5-氟尿嘧啶联合L-精氨酸治疗裸鼠人肝癌移植瘤的研究.pdf

!“#“$ “% 2 683 2;）*,.$,9 :; ?+.） ,* :; +)#?)%h） “,.$j :; “*/（k3 74h 683 75） *,.$,9 :; = :; +)#?)%g;he m%)h） “,.$j :; “*/（k3 74h 683 75） *,.$,9 :; = :; +)#?)%i3 nop djg ;g;h e c+*g;he “%)） 中国图书分类号： ug77k；u 7h3 hh； u 57g7k； u 57g7h； u 573 583 7； u 2523 ; 文献标识码： m 文章编号： ;88; :;25i （k88） 8 :82 :8h 摘要： 目的r 观察g氟尿嘧啶联合 #g精氨酸对裸鼠人肝癌移 植瘤的作用并探讨其作用机制。方法r 采用 ovjg5h8k 细胞 株建立裸鼠人肝癌移植瘤模型， 分别给裸鼠腹腔注射生理盐 水， g氟尿嘧啶， g氟尿嘧啶 w #g精氨酸， 观察各组药物对肿 瘤的抑制作用， 病理学观察移植瘤的坏死程度和范围， 免疫 组化测定移植瘤组织内诱导型一氧化氮合酶 （qcl） 的表 达。化学比色法检测诱导型一氧化氮合酶的活性。硝酸还 原酶法检测瘤组织内的一氧化氮的浓度， 统计分析采用 lg氟尿嘧啶联合 #g精氨酸能明显增 加对肿瘤生长的抑制作用， 病理显示肿瘤的坏死范围增大， qcl 表达和活性增强， qc 生成增加。结论r g氟尿嘧啶联 合 #g精氨酸能够抑制裸鼠人肝癌移植瘤的生长， 其机制可能 与诱导 qcl 表达和活性增强， qc 生成增加有关。 关键词： g氟尿嘧啶； #g精氨酸； 动物模型； 一氧化氮合酶； 一 氧化氮 收稿日期： k88h :;8 :k8， 修回日期： k88h :;k :8; 基金项目： 山东省优秀青年科学家奖励基金资助项目 （ q. k888 ookdom;） 作者简介： 尹晓燕 （;25 : ） ， 女， 博士， 研究方向： 肝癌的药物治疗， a)$： 87;g;i47， vg,“$： -s-h87;47 %.,； 姜军梅 （;25k : ） ， 女， 博士， 副主任医师， vg,“$： “*90*, =.。该研究在对裸鼠人肝癌 模型用 g_ 进行化疗的同时补充 #g精氨酸， 观察 药物的治疗效果， 探讨 #g精氨酸作为 g_ 辅剂的 可能性。 12 材料和方法 1 12试剂2兔抗人 qcl 多克隆抗体、 lmoe 试剂 盒、 dmo 显色试剂， 武汉博士德生物工程公司产品； qcl 活性检测试剂盒、 qc 浓度检测试剂盒， 南京建 成生物公司产品； dv 高糖培养基， a!%. 公司产 品； 新生小牛血清， 杭州四季青公司产品； g氟尿嘧 啶注射液， 上海旭东海普药业有限公司； #g盐酸精氨 酸 （#gm+9） 注射液， 上海信谊金朱药业有限公司。 1 32 细胞培养2ovj5h8k 细胞 （购于山东省医学 科学院基础研究所） 培养于 75b， c eck孵箱内， 培养基为含体积分数为 83 ;8 新生小牛血清， 青霉素 ; d;8_j :;， 链霉素 ;88 9j:;的高糖 dv。 以 83 kc胰酶消化传代数次， 使其满足实验所需的 2中国药理学通报r % 氟尿嘧啶， ( 组注射 )* 09:9 52 /;氟尿嘧啶 病理染色观察， 评价移 植瘤坏死的程度和范围。按切片内肿瘤组织坏死面 积占切片内癌组织面积的百分比分成四个等级， ) )/? 为 （ c 处 理， 按 c8#( 试剂盒说明操作。 结果判定： defc 阳性反应为黄色到棕褐色， 定 位于胞浆， 亦可见于胞膜。染色结果综合染色强度 及阳性细胞数量两个方面， 进行半定量分析。分别 评为 *;+ 分。染色强度： 阴性 （* 分） ； 染色弱但明显 高于阴性对照 （2 分） ； 染色清晰 （) 分） ； 染色强 （+ 分） 。阳性细胞数)2*?（* 分） ； 22? . )/?（2 分） ； )g? ./*? （) 分） ； ./*? （+ 分） 。根据两项 指标相加分数划分为四级： * . 2 分为 “ 5 ” ； ) 分为 “ ab9c d9eab78 15; ab9c 6c9=4 )54)2)95 c17 （0fgh）)5 4c77 6c9ai8 （“ t #， $ 72*） ulhnv wx$i9ko hj #p 9 wx$i9ko hj yn0hl zh%n0ko 00+ yn0hl 9lhyx dixd 活性及 9: 的测定结果 % .;!? * 所 示。 !“# =2(66“-* -/ “9:; “+0*-“65-3(+“652? （*77 : ） )35“1“5? )*. 9: 3-*3(*52)5“-* “* 5( 50+-2 -/ 52( #2-0=6 （# a $， % 127） b=cde “%(=# 是非必须氨基酸， 目前， 关于 “;(=# 在肿 瘤治疗中的作用已多有报道， u“oo“v 等 *提高荷瘤 大鼠饮食中精氨酸量能抑制大鼠体内肝细胞瘤的生 长而不出现恶病质。有学者发现， 伴恶病质的头颈 部肿瘤病人， 围手术期提供富含精氨酸的营养， 病人 营养状况及免疫功能虽未明显改善， 但病人生存期 明显延长 $。-=“ggnmwnm 等0的研究显示， 在接受 /8!cc1da 0$ ef1e gh -$c3f272f7(103 2 ?fb( 30i7 1(7102b( j3/kl) 133 30 m 2c 0d701 2v0e 0 1(1$ 7 m 7i d? cc1d 2c -$56 (e !$ !78 2 d? ?fb( 30i7 1(7102b( b2e3 0 fe b01 (e adfeh d? b1?(0ab ad(g30a?e d? ?fb( 30i7 1(7102b( b2e3 0 fe b01 u0d? js$/kl) 133 (e 8(i 27b(3 a(30， -$56， -$56 * !$!78 gh 0d7(%70d2(3 0b1d02 dfb27 a0 u(a b(af7e 172d01 e87 (e 7(8 u7 2ga7ie gh d? b0172a12%b0ad7h bd?2e (e 1?b01(3 123270bd7h u7 %7c27be d2 ed7b0 d? v%7aa02 (e