 狀 犱“狑 犪 狋 犲 狉”犻 狊 狋 犺 犲 犳 犻 狉 狊 狋犵 狉 犪 犱 犲狑 犪 狋 犲 狉 狆 狉 犲 狊 犮 狉 犻 犫 犲 犱犫 狔犌 犅犜 犆 犺 犪 狉 犿 狋 犲 狊 狋犽 犻 狋 犳 狅 狉犱 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀狅 犳犫 犲 狋 犪 犾 犪 犮 狋 犪 犿 狊 犻 狀犿 犻 犾 犽 ): 狋 犪 犫 犾 犲 狋犿 犪 狉 犽 犲 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犔,狆 犾 犪 狊 狋 犻 犮 犜 犪 犫 犾 犲 狋狆 狌 狊 犺狆 狅 犾 犲 犃 狆 狆 犪 狉 犪 狋 狌 狊犪 狀 犱犲 狇 狌 犻 狆 犿 犲 狀 狋 犔 犻 狇 狌 犻 犱犛 犮 犻 狀 狋 犻 犾 犾 犪 狋 犻 狅 狀犆 狅 狌 狀 狋 犲 狉:犆 犺 犪 狉 犿 犪 狀 犪 犾 狔 狕 犲 狉 犛 犖犜 犅 犪 犾 犪 狀 犮 犲:狊 犲 狀 狊 犻 狋 犻 狏 犲 狋 狔 犻 狊 犿 犵犪 狀 犱 犵 犆 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲 狉: 犵 犞 狅 狉 狋 犲 狓犿 犻 狓 犲 狉 犆 狅 狀 狊 狋 犪 狀 狋 狋 犲 犿 狆 犲 狉 犪 狋 狌 狉 犲 犻 狀 犮 狌 犫 犪 狋 狅 狉: , 犕 犻 犮 狉 狅狆 犻 狆 犲 狋 狋 犲, 犔 犔, 犔 犔, 犔 犔 犃 狊 狊 犪 狔狆 狉 狅 犮 犲 犱 狌 狉 犲 犜 犺 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狆 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犘 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀:犃 犱 犱 犿 犔狅 犳 狑 犪 狋 犲 狉 狋 狅狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾犿 犻 犾 犽 狆 狅 狑 犱 犲 狉( ) ,犆 狅 狅 犾 狋 狅 犫 犲 犳 狅 狉 犲狌 狊 犲 犘 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀:犇 犻 狊 狊 狅 犾 狏 犲犿 狌 犾 狋 犻 犪 狀 狋 犻 犿 犻 犮 狉 狅 犫 犻 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱( )狑 犻 狋 犺 犿 犔狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀(犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀 犻 狀 犵犵犽 犵狆 犲 狀 犻 犮 犻 犾 犾 犻 狀 犌狊 狋 狊 狀 犱 犪 狉 犱) 狅 狉犪 犱 犱犪 狀犪 犱 犲 狇 狌 犪 狋 犲 犪 犿 狅 狌 狀 狋狅 犳狆 犲 狀 犻 犮 犻 犾 犾 犻 狀 犌狋 狅狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犿 犻 犾 犽狊 犪 犿 狆 犾 犲 狋 狅犿 犪 犽 犲 狋 犺 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犵 犽 犵 犕 犻 狓 狑 犲 犾 犾 犪 狀 犱犮 狅 狅 犾 狋 狅 犫 犲 犳 狅 狉 犲狌 狊 犲 犘 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狊 犪 犿 狆 犾 犲 犔 犻 狇 狌 犻 犱犿 犻 犾 犽:犃 犱 犱 犿 犔犿 犻 犾 犽犻 狀 狋 狅犪 犿 犔犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲狋 狌 犫 犲,犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲犳 狅 狉犿 犻 狀犪 狋 犵, 犱 犻 狊 犮 犪 狉 犱狋 犺 犲狌 狆 狆 犲 狉 犳 犪 狋 犾 犪 狔 犲 狉 犆 犺 犻 犾 犾狑 犻 狋 犺 犻 犮 犲狋 狅犳 狅 狉狌 狊 犲 犕 犻 犾 犽狆 狅 狑 犱 犲 狉、狑 犺 犲 狔狆 狅 狑 犱 犲 狉:犠 犲 犻 犵 犺 狋 犵狅 犳 狋 犺 犲狋 犲 狊 狋狊 犪 犿 狆 犾 犲 犻 狀 狋 狅犪 犿 犔犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲狋 狌 犫 犲, 犱 犻 狊 狊 狅 犾 狏 犲狑 犻 狋 犺 犿 犔狑 犪 狋 犲 狉 犆 犺 犻 犾 犾狑 犻 狋 犺 犻 犮 犲狋 狅犳 狅 狉狌 狊 犲 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犜 犪 犽 犲狅 狌 狋 狋 犪 犫 犾 犲 狋 犃 犱 犱狅 狀 犲狆 犻 犲 犮 犲狅 犳犅 犲 狋 犪 犾 犪 犮 狋 犪 犿 狊 狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉 狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狋 犪 犫 犾 犲 狋( )犻 狀 狋 狅犪犫 狅 狉 狅 狊 犻 犾 犻 犮 犪 狋 犲犵 犾 犪 狊 狊狋 犲 狊 狋 狋 狌 犫 犲 犘 犻 狆 犲 狋 狋 犲 犔狑 犪 狋 犲 狉犪 狀 犱犿 犻 狓 狊狑 犻 狋 犺狏 狅 狉 狋 犲 狓犿 犻 狓 犲 狉 狋 狅犫 狉 犲 犪 犽狌 狆狋 犺 犲狋 犪 犫 犾 犲 狋 犃 犱 犱 犿 犔犿 犻 犾 犽狊 犪 犿 狆 犾 犲( )狅 狉 狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀( )狅 狉狆 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀( )犻 狀 狋 狅狋 犺 犲狋 狌 犫 犲,犿 犻 狓狑 犻 狋 犺狏 狅 狉 狋 犲 狓犿 犻 狓 犲 狉狌 狆犪 狀 犱犱 狅 狑 狀 狋 犻 犿 犲 狊犳 狅 狉犪 犫 狅 狌 狋 狊 犘 狌 狋 狋 犺 犲狋 狌 犫 犲 犻 狀狋 犺 犲 犻 狀 犮 狌 犫 犪 狋 狅 狉犪 狋 犳 狅 狉 犿 犻 狀 犜 犪 犽 犲狅 狌 狋 狋 犺 犲 狋 狌 犫 犲 犳 狉 狅 犿狋 犺 犲 犻 狀 犮 狌 犫 犪 狋 狅 狉 狆 狌 狊 犺 狋 犺 犲狆 犲 狀 犻 犮 犻 犾 犾 犻 狀 犌 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱 犆 狋 犪 犫 犾 犲 狋( )犻 狀 犛 犖犜 狋 狅狋 犺 犲狋 犲 狊 狋 狋 狌 犫 犲 犿 犻 狓狑 犲 犾 犾狑 犻 狋 犺狏 狅 狉 狋 犲 狓犿 犻 狓 犲 狉,犝 狆犪 狀 犱犱 狅 狑 狀 狋 犻 犿 犲 狊犳 狅 狉犪 犫 狅 狌 狋 狊 犘 狌 狋 狋 犺 犲狋 狌 犫 犲 犻 狀狋 犺 犲 犻 狀 犮 狌 犫 犪 狋 狅 狉犪 狋 犳 狅 狉 犿 犻 狀 犜 犪 犽 犲狅 狌 狋 狋 犺 犲 狋 犲 狊 狋 狋 狌 犫 犲犪 狀 犱犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲犪 狋 犵犳 狅 狉 犿 犻 狀;狋 犪 犽 犲狅 狌 狋 狋 犺 犲 狋 狌 犫 犲 犳 狉 狅 犿狋 犺 犲犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲 狉 犻 犿犿 犲 犱 犻 犪 狋 犲 犾 狔犪 狀 犱狆 狅 狌 狉狅 犳 犳犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犐 狀 狏 犲 狉 狋 狋 犺 犲 狋 狌 犫 犲,狑 犻 狆 犲狅 犳 犳 狋 犺 犲 犳 犪 狋 狉 犻 狀 犵犪 狀 犱狋 犺 犲 犾 犲 犳 狋狑 犪 狋 犲 狉狑 犻 狋 犺犮 狅 狋 狋 狅 狀狊 狑 犪 犫 犇 狅 狀狋 犮 狅 狀 狋 犪 犮 狋 狋 犺 犲 狆 犲 犾 犾 犲 狋 犃 犱 犱 犔狑 犪 狋 犲 狉 狋 狅狋 犺 犲狋 狌 犫 犲犪 狀 犱犿 犻 狓狑 犲 犾 犾 狋 狅犫 狉 犲 犪 犽狌 狆狋 犺 犲狆 犲 犾 犾 犲 狋 犃 犱 犱 犿 犔犛 犮 犻 狀 狋 犻 犾 犾 犪 狋 犻 狅 狀犳 犾 狌 犻 犱( )狋 狅狋 犺 犲狋 犲 狊 狋 狋 狌 犫 犲,犮 犪 狆犪 狀 犱犿 犻 狓狑 犲 犾 犾 狋 犻 犾 犾 狋 犺 犲 狉 犲 犻 狊狀 狅 犻 狀 犺 狅 犿 狅 犵 犲 狀 犲 狅 狌 狊犮 犾 狅 狌 犱 狔狊 犲 犱 犻 犿 犲 狀 狋 犻 狀狋 犺 犲狋 狌 犫 犲 犆 狅 狌 狀 狋 犻 狀犔 犻 狇 狌 犻 犱狊 犮 犻 狀 狋 犻 犾 犾 犪 狋 犻 狅 狀犮 狅 狌 狀 狋 犲 狉狅 狀 犆 犮 犺 犪 狀 狀 犲 犾 犳 狅 狉 狊犪 狀 犱狉 犲 犪 犱犮 狆 犿(犮 狅 狌 狀 狋狆 犲 狉犿 犻 狀 狌 狋 犲) 犘 狉 犻 狀 狋 狋 犺 犲狉 犲 狊 狌 犾 狋 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犆 狅 狀 狋 狉 狅 犾 犘 狅 犻 狀 狋 犜 犺 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狆 狅 犻 狀 狋 犻 狊 狋 犺 犲犮 狌 狋 狅 犳 犳狏 犪 犾 狌 犲犫 犲 狋 狑 犲 犲 狀犪狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲狅 狉“狆 狉 犲 狊 狌 犿 狆 狋 犻 狏 犲狆 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲”狉 犲 狊 狌 犾 狋 狊 犐 狀狀 狅 狉 犿 犪 犾 犮 狅 狀 犱 犻 狋 犻 狅 狀犲 狊 狋 犪 犫 犾 犻 狊 犺犪狀 犲 狑犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狆 狅 犻 狀 狋 犼 狌 狊 狋狅 狀 犮 犲犳 狅 狉犲 犪 犮 犺狀 犲 狑犾 狅 狋狅 犳 狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 犜 犲 狊 狋狊 犻 狓狆 犪 狉 犪 犾 犾 犲 犾 狊 狆 犻 犽 犲 犱狅 犳 狋 犺 犲狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀( )犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵 狋 狅狊 狋 犲 狆 ,犪 狏 犲 狉 犪 犵 犲狋 犺 犲犮 狆 犿狉 犲 狊 狌 犾 狋 犛 狌 犫 狊 狋 狉 犪 犮 狋 犳 狉 狅 犿狋 犺 犲狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲犪 狏 犲 狉 犪 犵 犲,犜 犺 犻 狊 犻 狊狋 犺 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狆 狅 犻 狀 狋 犚 犲 狊 狌 犾 狋 狊犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犐 犳 狋 犺 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲犮 狆 犿犻 狊犵 狉 犲 犪 狋 犲 狉 狋 犺 犪 狀狋 犺 犲犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 狆 狅 犻 狀 狋,狋 犺 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲 犻 狊狀 犲 犵 犪 狋 犻 狏 犲,狅 犳狑 犺 犻 犮 犺狋 犺 犲犫 犲 狋 犪 犾 犪 犮 狋 犪 犿 狊狉 犲 狊 犻 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