农林学类论文-一种阿维菌素制剂对大中华鳋杀灭效果的观察.doc农林学类论文-一种阿维菌素制剂对大中华鳋杀灭效果的观察.doc

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农林学类论文一种阿维菌素制剂对大中华鳋杀灭效果的观察目录目录I摘要IABSTRACTII1前言12材料与方法221材料211急性毒性实验212新阿维菌素制剂对大中华鳋的杀灭效果的观察22方法3221急性毒性实验5222新阿维菌素制剂对大中华鳋的杀灭效果的观察53结果与分析631急性毒性试验结果与分析632新阿维菌素制剂草鱼鱼鳃上寄生的大中华鳋杀灭观察结果与分析74讨论10参考文献12致谢13摘要目的主要研究草鱼中寄生的大中华鳋的药物防治,对新阿维菌素制剂杀灭大中华鳋进行安全性和疗效评价。水产受试药物对黄颡鱼、大口鲶、白鲢的急性毒性实验研究结果表明黄颡鱼安全浓度(SC)为00842MG/L,大口鲶安全浓度为02163MG/L,白鲢安全浓度为02304MG/L。因为黄颡鱼的安全浓度范围较低,故在一个池塘中施药时可以以其做依据。在安全浓度下该药对离体大中华鳋的杀灭效果较为显著,大多数死亡,而在高浓度条件下,虽可有效杀灭大中华鳋,但此时对鱼体亦有较大影响。因此具体应用到生产上,有必要进行进一步的研究,从而合理开发使用药物。关键词阿维菌素制剂;安全浓度;大中华鳋ABSTRACTTHERESEARCHAIMSATSTUDYINGTHETREATMENTOFSINERGASILUS,ANDEVALUATINGTHEEFFECTANDSAFETYOFAVERMECTINPREPARATIONONGRASSCARPDRUGSTESTESONPELTEOBAGRUSFULVIDRACO,SILUMSMERIDIONLIS,HYPOPHTHALMICHTHYSMOLITRIXINTHEACUTETOXICITYSHOWSTHATTHESCFORPELTEOBAGRUSFULVIDRACOIS00842MG/L,ANDFORSILUMSMERIDIONLISIS02163MG/L,ANDHYPOPHTHALMICHTHYSMOLITRIXIS02304MG/LASTHESAFECONCENTRATIONFORPELTEOBAGRUSFULVIDRACOISLOW,SOITCANBEABASISUNDERTHESAFECONCENTRATIONTHEKILLINGEFFECTOFAVERMECTINISJUSTGOOD,MOSTOFTHEMAREDEADATSCCONDITIONSALTHOUGHITCOULDKILLSINERGASILUSEFFECTIVELYBUTHAVEAGREATERBADIMPACTONFISHESTHEREFORE,FURTHERSTUDIESARENECESSARYFORTHESPECIFICAPPLICATIONTOTHEPRODUCTIONSOTHEDEVELOPMENTOFDRUGUSEMUSTONTHEWAYKEYWORDSAVERMECTIN;SAFECONCENTRATION;SINERGASILUS;1前言中华鳋病的病原体有大中鳋和鲢中华鳋。中华鳋雌雄异体,雌虫营寄生生活,雄虫营自由生活。大中华鳋的雌虫寄生在草鱼鳃上,鲢中华鳋寄生在鲢鳃上。雌虫用大钩钩在鱼的鳃丝上,像挂着许多小蛆,所以中华鳋病又叫“鳃蛆病”。中华鳋寄生在鱼的鳃上,除了它的大钩钩破鳃组织,夺取鱼的营养以外,它还可能分泌一种酶的物质,刺激鳃组织,使组织增生,病鱼的鳃丝末端肿胀发白、变形,严重时,整个鳃丝肿大发白,甚至溃烂,使鱼死亡。每年5~9月为流行盛期(刘国勇等,2008)。大中华鳋主要危害2龄以上的草鱼,病鱼在水中跳跃不安,食欲减退或不食,体发黑;严重时或并发其它病时,呼吸困难,离群独游,或停留近岸水体中,不久死亡。揭开鳃盖,可见许多带有卵囊的雌鳋挂在肿胀发白的鳃丝末端上,形似白色小蛆。目前对大中华鳋病的治疗还没有特效方法,大中华鳋病一旦发生,就难以控制,常常造成水产养殖业巨大的经济损失。阿维菌素为一种触杀,胃毒,渗透力强的鱼病药物。它是一种大环内酯双糖类化合物。是从土壤微生物中分离的天然产物。但它对叶片有很强的渗透作用,可杀死表皮下的害虫,且残效期长,它不杀卵(SUZUKIKETAL,1999。它属于新型广谱、高效、低毒抗生素类抗寄生虫药,对体内外寄生虫特别是线虫和节肢动物均有良好效果。本品对害虫的驱杀作用,在于增加虫体的抑制性递质R氨基丁酸(GABA)的释放,以及打开谷氨酸控制的氯通道,增强神经膜对氯的通透性,从而阻断神经信号的传递,最终神经麻痹,使肌肉细胞失去收缩能力,从而导致虫体死亡。阿维菌素是由日本北里大学大村智等和美国MERCK公司在1979年首先开发的一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物,由链霉菌中灰色链霉菌发酵产生。原药为白色或黄白色结晶粉,有效成分含量7580,常温下不易分解,在25℃、PH69的溶液中无分解现象。主要通过胃毒和触杀作用来杀灭害虫。阿维菌素对害虫、害螨的药效虽不如有些神经毒剂那么快,但它能麻痹害虫,使之极少取食,达到使作物免遭虫害的目的(王广成等,2006)。就其生产现状而言阿维菌素价格自2001年以后波动幅度较大。2009年阿维菌素价格上涨,阿维菌素油膏市场价从2008年12月份的700元/KG到2009年5月的1050元/KG,上涨了50%左右。目前中国阿维菌素产能近2500T/年,实际产量在1800T左右。自2003年以来年需求增幅为50%。预计2009年年需求量在2300T左右,实际生产产量在1800T左右,500T供求缺口要靠价格上涨抑制。随着阿维菌素价格上涨,众多生产企业有新增和扩建的迹象,阿维菌素又将迎来一波大幅度的扩产潮。预计到2010年6月份阿维菌素原药产能将达到6000T以上,出现供大于求的局面。2010年阿维菌素的市场需求量预计2500~2800T之间。阿维菌素原药有望在2010年的下半年再次创出600元/KG以下的新低价,并在较长的一段时间内维持较低的价格。预计阿维菌素原药在近几年还会出现一次供不应求局面,之后国内外市场将全面进入成熟期,原药价格将趋于平稳(孙娟,孟水强,2009)。草鱼(CTENOPHARYNGODONIDELLUS)属鲤形目鲤科雅罗鱼亚科草鱼属,栖息于平原地区的江河湖泊,一般喜居于水的中下层和近岸多水草区域。草鱼性活泼,游泳迅速,常成群觅食,为典型的草食性鱼类。因其生长迅速,饲料来源广,是中国淡水养殖的四大家鱼之一。而其培养过程中会感染大中华鳋病等,本实验主要研究阿维菌素对寄生于鱼体的大中华鳋的杀灭作用,并预先测出对鱼类本身的安全浓度,以便于在鱼体安全浓度下用药并证明最终查杀效果。2材料与方法21材料211急性毒性实验实验鱼为孵化一周的鱼苗,由武汉市东西湖水产繁育基地提供,平均全长为147020CM,平均体重2275MG。实验药物为北京清海洋科技有限公司产品。实验容器为规格303050CM的玻璃水族箱。试验用水为充分曝气后的自来水,水温25001℃,PH为670700,溶氧为500750MG/L。玻璃缸或白色泡沫箱15个,规格303050CM,水族箱1个,用于暂养实验药物阿维菌素制剂器材解剖剪、镊子、解剖针、标签纸、量筒(10、100、1000ML)、包埋器、烧杯(250ML)、解剖盘212阿维菌素制剂对大中华鳋的杀灭效果的观察实验鱼为鱼池养殖的团头鲂、黄颡鱼和白鲢。试验药物阿维菌素制剂,生理盐水,器材光学显微镜,六孔板,量筒,烧杯,盖玻片,载玻片,镊子,水族箱,22方法221急性毒性实验急性毒性试验(ACUTETOXICITYTEST)是指在短时间内(通常为24~96H)让试验生物接触高浓度有毒物质,被测试有毒物质引起生物群体产生特定百分数有害影响的试验。在急性毒性试验中,由于生物的死亡容易观察,并且又是最严重而明显的有害影响,因此,特定时间内试验生物的死亡率经常被用作急性毒性试验的描述指标。实验分四步第一步预实验确定24H鱼苗全部存活的药物最高浓度和鱼苗全部死亡的最低浓度。第二步设置若干浓度梯度,每浓度设三个平行组。第三步统计各梯度24H、48H、72H和96H平均死亡率,观察中毒和死亡个体的症状。第四步计算24H、48H和96H的LC50,并根据相关公式计算受试物的安全浓度。实验结果取重复组的平均值,死亡率P的计算公式为(P1-C)/(1-C),其中P1为观察死亡百分数,C为对照组死亡百分数。采用SAS81软件以浓度的常用对数为横坐标,死亡率的概率单位为纵坐标进行统计处理,拟合回归方程,用F检验法检验回归方程的显著性。根据死亡率、死亡时间及相应的药物浓度采用半对数直线内插法求出24H、48H和96H的LC50及95%可信限。安全浓度(SC)是指对试验动物完全生命周期都无有害影响的毒物浓度。其计算公式如下经验公式安全浓度=96HLC5001TUMBELL公式SC=48HLC5003/(24HLC50/48HLC50)2(张金彪等,2009周剑等,2009)。半致死浓度(LC50)是指一定条件下,某药物能引起试验生物群体中半数个体死亡的剂量。其测量暂没有统一标准。222阿维菌素制剂对大中华鳋的杀灭效果的观察杀灭大中华鳋的标准在显微镜下观察大中华鳋,虫体在1到2分钟内消化系统运动减缓或停止。设蒸馏水为对照组,药物浓度设安全浓度组、二分之一安全浓度组、十分之一安全浓度组、两倍安全浓度组以及十倍安全浓度组。(1)观察不同浓度的新阿维菌素制剂对离体大中华鳋的杀灭效果用镊子夹取鱼的鳃部到蘸有蒸馏水的载玻片上,取收集显微镜视野下可见的大中华鳋,置于对照组蒸馏水和不同浓度药液中,10MIN、1H、2H、6H、12H、24H后显微镜下观察,记录成熟期大中华鳋存活情况。(2)观察不同温度下的新阿维菌素制剂对离体大中华鳋的杀灭效果夹取鱼鳃于蘸有蒸馏水的载玻片上,取收集显微镜视野下可见的大中华鳋,置于对照组蒸馏水和不同温度下的药液中,10MIN、1H、2H、6H、12H、24H后显微镜下观察,记录成熟期大中华鳋存活情况3结果与分析31急性毒性试验结果与分析
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