利用淀粉糖作碳源培养法夫酵母生产虾青素的研究.pdf

第9 卷第l 期 2009 年2 月 中国食品学报 J o u r n a lo fC h i n e s eI n s t i t u t e o fF o o dS c i e n c ea n dT e c h n o l o g y V 0 1 9N o 1 F e b 2009 利用淀粉糖作碳源培养法夫酵母生产虾青素的研究 倪辉1 ，3肖安风1 , 3 李利君- 吴光斌1翁惠芬1 何国庆2 蔡慧农i苏文金1 , 3 ( 1 集美大学生物工程学院厦门3 6 1 0 2 12 浙江大学生物系统工程与食品学院杭州3 1 0 0 2 9 3 厦门市食品工程中心厦门3 6 1 0 2 1 ) 摘耍 为选择一种适合法夫酵母发酵虾青素的工业碳源，分别以麦芽糖浆、果葡糖浆、标准糖浆3 种淀粉糖为 碳源做发酵试验。试验结果表明。以麦芽糖浆、果萄糖浆和标准糖浆为碳源摇瓶培养法夫酵母，虾青素的体积产 率及细胞产率问没有显著差异；分则以3 种淀粉糖为碳源在2 0 L 机械搅拌罐中补料分批培养法夫酵母的发 酵规律相似。但以标准糖浆为碳源的虾青素细胞产率和虾青素得率高于其它2 种淀粉糖，分别达到O 3 8r a g 虾 青素，g 干酵母和0 2 5 m g 虾青素，g 葡萄糖；以标准糖浆为碳源，在7 5 L 机械搅拌罐中补料分批培养法夫酵母的 发酵规律与2 0 L 罐的发酵规律一致，但虾青素的细胞产串为O 3 3m 以干茵体。略低于2 0 L 罐的细胞产率；虾 青素的得率为0 3 4 m g L ，略高于2 0 L 罐的虾青素得率。 关键词法夫酵母虾青素淀粉糖碳源工业发酵 文章编号1 0 0 9 7 8 4 8 ( 2 0 0 9 ) 0 1 - 0 0 2 9 - 0 6 虾青素( A s t a x a n t h i n ) 是一种具有重要商业价 值的含氧类胡萝卜素【l - 3 1 。利用法夫酵母发酵虾青 素被认为是最具产业化前景的天然虾青素生产方 法1 4 1 。碳源是重要的发酵原料。它不仅关系到培养 基成本，还对产物的得率具有重要影响【习。虽然目 前已有法夫酵母发酵虾青素碳源的研究报道【6 删 但这些研究均未考虑到使用成本及其来源是否稳 定等因素，无法用于工业化发酵生产。 淀粉水解糖是我国发酵工业常用的一种碳 源，它具有原料来源稳定，价格低廉等优点。目前， 大宗的商品淀粉水解糖主要有麦芽糖浆、果葡糖 浆和标准糖浆3 种。由于制备工艺不同这3 种淀 粉糖的成分差别较大，导致不同的发酵结果嘲。因 此若采用淀粉糖为碳源发酵生产虾青素。就必须 研究不同淀粉糖对法夫酵母产虾青素的影响。这 不仅有利于找到一种适于产业化培养法夫酵母的 碳源，而且拓宽了淀粉的应用领域具有重要的应 用价值。本文对比研究3 种玉米淀粉糖( 麦芽糖 收稿日期：2 0 0 8 - 0 2 2 7 基金项目：福建省科技计划重点项目( 2 0 0 6 H 0 0 3 3 ) ；福建 省青年人才创新基金项目( 2 0 0 5 2 0 3 5 ) 作者简介：倪辉，男，1 9 7 3 年出生。博士 通讯作者：苏文金 浆、果葡糖浆和标准糖浆) 培养法夫酵母产虾青素 的差异，为选择合适的工业发酵碳源，利用法夫酵 母发酵生产虾青素提供基础数据。 1 材料与方法 1 1 材料与仪器 1 1 1 试验菌株法夫酵母p s t l 株( 确够口 r h o d o z y m ap s t 一1 ) ，本实验室保藏菌种。 1 1 2 培养基 斜面菌种培养基：4 。B x 麦汁培养基。 种子培养基：葡萄糖2 0g L ，硫酸铵5s L ， 磷酸二氢钾1g L ，M g S 0 4 7 H 2 00 5g L ，C a C l 2 H 2 0 0 1g L ，酵母膏3g ，L ，p H6 0 。 发酵基础培养基：葡萄糖3 5g L ( 在试验中 用相同质量的淀粉糖代替) ，硫酸铵5g L ，磷酸二 氢钾lg ，L ，M g S 0 4 7 H 2 0O 5s L ，C a C l 2 H 2 00 1 s L ，酵母膏3g L ，p H6 0 。 1 1 3 原料及药品虾青素标准样品。购自S i g m a 试剂公司；甲醇( 色谱纯) ，美国天地公司产品；葡 萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁、无水氯化钙、无水 亚硫酸钠、苯酚、氨水、氢氧化钠、酒石酸钾钠、丙 酮、3 ，5 一二硝基水杨酸等药品( 分析纯) ；二甲亚砜 ( 化学纯) 。 万方数据 中国食品学报 2 0 0 9 年第1 期 用酶水解玉米淀粉制备的麦芽糖浆购自漳州 闽成玉米开发有限公司。其固形物含量7 6 。麦芽 糖含量占总干物质的5 4 ，D E 值为5 3 。用酶水解 玉米淀粉制备的果葡糖浆购自漳州闽成玉米开发 有限公司。其固形物含量8 0 ，葡萄糖与果糖占干 物质的9 2 。标准糖浆购自厦门糖果厂其固形物 含量8 6 ，D E 值为4 1 5 。 1 1 4 主要仪器恒温培养振荡器Z H W Y 一2 1 0 2 上海智城分析仪器制造有限公司：C L 一3 2 L 高压灭 菌锅( A L P ) 、T D L 枷B 普通台式离心机。上海安 亭科学仪器厂制造；5 4 1 5 D 高速离心机( E p p e n d o r f ) 、1 0 1 3 B 型电热鼓风干热箱。上海市实验仪器总 厂；2 0L 机械搅拌发酵罐，镇江东方生物工程设备 技术公司；7 5L 机械搅拌发酵罐，镇江东方生物工 程设备技术公司；U V 一2 6 0 0 型紫外一可见分光光度 计，尤尼柯上海仪器有限公司：1 5 2 5 型高效液相 色谱仪。美国W a t e r $ 公司；F A l 0 0 4 型电子天平 上海精科天平。 1 2 试验方法 1 2 1种子的制备挑取斜面菌种2 环于装有 3 0m L4 0 B x 麦汁的2 5 0m L 摇瓶中在摇床中2 2 o C 、1 5 0r r a i n 培养2d ，取2 0 0 斗L 新鲜培养液转接 到新配制的种子培养基中( 2 5 0m L 三角瓶中装3 0 m L ) 。培养温度2 2 。1 5 0r m i n 培养4 8h 。 1 2 2 摇瓶发酵试验分别以麦芽糖浆、果葡糖 浆、标准糖浆3 种不同的淀粉糖为碳源。以相同的 含碳量配制培养基。每个2 5 0m L 的摇瓶中装入培 养基3 0m L ，灭菌冷却后接入1 0 0 斗L 新培养的法 夫酵母种子。在摇床中2 2o C 、1 5 0r m i n 培养5d 。 取样分析生物量、虾青素的体积产率，计算虾青素 的细胞产率，每个处理做5 个平行试验，取平均 值。 1 2 32 0L 罐发酵试验分别以麦芽糖浆、果葡 糖浆、标准糖浆3 种淀粉糖为碳源。以相同的含碳 量配制培养基1 2L 。接种新培养的种子3 0 0m L 。 控制发酵温度2 2 、p H4 0 、通气量5L m i n 、溶氧 6 0 。发酵约6 0 h 后( 当糖消耗至2 9 ，L 以下时) 开 始间歇式补料，每次补充3 0 的糖液1 0 0m L ，总 补料量5 0 0 m L ，总发酵时间9 3h ，每隔8h 取样1 次，测定残糖浓度、生物量、虾青素体积产率。计算 虾青素细胞产率、虾青素得率等参数。在试验过程 中由于酵母生长的差异。补料的时间略有不同，具 体如下： 以麦芽糖浆为碳源的实际补料时间分别是 6 8 、7 2 ，8 0 、8 8 、9 1h D 以果葡糖浆为碳源的实际补料时间分别是 6 8 、7 2 、8 0 、8 4 、8 8h 。 以标准糖浆为碳源的实际补料时间分别是 6 8 、7 2 、7 678 4 、9 2h o 1 2 47 5L 罐发酵试验取新培养的摇瓶种子 3 0 0m L 。火焰保护接种至装有1 2L 发酵培养基的 2 0L 发酵罐中。控制发酵温度2 2 ，通气量2 5 1 m i n ，搅拌转速2 5 0r m i n ，自然p H 培养2d 后移 种至装有6 0 L 培养基的7 5L 罐中控制发酵温 度2 2o C 、p H4 0 、通气量1 5m 3 h 、溶氧6 0 。发酵 约6 0h 后( 当糖消耗至2g L 以下时) 开始间歇式 补料，每次补充3 0 的糖液5 0 0m L ，总补料量2 5 L ，设计的总发酵时间9 3h 。在试验过程中。由于实 际耗糖速度比理论值慢。因此实际总发酵时间延 长为1 0 8h 。实际补料时间调整为7 l 、7 9 、8 4 、9 3 、 9 5h 。每隔8h 取样1 次，测定残糖、生物量、虾青 素体积产率计算虾青素细胞产率、虾青素得率等 参数。 1 2 5 发酵工艺条件的控制 发酵温度：用冷热水反馈自动控制，当发酵 温度低于设定温度时控制器发出指令打开热水 的电磁阀；当温度高于设定的温度时，控制器发出 指令打开冷水的电磁阀。 p H 值：用自动反馈流加酸碱法控制，当发 酵p H 低于设定p H 时。控制器发出指令打开碱 泵；当p H 高于设定p H 时，控制器发出指令打开 酸泵。 溶氧：与搅拌转速联动控制，当溶氧低于设 定值时，控制器发出指令增大搅拌电机的转速；当 溶氧高于设定值时，控制器发出指令减小搅拌电 机的转速。 补料：根据溶氧的变化补料，当发酵液中糖 的含量降至接近零时，生长速率降低，呼吸减弱， 氧的消耗速率降低，溶氧上升，此时若补充一定量 的糖液，则氧的消耗增加，溶氧降低；当补充的糖 液被消耗完后，溶氧上升。根据这个规律，在发酵 至6 5h 后( 糖降至2s L 左右) 进行间歇补料。当 万方数据 第9 卷第1 期 利用淀粉糖作碳源培养法夫酵母生产虾青素的研究 3 1 补料后溶氧重新上升到6 5 以上时再次补料。 1 2 6 测定方法用3 。5 一二硝基水杨酸比色法 测定发酵液中的糖类物质【1 q ；用于重法测定生物 量【“1 ；用二甲亚砜法提取虾青素；用液相色谱法 测定虾青素【1 l l 。 2 试验结果 2 1淀粉糖对摇瓶培养法夫酵母的影响 分别以3 种玉米淀粉糖( 麦芽糖浆、果葡糖 浆、标准糖浆) 为碳源，配制培养基，摇瓶培养法夫 酵母，考察在这些碳源条件下，法夫酵母生长及虾 青素合成的差异，试验结果如表l 所示。 衰1用淀粉糖为碳源摇瓶培养法夫酵母的试验结果 T a b l e1R e s u l t so fc u l t i v a t i o nJ P 7 l 够口r h o d o z y m a i ns h a k e f l a s kb yu s i n gs t a r c hs y r u pa 8c a r b o n $ o u l c e 注：数值上标的不同字母表示5 显著水平上的不同数值。 由表1 可知以3 种淀粉糖浆为碳源培养法 夫酵母的生物量并不完全相同，其中用麦芽糖浆 为碳源培养法夫酵母的生物量高于用标准糖浆为 碳源的生物量。以3 种淀粉糖为碳源培养法夫酵 母所得的虾青素体积产率约为1 9 4m g L 。无显著 差异；虾青素的细胞产率约为0 4 2 ，无显著差异。 2 2 淀粉糖对补料分批培养法夫酵母的影响 培养法夫酵母的主要目的是获取虾青素。表 l 结果表明，用3 种淀粉糖摇瓶培养法夫酵母。虾 青素总产量( 体积产率) 没有显著差异。虾青素是 法夫酵母的胞内次级产物，补料发酵技术是提高 胞内次级代谢产物发酵产量的常用方法嘲。为了进 一步比较以3 种淀粉糖为碳源培养法夫酵母产虾 青素的差异，在2 0L 罐中分别用这3 种淀粉糖做 补料发酵试验。3 种碳源条件下的残糖、生物量、 虾青素的体积产率、虾青素细胞产率及虾青素得 率随发酵时间变化的比较曲线分别见图1 、图2 、 图3 、图4 和图5 。 由图1 可知，用3 种淀粉糖为碳源补料分批 培养法夫酵母，糖消耗的规律基本相同。即8h 后 糖浓度迅速下降；6 4h 后初糖基本消耗完全补加 的糖也迅速被消耗，发酵液中糖质量浓度维持在 2g L 左右。 3 0 0 0 2 5 0 0 ；2 0 J D o 攀 舞1 5 0 0 嚣 镁1 0 0 0 5 0 0 0 O 81 6 2 4 3 24 0 4 85 66 47 28 08 89 6 培养时间h 圈13 种淀粉糖2 0 L 罐培养法夫酵母的 残糖变化曲线 F i g 1 R e s i d u es u g a rc u r v eo ff e db a t c hc u l t u r e 西够口r h o d o z y m ai n2 0 Lf e r m e n t e rb yu s i n gt l l r s t a r c hs y r u p 船c a r b o n $ o u r c e 。 由图2 可知，用3 种淀粉糖为碳源培养法夫 酵母。生物量随时间的变化规律基本相同。在接种 后1 2h 左右生物量开始增加。随着发酵时间的延 长及不断地补料，生物量不断增加，至发酵结束 时，用麦芽糖浆、果葡糖浆、标准糖浆为碳源培养 法夫酵母。所得最大生物量分别为1 9 0 0 、1 6 5 8 、 1 3 9 0 9 L 。 由图3 可知用3 种淀粉糖为碳源培养法夫 酵母。虽然开始时虾青素快速合成的时间略有不 同。但3 条曲线所显示的虾青素体积产率随时间 的变化趋势极为相似。即使在初糖快速消耗的对 数生长期，虾青素的体积产率也会迅速增加，并且 在补料过程中，虾青素的体积产率不断提高。至发 酵结束时，用3 种淀粉糖为碳源培养法夫酵母所得 虾青素的最大体积产率分别为5 0 6 、5 1 6 、5 4 6m g L 。 万方数据 3 2 中国食品学报 2 0 0 9 年第l 期 j b 棚 霹 矧 0 81 62 4 3 24 0 镐5 66 47 28 08 89 6 培养时阈m 图2 不同碳源对法夫酵母的生物量的影响 F i g 2 E f f e c to fd i f f e r e n tc a r b o n $ o u r c eO i lb i o m a s s o f 确锄钇r h o d o z y m a 6 舶 5 0 0 k4 0 0 茬3 0 0 聪 蛙2 0 0 1 O 舶 081 62 4 3 2 4 0 4 8 5 6 6 47 2 8 89 6 培养时问m 图3 不同碳源对虾青素的体积产率的影响 F i g 3 E f f e c to fd i f f e r e n tc a r b o n8 0 u r e eo i la s t a x a n t h i n y i e l di nt e r m so fv o l u m e 由图4 可知，用3 种淀粉糖为碳源培养法夫 酵母，虾青素的细胞产率在对数生长期随着发酵 时间的延长快速增长，而在补料过程中又基本保 持稳定。以标准糖浆为碳源，虾青素细胞产率在 2 0h 后不断增大，至5 6h 时增大至0 3 8m g g 干酵 母；随后开始补糖，细胞产率略有下降后又开始上 升，至发酵结束时上升至0 4m g g 干酵母。以果葡 糖浆为碳源，3 2h 后虾青素的细胞产率快速上升 至4 8h 时增大至0 3 0 m g g 干菌体，此后，略有下 降；6 4h 开始补料，补料后虾青素的细胞产率先下 降后上升，但其值基本稳定在O 3 0m g g 干酵母。 以麦芽糖浆为碳源培养法夫酵母，3 2h 后虾青素 的细胞产率快速上升。6 4h 后其值基本稳定在0 3 4m g g 干酵母左右。 多 篁 静 L 霉 最 081 62 43 2 加4 85 66 47 2 8 89 6 培养时间m 图4 不同碳源对虾青素细胞产率的影响 F i g 4 E f f e c to fd i f f e r e n tc a r b o n8 0 t l r c eo na s t a x a n t h i n y i e l di nt e r m so fb i o m a s s 由图5 可知虽然以3 种淀粉糖为碳源培养 法夫酵母，虾青素得率随着发酵时间的延长及补 料不断上升但在对数生长期的后期，虾青素得率 值明显不同。以标准糖浆为碳源，2 0 5 6 h ，虾青素 得率快速上升；在补料过程中，每次补糖后，其得 率先下降后上升至发酵结束时虾青素得率上升 至0 2 5m g g 葡萄糖。以果葡糖浆为碳源，发酵3 2 h 后虾青素得率快速上升；当初糖消耗尽，开始补 糖，每次补糖。其得率先下降后上升，至发酵结束 时，其得率上升至O 1 8m g g 葡萄糖。以麦芽糖浆 为碳源，发酵3 2h 后虾青素得率开始快速上升； 当初糖消耗尽，开始补糖，每次补糖，其得率缓慢 上升，至发酵结束时，其得率上升至0 1 7m g g 葡 萄糖。 由上述结果可知。用3 种淀粉糖培养法夫酵 母，残糖、生物量、体积产率随时间的变化规律基 本相同，但虾青素得率、细胞产率随时间变化的差 异明显。以标准糖浆为碳源。虾青素得率和细胞产 率均高于另外两种淀粉糖。考虑到培养法夫酵母 的主要目的是为了获取虾青素对于一次参数( 残 糖、生物量、体积产率) ，由于灭菌及其它发酵操作 引起的发酵体积变化无法在同一水平上比较，因 万方数据 第9 卷第1 期利用淀粉糖作碳源培养法夫酵母生产虾青素的研究 3 3 此，可用虾青素得率和细胞产率来表现相互间的 差别。最终确定标准糖浆为3 种大宗淀粉糖中最 适于培养法夫酵母产虾青素的碳源。 O 2 7 O 2 4 O 2 l 1 0 1 8 昏0 1 5 蠢o 1 2 寝0 0 9 O 0 6 O 0 3 O o o 01 22 43 64 86 07 28 49 6 培养时间l I 图53 种淀粉糖对虾青素得率的影响 F i g 5 E f f e c to ft h r e es t a r c hs y r u po na s t a x a n t h i ny i e l d 2 37 5L 罐发酵虾青素的中试 图6 显示以标准糖浆为碳源在7 5L 罐中补 料分批培养法夫酵母的试验结果。培养8h 后，发 酵液中的糖快速消耗。至4 8h 时初糖基本消耗完 全，此后即使补料，补充的糖液迅速被消耗，发酵 液中糖的质量浓度基本维持在2 班的水平；8h 后法夫酵母开始生长2 4 4 8h 为法夫酵母的对数 生长期。4 8 6 5h 生物量基本稳定，6 5h 后随着补 料的进行，生物量不断地增长，至发酵末期( 1 0 3 h ) ，生物量达1 7g L ，高于2 0L 罐中的对应值。虾 青素的体积产率稍滞后于法夫酵母的生长，2 4h 后虾青素的体积产率开始快速增长。4 8h 后虾青 素体积产率的增长速率有所减小。但一直都在缓 慢地增加至发酵结束时。虾青素的体积产率达到 5 5m g L ，与2 0 L 罐中的对应值基本相同。虾青素 的细胞产率从1 2h 开始快速增长6 5h 时达到最 大值( 0 3 8m g g 干菌体) ，此后，随着发酵时间的延 长及补料操作的进行。细胞产率缓慢下降，至发酵 结束时虾青素的细胞产率约0 3 3m g g 。略低于2 0 L 罐的对应值。虾青素得率从1 2h 后开始缓慢增 加，6 5h 后随着补糖操作的进行，虾青素得率呈先 下降后增加的上升趋势至发酵结束时其得率上 升至0 3 4m g g 葡萄糖，大于2 0L 罐的对应值。上 述结果表明7 5L 罐以标准糖浆为碳源培养法夫 酵母糖消耗、生物量、虾青素体积产率随时间的 变化规律与2 0L 罐的结果基本相同，但虾青素细 胞产率、虾青素得率随时间的变化规律与2 0L 罐 略有不同虾青素细胞产率略有降低。而虾青素得 率却高于2 0 L 罐的对应值。 培养时间m 圈6 以标准糖浆为碳源在7 5 L 罐中补料分批培养法 夫酵母的试验结果 F i g 6 R e s u l t so ff e db a t c hc u l t u r e 吊够口r h o d o z y m a i n7 5 Lf e r m e n t e rb yu s i n gs t a n d a r ds y r u p 鹪c a r b o n $ o u r c e 3结论 ( 1 ) 以麦芽糖浆、果葡糖浆和标准糖浆为碳源 摇瓶培养法夫酵母虾青素的体积产率及细胞产 率没有显著差异。 ( 2 ) 以麦芽糖浆、果葡糖浆及标准糖浆为碳源 在2 0L 罐中分批补料培养法夫酵母，其基本发酵 规律相似。但以标准糖浆作为碳源，虾青素细胞产 率和虾青素得率高于其它两种淀粉糖，分别达到 0 3 8m g 虾青素，g 干酵母和0 2 5m g 虾青素儋葡萄 糖。是3 种淀粉糖中最适于法夫酵母发酵虾青素 的碳源。 ( 3 ) 以标准糖浆为碳源，在7 5L 罐中补料分 批培养法夫酵母，其发酵规律与2 0L 罐的发酵规 律基本相似，但虾青素细胞产率为0 3 3m g g 干菌 体，略低于2 0L 罐的水平；虾青素得率为0 3 4m g g 葡萄糖，高于2 0L 罐的发酵水平。 卜1篁静傲氍母卜1粤棚舡舞镁一I1嚣棚霉删 万方数据 中国食品学报 2 0 0 9 年第l 期 1 2 3 4 5 6 7 参考文献 H a n d e l m a nG J r h ee v o l v i n gr o l eo fc a r o t e n o i d si nh u m a nb i o c h e m i s t r y J N u t r i t i o n ，2 0 0 1 。1 7 ( 1 0 ) ：8 1 8 - 8 2 2 J o h n s o nEA A s t a x a n t h i nf r o mm i c r o b i a ls o u r c e s J C f i t i c a lR e v i e w si nB i o t e c h n o l o g y ，1 9 9 1 ，1 1 ( 4 ) ：2 9 7 3 2 6 S e h r o e d e rWA ，J o h n s o nEA S i n g l e to x y g e na n dp r o x yr a d i c a l s r e g u l a t ec a r o t e n o i db i o s y n t h e s i si n 两够or h o d o z y m a 阴JB i o lC h e m ，1 9 9 5 ，2 7 0 ：1 83 7 4 - 1 83 7 9 J o h l l s o n E A 确蛳口r h o d o z y m a ：c o l o r f u lo d y s s e y J I n t e r n a t i o n a lM i c r o b i o l o g y ，2 0 0 3 ，6 ：1 6 9 - 1 7 4 俞俊棠新编生物工艺学( 上册) 【M 】北京；化学工业出版社，2 0 0 3 。 梁新乐，岑沛霖，夏黎明法夫酵母P L X A l l 发酵纤维素酶水解物合成虾青素叨菌物系统。2 0 0 0 ，1 9 ( 4 ) ：5 3 4 5 3 9 朱明军，浦跃武，吴海珍，等不同碳源及其浓度对红发夫酵母培养的影响叨华南理工大学学报( 自然科学版) ， 2 0 0 2 3 0 ( 4 ) ：7 8 8 0 8 孙玉梅，崔迎进，曹芳，等豆腐黄浆水中补加乙醇和葡萄糖发酵虾青素的研究阴中国酿造，2 0 0 1 ，1 6 6 ( 1 ) ：2 4 2 7 9 D o m i g u e zB o c a n e g r aA R ，T o r r e sM u f i o zJ A A s t a x a n t h i nh y p e r p r o d u c t i o nb y 蹋动钇r h o d o z y m a ( n o wX a n t h o p h y U o m y c e s d e n d r o r h o u s ) w i t hr a wc o c o n u tm i l k 鹊s o l es o u r c eo fe n e r g y J A p p lM i c r o b i o lB i o t e c h n o l ，2 0 0 4 ，6 6 ：2 4 9 - 2 5 2 1 0 张龙翔，张庭芳，李令嫒生化实验方法和技术【M 】第2 版北京：高等教育出版社，1 9 9 7 1 1 倪辉法夫酵母虾青素发酵条件的优化及提取与分析研究 D 】杭州：浙江大学农业生物系统工程与食品科学学院， 2 0 0 5 1 2 S e d m a kJJ ，W e e r a s i n g h eDK ，J o l l ySO E x t r a c t i o na n dq u a n t i t a t i o no fa s t a x a n t h i nf r o m 确够Dr h o d o z y m a 翻 B i o t e c h n o lT e c h ，1 9 9 0 ，4 ：1 0 7 1 1 2 S t u d i e so nC u l t i v a t i o no fP h a f f i aR h o d o z y m af o rP r o d u c i n gA s t a x a n t h i nw i t hS t a r c hS y r u p a sC a r b o nS o u r c e N iH u i “3X i a oA n f e n 9 1 3L iL i j u n lW uG u a n g b i n l W e n gH u i f e n lH eG u o q i n 矿C a iH u i n o n 9 1 S uW e n j u n “3 ( 1 & h o o lo fB i o e n g i n e e r i n g ，y i m e iU n i v e r s 妇，X i w n e n3 6 1 0 2 1 2 C o l l e g eo fB i o s y s t e mE n g i n e e r i n ga n dF o o dS c i e n c e 。孤；m gU n i v e r s 畸。H a n g z h o u3 1 0 0 2 9 3 F o o dE n g i n e e r i n gI n s t i t u t eo fX i a m e n ，X i a m e n3 6 1 0 2 1 ) A b s t r a c tC u l t i v a t i o no f 只蛳r u x o z y m ab yu s i n gt h r e es t a r c hs y r u p s c a r b o ns o u r c e 8w e r es t u d i e df o rs e l e c t i o n a n4 n d n s t r i a lc a r b o ns o u r e ef o ra s t a x a n t h i np r o d u c t i o n W h e nt h ey e a s tw 船c u l t u r e di ns h a k e - f l a s k n og r e a td i f f e r e n c e s w e r ed e t e c t e di nt h ea s t a x a n t h i ny i e l di nt e r m so fv o l u m ea n db i o m a s sw i t l lt h eu s eo fm a l t o s es y r u p ，f r u c t o s es y r u p ， a n ds t a n d a r ds y r u p 。r e s p e c t i v e l y W h e nt