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文档简介

血清总胆固醇的测定,WHAT,血清中的胆固醇包括与脂肪酸结合的胆固醇酯(CE)和游离胆固醇(FC),前者约占总胆固醇的70%. 人体内含胆固醇约140g,主要在体内合成,也可从食物中吸收。其中25%分布在脑和神经组织,10%20%分布在血液中。,WHY,胆固醇是脂类化合物的一种,是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及构成细胞膜的重要成分。 正常人血清胆固醇含量围:3.05.20mmol/L 危险阈值:5.206.20mmol/L 高胆固醇血症: 6.20mmol/L,如果其在血液中浓度过高,也可造成心脑血管的严重损害。肝功能障碍时CE会减低。临床检测TCH浓度,主要用于原发性和继发性脂代谢异常症的诊断、动脉粥样硬化疾病的危险性预测、重症肝病及营养学评价。,HOW,总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。本实验采用后一方法。 化学比色法: 胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质,此物质在550nm波长处有最大吸收。因此,可用比色法作总胆固醇的定量测定。,胆固醇氧化酶法,实验目的,掌握血清总胆固醇测定的方法(胆固醇氧化酶法)与临床意义,实验原理,第一步:血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸 。 第二步:胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成4-胆甾烯酮和H2O2。 第三步:H2O2在4-氨基安替比林和酚存在时,经过氧化物酶催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物,其颜色深浅与标本中TC含量成正比。,试剂,基础液:100ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液(pH=6.7)(含胆酸钠129mg),4-氨基安替比林16mg,苯酚132mg,TritionX-100 0.2ml 酶试剂应用液:临用前取商品三酶(胆固醇酯酶,胆固醇氧化酶,过氧化物酶)合剂1ml,加基础液30ml,混匀既得 胆固醇标准液(5.17mmol/L):精准称取胆固醇200mg,用纯无水乙醇溶解,用乙醇定容至100ml,分装4C保存,临用时取出,操作,混合后置于37C水浴中保温15分钟,用空白管调零,在500nm波长处测吸光度。 公式:,氧化酶法测定血清总胆固醇,此方法特异性好和灵敏度高,既可用于手工操作,也可自动化分析,临床意义,胆固醇增高:常见于动脉粥样硬化,原发性高脂血症,(如家族性高胆固醇血症,家族性apoB缺陷症,多源性高胆固醇血症,混合性高脂蛋白血症等),糖尿病,肾病综合症,总胆管阻塞,甲状腺功能减退,肥大性骨关节炎,老年性白内障和牛皮癣等。 总胆固醇降低:常见于低脂蛋白血症,贫血,败血症,甲状腺功能亢进,肝疾病,严重感染,营养不良,肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性黄疸及慢性消耗性疾病,如癌症晚期等。,注意事项,1、最后加酶试剂,各管反应时间应一致; 2、比色应在30min内完成; 3、试管在操作前尽量保持干燥; 4、试剂中酶的质量影响测定结果 ; 5、若需检测游离胆固醇浓度,将酶试剂成分中去掉胆固醇酯酶即可。,此法中血红蛋白高于2g/L时引起正干扰;胆红素高于0.1g/L时有明显负干扰;血中维生素C与甲基多巴浓度高于治疗水平时,会使结果降低。高TG血症对本法无明显影响。检测TC的血清(浆)标本密闭保存时,在4可稳定1周,20可稳定半年以上。,健康,1.饮食不当。过多进食含高胆固醇的食物,比如心、肝等动物内脏。身体内摄入过多的胆固醇,引起总胆固醇偏高,这也是造成总胆固醇偏高的原因之一 2.肝细胞受损。胆固醇的酯化发生障碍,血中胆固醇减少,在肝硬化、重症肝炎等严重损害时,血中总胆固醇也降低。 3.阻塞性黄疸。这时由于胆汁排出受阻,血中出现脂蛋白-X和肝内胆固醇合成亢进所致,以游离型胆固醇的增加为主,引起总胆固醇偏高。所以阻塞性黄疸是造成总胆固醇偏高的原因之一。,总胆固醇偏高的饮食原则是多吃降低胆固醇以及保肝护肝的食物。比如: 豆腐。豆腐富含蛋白质,糖分也较少,不含胆固醇,常吃豆腐有降低胆固醇,防止血管硬化的作用。 菌菇类。香菇中含有的核糖类物质,可以有效地抑制血清和肝脏中胆固醇的上升。金针菇有降血脂的作用,草菇含大量的维生素C和蛋白质,而脂肪含量低,又不含胆固醇,同时还具有降低血中胆固醇的作用。 肉类。马肉中含丰富的蛋白质,而脂肪含量很低,尤其是胆固醇含量又很低其蛋白质中的氨基酸达20余种,营养价值很高。鸽肉能益气、养血、补肾,又属低脂肪高蛋白的补益食品。鸡肉有甘温益气作用,而且又是一种高蛋白低脂肪食物。蛙肉性凉味甘,能滋阴降火,对高脂血症患者来说,是为理想的清补食品。,鱼类。乌鱼又称黑鱼性寒味甘,能补脾利水同时它又是一种高蛋白低脂肪食品。青鱼性平味甘,能补气健脾化湿。鳆鱼又称鲍鱼,肉性平味甘咸,蛋白质含量极高,而脂肪含量很低的清补营养品。黄鳝甘温,古代医家认为它有添精益髓,又有通血脉、壮筋骨的作用同时它又是一种低脂食品。 另外,如黄瓜、海带、羊栖菜、海藻、槐花等食物

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