甘薯渣酒精发酵条件优化.pdf

2 0 1 1年 3月 M a r 2 01 1 化学工业与工程 CHEM I CAL I NDUS TRY AND ENGI NEERI NG 第 2 8卷第 2期 Vo l _ 28 No 2 文章编 号 ： 1 0 0 49 5 3 3 ( 2 0 1 1 ) 0 20 0 4 90 6 甘薯渣酒精发酵条件优化 岳 昌海 ， 朱许 慧 ， 侯文贵 ， 李凭力 ( 1 天津大学化工学 院 ， 天津 3 0 0 0 7 2 ； 2 天津 市膜 科学 与海水淡化技术重点实验室 ， 天津 3 0 0 0 7 2 3 天 大天 久 科 技 股 份 有 限公 司 ， 天 津 3 0 0 0 7 2) 摘 要 ： 采 用正 交试验 方 法 ， 进行 甘薯 渣 生料发 酵 生产 乙醇 的研 究。对发 酵 的 5个影 响 因素 ： 发 酵 p H 值 、 水料 比 ( 质 量 比 ， 下 同) 、 发 酵 时间 、 发 酵温度 以及 酒 曲添加 量进 行探 讨 ， 确 定 影 响发 酵效 果 的主 次因素顺序以及可能的最适宜发酵条件。在正交试验基础上进一步进行单 因素试验 ， 得 出最适宜 发 酵条件 为 ： 发 酵 p H值取 原料 的 自然 p H值 ， 水料 比取 2 4 ， 发 酵 时 间取 1 8 0 h ， 发 酵 温度取 3 3 ， 酒 曲添加 量取 0 9 。 最适 宜反 应 条件 下 乙醇收 率为 8 8 2 。 关键 词 ： 甘薯 渣 ； 生料 ； 发 酵 ； 乙醇 中图分类 号 ： T Q 0 9 文 献标 志码 ： A Op t i mi z a t i o n o f Fe r m e n t a t i o n Co nd i t i o n s f o r Ra w S t a r c h Re s i d u e o f Po t a t o e s YUE Ch a n g h a i 。 ， ZHU Xu h u i ，HOU W e n g u i ，LI P i ng l i ( 1 S c h o o l o f C h e m i c a l E n g i n e e r i n g a n d T e c h n o l o g y ， T i a n j i n U n i v e r s i t y ， T i a n j i n 3 0 0 0 7 2 ， C h i n a ； 2 T i a n j i n K e y L a b o r a t o r y o f Me m b r a n e S c i e n c e a n d D e s a l i n a t i o n T e c h n o l o gy ，T i a n j i n U n i v e r s i t y ， T i a n j i n 3 0 0 0 7 2， C h i n a 3 T i a n j i n U n i v T e c h C o L t d ， T i a n j i n 3 0 0 0 7 2， C h i n a ) Abs t r a c t： T he i n flu e n c i ng f a c t o r s o f f e r me n t a t i o n p r o c e s s us i ng t h e un c o o k e d s t a r c h r e s i d u e o f s we e t p o t a t o e s we r e i n v e s t i g a t e l t h r o u g h o r t h o g o n a l e x p e r i me n t s Th e ma g n i t u de o f f a c t o r s we r e i n a n o r d e r o f p H，f e r me n t a t i o n t e mp e r a t u r e ，t i me， t h e r a t i o o f wa t e r t o ma t e r i a l ，a n d t h e a mo u n t o f Ko j i A n d t h e b e s t f e r me nt a t i o n c o n d i t i o n i s：f e r me n t a t i o n p H i s t h e n a t u r a l p H o f t h e r a w ma t e r i a l ，t e mpe r a t u r e i s 3 3 。 f e r me n t a t i o n t i me i s t 8 0 hr a t i o o f w a t e r t o s t u ff i s 2 4 a n d t h e a mo u n t o f Ko j i i s 0 9 Un d e r t h e s e c o n d i t i o n s，a l c o h o l y i e l d c a n r e a c h 8 8 2 。 Ke y wor ds ： s t a r c h r e s i d u e o f s we e t p o t a t o；u nc o o k e d ma t e r i a l ；f e r me n t a t i o n ；a l c o h o l 传 统 乙醇发 酵 工艺采 用粮 食 高温蒸 煮 然后 发酵 的方式 ， 不仅耗费大量能源 ， 而且稀酸和高温对设备 损 坏极 大 ， 副 产 物 较 多 。 。现 阶段 生 产 乙醇 的 原 料 主要 是粮食 ， 近 些 年 粮 食 价格 上 涨 等 其 它 因素 导 致 高 乙醇成本 。再加上 国家节 能减 排 以及 非 粮食 酒 精政 策 的 出台 ， 使 粮 食 酒 精 受 到 很 大 限制 。许 多研 究 者正 在 寻找可 替代 的发 酵原 料 ， 如秸 秆 、 木 材或 生 产 中的某些 副产 品 等。 近 年来 ， 生 淀粉 乙醇 发 酵工 艺在国内外受到 了高度 重视 ， 我国对生料酿酒 的研 究 2 0世 纪 9 0年 代 进 入 快 速 发展 期 ， 许 多学 者利 用 各 种 生 物 酶 制 剂 对 生 料 发 酵 进 行 了研 究 “ 。甘薯 渣是 甘薯 提 取 淀 粉 后 的 副产 品 ， 在 许 收稿 日期 ： 2 0 1 0一i 21 5 作者简介 ： 岳 昌海 ( 1 9 8 7一) ， 男 ， 河南信阳人 ， 硕 士研究 生， 研究方 向： 生物质及糠 醛生产 。 联系人 ： 李凭力 ，E ma i l ： l i p i n g l i t j u e d u C B 。 5 0 化学工业与工程 2 0 1 1年 3月 多加 工 厂 中 堆 积 如 山 ， 酸 化 腐 败 ， 造 成 环 境 污 染 。 而且 粉渣 中蛋 白质含量 很低 ， 纤维 素含量 较高 ， 也不 适合 做饲料 使用 。本 研 究 以甘薯 渣 为 原料 ， 生 料 发 酵生产乙醇。这不仅能克服传统发酵生产乙醇高能 耗 的缺点 ， 而且 就原 料 的取 材 符合 国家 的 非粮 乙醇 政 策。 1 试验部分 1 1 主要 仪器及 药品 甘薯渣 ， 产 于河 北 行 唐 县 ， 湿 甘 薯 渣 含 水 分 约 8 3 2 ， 干燥 后原料 含淀粉 约 4 8 左 右 ， 偏 酸 性 ， p H 值在 6 5 7 0之间 ； 生料酒 曲 ， 可 用于 生料酿 酒 ， 湖 南 中南食 品科 学研 究 院生产 ； 活 性干 酵母 ， 酿酒用 耐 高温 型 ， 湖北 安 琪 股 份 有 限公 司生 产 ； 耐 高 温 o t 一 淀 粉酶 ( 液 化 酶 ) ， L i q u o z y m e S C， 液 态 酶 ， 活 力 7 1 9 9 I u， 诺 维信 ( 中国 ) 生 物技 术 有 限公 司 生产 ； 糖 化 酶 ， S u h o n g G A 4 7 5 ， 液 态 酶 ， 活力 2 0 0 0 I U， 中外 合 资 苏 州宏 达制酶有 限公 司生 产 ； 纤 维素 酶 ， 固态 粉末 状 ， 活力 1 6 6 7 0 I U， 北 京 百 灵 威 科 技 有 限公 司生 产 ； 葡 萄糖 ， 分析纯 ； 乙醇 ， 分析 纯 ； 硫 酸 ， 分析 纯 。 U V - 7 2 2分 光 光 度 计 ( 上 海 第 三 分 析 仪 器 厂 ) ； 6 6 8型真 空干燥 箱 ( 江 苏 省 东 台县 电器 厂 ) ； 9 7 9 0 高效气相色谱 ( 温岭福立分析仪器有限公司) ； P H S 一 2 5型数字 酸度计 ( 上 海 精 科 ) ； L D 5 2 A型 低 速 离心 机 ( 北京 医用离 心机 厂 ) 。 1 2试 验方 法 1 2 1 正 交试 验设计 采 用正交 试验设 计 ， 研 究 发 酵条 件例 如 p H 值 、 发酵温 度 、 发酵 时 间等 对 甘薯 渣 无 蒸 煮一 步 发 酵生 产 乙醇的影 响 ， 并选 定最适 宜 因素水平 配 比组 合 。 在 甘薯渣无 蒸 煮 一 步发 酵 过程 中 ， 原 料 中水 分 含 量直接 影响 物料 的浸润程 度 。而且酵 母 乙醇发酵 过 程是 典型 的产物 抑 制 ， 水量 的多 少 可 以影 响 抑制 程 度 的大小 。因此要 确定原 料 的含水量 。对 于酶及 酵母等具有生物活性的物质 ， 要保证其最大活性 ， 必 须选 择最适 宜 p H 值 和 最适 宜 温 度 ， 因此 发 酵 料 的 p H值及发 酵 时温 度也 是 影 响发 酵 的重 要 因素 。最 后 ， 发酵时间的长短直接影 响着酶对底物的作用效 果 以及酵母 消耗 酶解 产 物 并 发酵 成 乙醇 的过 程 ， 故 也 将发 酵时间作 为一 个 因素考虑 在 内。 因此 ， 选择温度、 p H值、 发酵时间、 含水量 以及 酒 曲量 5个 影 响因素 ， 可 以有 效得 出试验 规律 ， 为实 现生 料发 酵产 乙醇 、 提 高产率 提供依 据 。 基于 生料发 酵 现有 的条 件 ， 根 据 生 物 酶活 性 的 最适 宜条件 和酵母 生 长 的最 适 宜 环境 ， 各 因素 选取 4个 水平 ， 如表 l所示 。 表 1 因素 与 水 平 表 Tab l e 1 Va l u e s o f f a c t o r a n d l e v e l us e d i n or t h og o n a l d e s i g n A： p H值 ； B： 发酵 时间 h ； C ： 发 酵温度 C； D： 水料 比； E： 酒 曲含 量 本试 验考察 5个 因素 ， 各 因素 均取 4个水 平 ， 由 于各个 因素之 间没 有交互 作用 ， 因此 可使用 L ( 4 ) 正交表 。 1 2 2单因素试 验 正交 试验 得 出 的最适 宜 配 比需 要 进 一 步验 证 。 固定发酵的 4个影响因素， 改变另 1个因素， 考察此 因素 的不 同水平 对 试验 结 果 的影 响 ， 并 得 出各 因素 的最适 宜值 。 将 干燥过 的甘薯 渣捣 碎 后 与适 量 的 4 0蒸 馏 水 混匀 ， 加入适 量生 料酒 曲 ， 混匀 ， 密封 于 5 0 0 mL广 口瓶 中 ， 放入恒 温箱 中 ， 在特 定温度 下进行 发酵 。观 察 发酵料 的颜 色变化 和封 口薄膜 的鼓起 情况 。在酵 母发酵过程中产生一部分 C O ， 会使薄膜鼓起 ， 从鼓 起 程度可 以判 断发酵 程度 。同时瓶 中的发酵料 会 由 灰 色变 为啤酒 黄色 ， 而且块 料变松 散 。 1 3分 析方法 1 3 1 乙醇浓度 的测定 在生料甘薯渣发酵试验中， 乙醇含量的分析方 法如下 ： 将发酵 醪放 入蒸馏 锅 中蒸 馏 ， 通 过蒸 汽带走 发酵醪中的乙醇 ， 并经冷却， 收集 ， 得到 乙醇和水 的 冷凝液。利用酒精计或气相色谱测定溶液中乙醇含 量 。 1 3 2 乙醇理论 产率 的计算 酵母 发酵淀 粉 产生 乙醇 的过 程 分 两 步 ： 淀粉 水 解成 糖 ； 葡萄糖 经 酵 母 发酵 生 成 乙醇 和 C O ： 。反 应 式 如下 ： ( C 6 Hl o 0 5 ) +n H2 O n C 6 Hl 2 0 6 1 6 2 1 8 】 8 0 第 2 8卷第 2期 岳 昌海 等 ： 甘薯渣酒精发酵条件优化 5 1 C6 Hl 2 06 2C 2 H5 OH + 2C02 l 8 O 2 4 6 24 4 1 g淀 粉 理 论 上 生 产 乙 醇 量 为 ： 24 6 1 6 2= 0 5 6 7 9 g ， 则 l g干 料 理 论 上 产 生 乙 醇 量 为 ： 1 48 0 5 6 7 9=0 2 7 2 g。 1 3 3 p H 值测 定 用蒸 馏水 清洗 发酵 料 ， 滤纸 过滤 ， 得 到清 液将其 定容 ， 用 P H S 一 2 5型数 字 酸度计 测定 。 1 3 4原料 水 分的 测定 用 电子 天 平 称 取 51 0 g原 料 ， 放 人 烘 箱 ， 在 I 1 0 下烘 6 7 h ( 以达 到恒 重 为准 ) ， 取 出 ， 置 于干 燥 器 内冷却 3 0 m i n后 ， 称重 。 2结果与讨论 2 1 正交试 验 结果 与讨 论 甘 薯渣 生料 发酵 生产 乙醇正 交 试 验结 果 如 表 2 所示 。 由表 2中 的极 差 R可 知 ， 影 响 乙醇 产 率 的主 次 因素顺序为： 发酵 p H值 水料 比 发酵时间 发 酵 温度 曲量 。 根据表 2计算得到的 K 值可绘 出 A、 、 c、 D和 E 5个 因素对 乙醇 产率 影 响 的趋 势 图如 图 1 所 示 。 从 图 1 可 以看 出 ， 乙 醇 产 率 随 发 酵 p H 值 的增 加而 增加 ， 取原 料 自然 p H 值 时发 酵 结 果 最好 ， 有 必 要进 一步研 究 提 高 p H 对 发 酵 结 果 的 影 响 ； 乙醇 产 锄 6 n 由 髓 锓 表 2试验结果 Ta bl e 2 The r e s ul t s o f e xpe r i me nt s p H值 时间 c水料比 D温度 E曲量 图 1 因素 水 平 趋 势 图 Fi g 1 Tr e nd l i ne s o f f ac t o r l e ve l s 影响 ； 发酵温度适 中， 在 3 5时乙醇产率最大 ， 高于 酵母 菌最适 生 长 温 度 ； 酒 曲 添 加 量 在 1 0 时 乙醇 产 率最 大 ， 当超过 1 0 时 ， 乙醇产 率有 下 降趋 势 。 因 此 得 出 可 能 最 适 宜 发酵 方 案 是 ： A 4 B 3 C 1 D 3 E 3 ， 即： 发酵 p H值 为原料 的 自然 p H值 ， 水 卡 孚 比为 2 ， 发 酵 时 间为 1 9 2 h ， 发 酵 温度 为 3 5 ， 曲量为 原 料 质 量 的 1 O 。在 此 条 件 下 发 酵验 证 。 发 酵结 果 无 水 乙 醇生 成 量 为 0 2 4 g g ， 达理 论 值 的 5 2 化学工业与工程 2 0 1 1年 3月 8 7 8 。在 此基 础 上 做 单 因 素试 验 ， 结 果 列 于 2 2 节 。 2 2单 因素试验 结果 与讨论 在正交 试验基 础上 对每 一个影 响发酵 的 因素进 行 研究 ， 分 别对试 验结 果进行 讨论 。 图 2是 不 同 p H值 对 乙醇产率 的影 响。 。 o 6 0 豳 链 餐 p H 值 图 2不 同 p H 值 对 乙醇 产 率的 影 响 Fi g 2 V a r i at i o n o f et han o l y i e l d und e r pH 从图 2可以看 出， 在 p H值为 6 5和 7 0之间时 乙醇产率可达最大值 。随着 p H值 的降低 ， 氢离子 会 将菌体 细胞膜 内阳 离子 置 换 出来 ， 导 致 细 胞 内物 质 外泄 ， 细胞 死 亡 。所 以随 p H 值 的 降低 乙醇 产 率也 降低 。当 p H 值 超 过 7时 ， 乙醇 产 率 逐 渐 下 降。因为碱性环境改变了菌体的发酵途径 ， 致使 乙 醇 产量减 少 ， 甘 油产 量 增 加 。甘 薯在 加 工 完 生产 淀 粉后本身就略呈酸性 ， 约为 6 5左右 ， 所以选择原料 的 自然 p H值 ， 符合发 酵条件 ， 而且 工艺 更简单 。 对于 生料甘薯 渣 来 说 ， 淀 粉 颗粒 基 本 上是 完 整 而 团聚 的 ， 表 露 出来 的 可 与 酶 结 合 的 活 性 位 点 很 少 ， 因此很难被 淀 粉 酶轻 易 降 解 。如 果淀 粉 经 高 温蒸煮 后 ， 会 因为 分子 间氢 键 的断 裂 而 变得 膨胀 松 散 ， 易 于酶解 的进行 和发酵 。另外 ， 原料 甘薯渣 中 含有 大量 的纤维素 ， 妨碍 了酶 与淀粉 的接触 ， 减缓 了 发酵 速度 。所 以适 当延 长发 酵 时 间 ， 可 以使 降解 酶 有充 分的 时间与淀 粉 颗 粒接 触 并 将其 降 解 ， 有 利 于 酵母 发酵 。图 3给 出 了发 酵 时 问对 乙醇 产 率 的影 响 。 从 图 3可 以 看 出 ， 在 1 8 0 h时 发 酵 效 果 最 好 。 但发酵时间持续过长， 生长杂菌的几率就会变大 ， 有 的细菌 以 乙醇 为营养 碳源 ， 消耗 乙醇并且 产 生酸 ， 致 使发酵后 酸度加 大 、 产 品产 量下 降 。 合适 的加 水 比是 获 得 最 适 宜 的 工 艺 条 件 的前 提。传统 的乙醇工业采取液态发酵 ， 水料 比通常在 3 0以上 ， 这使 后期 的蒸馏 能耗 增 加 ， 而且 造 成 大量 镟 氆 时间 h 图 3发 酵 时 间 对 乙醇 产 率 的 影 响 Fi g 3 I n flue nc e o f f e r m e nt at i o n t i m e o n y i e l d of e t ha no l 的废 水无 法 回收 。如果 水 料 比太 小 ， 水 分 不易 将 干 燥 的物料 充分 浸润 ， 乙醇 产 率就 会 很低 。不 同水 料 比的结果 见 图 4。 bo 链 锓 水科 比 图 4水 料 比 对 乙 醇产 率 的影 响 Fi g 4 I nflue nc e o f wat e r - m a t e r i a l r a t i o o n y i e l d o f e t ha nol 从 图 4中 可以看 出 ， 在水 料 比 2 4时 乙 醇 产率 最大 。水料 比再增 大 ， 不仅 会影 响 乙醇 产率 ， 而且 给 后期 的水处理 带来麻 烦 。 温度是影 响微 生物存 活 的重要 因素 之一 。在发 酵过程 中， 温 度对 乙醇产 率 的影 响很 明显 。因各 种 生物酶 活性 的最适 宜 温度 、 酵母 生 长 的温 度 以 及产 物 的生 成温度 不一 定相 同 ， 所 以需 要 找到 一个 合 适 的温度 使 乙 醇 产 率 最 大 。 温度 是 保 证 酶 活 性 的重要 条件 ， 一 般 随发 酵 温 度 升 高 ， 酶 反 应 速 率 加 快 ， 而且 菌体 细胞 膜 的流 动 性增 大 。 乙醇 发 酵 温度 略高于 酵母正 常生 长温 度 ， 这 有 利 于酶 的活性 处 于 较 高水平 并且 维持 细胞 膜 高 渗透 性 ， 利 于 营养 物 的 进 入 和 乙 醇与 C O 的排 出。所 以在 发 酵试 验 过 程 中 ， 需要调 整温 度 以找 到最佳 条件 使产 品产率最 大 。 第 2 8卷第 2期 岳 昌海等 ： 甘薯渣酒精发酵条件优化 5 3 不 同发酵 温度 对应 的结 果如 图 5 。 O 2 5 O 2 4 = 、 02 3 bD 6 D O 2 2 o-21 镳 0 2 0 凄 0 1 9 0 1 8 0 1 7 2 4 2 6 2 8 3 O 3 2 3 4 3 6 3 8 4 0 4 2 温度 图 5 发酵温度对乙醇产率的影响 曲线 图 Fi g 5 I n flue n c e of f e r m e nt a t i on t e m pe r a t ur e o n y i e l d of e t ha no l 从 图 5中可 以看 出 ， 乙 醇产 率 随 温 度 的升 高 而 升高 ， 在 3 3 q C 时 达最 大 。 当 温度 再 升 高 时 ， 乙醇 产 率 逐渐 下 降 。 因 为 酶 本 身 很 容 易 因 过 热 而 失 去 活 性 ， 使酵母质量下 降， 发酵 能力变差 ， 甚至菌体会过 早 的衰 亡 。较 高 的 温度 不 仅 抑 制 酵 母 发 酵 ， 还 会使 耐 高温 的乳 酸菌 等 细 菌有 可 能快 速 繁 殖 ， 消 耗 葡 萄 糖及 乙醇等 而产 生酸 ， 增加 发 酵醪 酸度 。 一 般来讲 ， 乙醇的形成是菌体代谢的结果， 故菌 体 浓度 越大 ， 产 物 的产 量 就 会 越 高 。酒 曲添 加 量 的 影 响见 图 6。 商 鼗 锓 曲量 图 6 曲量对 乙醇产率的影响 曲线 F i g 6 I n flu e n c e o f a mo u n t o f Ko j i o n y i e l d o f e t h a n o l 从 图 6可知 ， 随着 酒 曲添加 量 的增加 ， 乙醇产 率 增大 ， 但 超过 0 9 后 ， 增加趋 缓甚 至有 降低 的趋 势 ， 可 能原 因有 2个 ： 1 ) 接 种 量过 大 ， 菌 体 浓 度 较 高 时 ， 增加 发酵 醪黏 度 ， 而 且 由于 空 间 条 件 的 限制 、 菌 体 之间 的相 互 作 用 以 及 营 养 物 质 的 相 对 稀 少 等 因 素 ， 致 使 菌 体 繁 殖 较 慢 ， 活 性 降低 甚 至 过 早 衰 亡 ； 2 ) 接种 量过大使菌体大 量消耗原料糖分 ， 从而降低乙醇的产率。因此 ， 在 曲量为 1 0 时产 率最 大 ， 考虑 到 乙醇生产 成本 ， 发 酵 时酒 曲添加 量取 0 9 合适 。 综上 ， 由单 因素试 验得 出 的最 适 宜发 酵条 件为 ： 发酵 p H值为原料的 自然 p H值 ， 发酵时间为 1 8 0 h ， 水 料 比 为 2 4 ， 发 酵 温 度 为 3 3 ， 酒 曲 添 加 量 为 0 9 。并 在此 最适 宜条 件下 做发 酵试 验进 行验 证 。 试 验 结果 如表 3所示 。 表 3最适宜条件 的验 证试 验及其结果 Ta bl e 3 Pr ov i ng t r i al unde r t he be s t c o ndi t i o ns a nd i t s r e s uI t s 项 目 数值 发 酵 p H值 发 酵 时 间 h 发 酵 温度 水 料 比 曲量 生成 乙醇量 ( g g ) 实 际 产率 单 因素试 验 得 出的最 适宜 条件 较正 交试 验得 出 的最 适 宜条件 略 有不 同 。在单 因素 试验得 出的最适 宜条 件 下 ， 发 酵取 得 了更好 的结 果 。 3 结 论 1 ) 影 响 甘 薯 渣 生 料 发 酵 乙 醇 产 率 的 主 次 因素 顺 序 为 ： 发 酵 p H值 水 料 比 发 酵 时 间 发 酵 温 度 曲量 。 2 ) 甘 薯 渣 生 料 发 酵 生 产 乙醇 的 最 适 宜 条 件 组 合为 ： 发 酵 p H 取原 料 的 自然 p H值 ， 发 酵时 问取 1 8 0 h ， 水 料 比取 2 4 ， 发 酵温 度取 3 3 ， 酒 曲添加 量 为 0 9 。 3 ) 在最适宜 条件下 ， 对甘薯 渣进行生料发 酵， 1 g 干料 产 乙醇 0 2 4 0 g ， 达到 理论值 的 8 8 2 。 参 考 文献 ： 1 R O B E R T E P r o c e s s f o r t h e p r o d u c t i o n o f g l u c o s e ： U S ， 3 7 7 0 5 8 9 P 1 9 7 3 1 1 6 2 B R O WN J M， B E MI S W A， MO N R O E F A D e x t r o s e s y r u p ： U S ， 2 4 3 8 0 3 3 P 1 9 4 8 4 1 2 3 WA L L E R S T E I N L ， G R A Y P P P r o d u c t i o n o f d e x t r o s e ： U S ， 2 5 8 3 4 5 1 P 1 9 5 2 1 2 2 啪 一 5 4 化学工业与工程 2 0 1 1年 3月 4 5 6 7 8 9 1 O I 1 1 2 1 3 H A R T I G H P S u g a r s d e r i v e d f r o m s t a r c h J F o o d Te c hn o l Au s t ， 1 9 5 7， 9： 7 3 8 3 HONS CH W M P r e l i mi n a r y wo r k f o r t h e m a n u f a c t u r e o f w h e a t s t a r c h g l u c o s e J S t a r c h S t a r k e ， 1 9 5 7 ， 9( 3) ： 45 4 7 方靖 ， 方善康无酵母生淀粉酒精发 酵的研究 J 食品与发酵工业 ， 1 9 9 2 ， 1 ( 5 ) ： 71 2 谢舜珍 ， 严 自正 ， 张 树政生淀粉酶产 生菌的分 离和 筛选 J 微生物学通报 ， 1 9 9 2 ， 1 9 ( 3 ) ： 2 6 7 2 7 0 F L ORP Q，HAYAS HI DA S P r o d u c t i o n a n d c h a r a c t e r i s t i c s o f r a w s t a r c h d i g e s t i n g g l uc o a my l a s e f r o m a pr o t e a s e - n e g a t i v e g l y c o s i d a s e n e g a t i v e As p e r g i i l u s a w a m o r i v a r k a w a c h i m u t a n t J A p p l E n v i r o n Mi c r o bi o l ， 1 9 83， 45： 9 0591 2 黄平 生料 酿酒 技 术 M 北 京 ： 轻 工 业 出 版社 ， 2 00l 贾树彪 ， 李盛 贤 ， 吴 国锋 新 编 乙醇工 艺学 M 北 京 ： 化 学 工 业 出 版 社 ， 2 0 0 4 方 善康 ， 朱明 田 无蒸煮生淀粉酒精 发酵研究 J 食 品 与 发 酵工 业 ， 1 9 8 8， 2 ( 3 )： 1 31 9 GYAMERAH M GLOVER J Et ha n o l b y c o n t i n uo us f e r me n t a t i o n u s i ng a c o mbi n a t i o n o f i mmo bi l i z e d y e a s t a n d s o l v e n t e x t r a c t i o n f J A d v a n c e s i n F e r me n t a t i o n 1 9 8 3， 4：2 0 32 1 0 P YE E K， HUMPHREY A ETh e Bi o l o g i c a l Pr o d uc t i o n o f L i q u i d F u e l s f r o m B i o ma s s E BO L U n i v P e n n ， I nt e r i m Re po r t t o US DOE 1 97 9- 01 o1 1 4 J A R Z E B S K I A B ，M A L I N O WS K I J J ，G O MA J Mo d e l l i ng o f e t h a n o l f e r me nt a t i o n a t h i g h y e a s t c o n c e n t r a t i o n s J B i o t e c h n o l B i o e n g ， 1 9 8 9 ， 3 4( 9) ： 1 22 51 2 3 0 1 5 S T A R Z A K M， K R Z Y S T E K L M a c r o a p p r o a c h k i n e t i c s o f e t h a n o l f e r me n t a t i o n b y S a c c h a r 0 my c es c e r e v