苦荞麦麸皮中总黄酮的乙醇提取工艺研究.pdf

9 8 2 0 0 5 , V o 1 2 6 , N o 3 食 晶 雨 I 学 工艺技术 苦荞麦麸皮中总黄酮的乙醇提取工艺研究 曹艳萍 ( 榆林学院化学系，陕西 榆林 7 1 9 0 0 0 ) 摘要 ：对苦荞麦麸皮 f J 总黄酮类物质的乙醇提取工 艺进行了研究。 以芦丁为对照品用吸光光度法，通过 L 9 ( 3 ) 正交试验 ，优选 了工业参数。结果表 明： 对提取效果影响冈素依次为乙醇体积分数提取 时间提取温度 料液 比。最佳提取工艺条件是：体积分数 6 5 乙醇、料液比 1 ： 1 0 、室温( 2 5 3 0 C ) T提取 6 h ，二级提取， 提取得率为 3 2 ，纯度 6 5 。 关键词 ：苦荞 麦麸皮 ；总黄 酮 ；正交试验 ；提取 工 艺 S t u d yo nEx t r a c t i o nT e c h n o l o g yo f To t a l F l a v o n e s i nBi t t e r Bu c k - wh e a t P e e r s CAO Ya n p i n g ( De p a r t me n t o f C h e mi s t r y ， Yu l i n C o l l e g e ， Yu l i n 7 1 9 0 0 0 ， C h i n a ) Ab s t r a c t：Th e e x t r a c t i o n t e c h n o l o g y o f t o t a l f l a v o n e s i n b i t t e r b u c k - wh e a t p e e r s wa s s t u d i e d wi t h e o n al a s e x t r a c t o r Th e b e s t c o n d i t i o n s we r e c h o s e n t h r o u g h L 9 ( 3 ) o r t h o g r a p h i c e x p e r i me n t s b y a d s o r p ti v e p h o t o s p e c t r u m b a s e d o n r u t i n as s t a n d a r d s u b s t a n c e Th e r e s u l ts s h o we dt h efi r s t f a c t o r a ffe c t i nge x t r a c t o r p r o d u c ti v i t yWas v o l u mepe r c e n t a g eo fe tho n a1 Th e s e c o n da n d t h et h i r do n e swt r e e x t r a c ti o nti me a n dt e mpe r a t u r er e s p e c t i v e l y Th eb e s t e x t r a c ti o nc o n d i ti o n s we r eto u S e6 5 e tho n a l as e x l r a c tor wi th the r a t i oo fl ： 1 0i nma s s a t thete mper a t u r eo f 2 5 3 0 C f o r 6 h Th eS eco n d e x t r a c ti o np r o d u c ti v i ty Was 3 2 w i th t h e p u ri ty o f 6 5 Ke y wo r d s ：b i t t e r b u c k wh e a t p e e rs；t o t a l fla v o n e s ；o r t h o g r a p h i c e x pe r i me n t s ；e x tra c tio n t e c h no l o g y 中图分类号：T S 2 0 1 1 文献标识码 ：A 文章编号：1 0 0 2 - 6 6 3 0 ( 2 0 0 5 ) 0 3 0 0 9 8 - 0 3 黄酮类化合物以前主要是指基本母核为苯基的色原 酮的化合物，现在则泛指两个苯环通过中央三碳链相互 联结而成的一系列化合物。天然植物黄酮类物质具有消 炎 、消肿 、降压 、降血脂 ， 以及清 除 自由基等 多种 功能( - s 】 ，其提取物质 已用于食品、药品 、化妆品等 产 品 中 。 黄酮广泛存在于一些植物 中，在槐花米 、荞麦 、 蒲公英 、桑树叶、银杏中含量较 多，对 于其提取研 究 已有许多报道 ，但从苦荞麦麸皮中提取黄酮的研究还未 见报道，本文以定边苦荞麦( F a g o p y r u m T a t a r i c u m G a e r t ) 麸皮为原料，正交试验设计考 察了乙醇体积分数、提 取时间、提取温度和料液比等提取条件对提取量的影 响。确定 了最佳提取工艺条件 ，为本地荞麦 的综合利 用 提 供 了依 据 。 1 材 料 与方 法 1 1 实验材料 原料 苦荞麦麸皮干燥样品，由定边鸿达荞麦加工 厂 提 供 。 试剂 芦丁标准品，由中国药品生物制品检定所提 供 。 l - 2 主要实验仪器 仪器 T u 1 9 0 l 双光束紫外可见分光光度计；7 2 2 紫外可见分光光度计 上海精密仪器有限公司；恒温水 浴锅 上海亚荣生化仪器厂；电子天平 沈阳龙腾电子 有 限 公 司 。 1 3 实验 方法 苦荞麦麸皮一粉碎过6 0目筛一加 6 5 乙醇一室温浸 提一过滤一浓缩一含量测定 1 4 苦荞麦麸皮中总黄酮含量测定 1 4 1 标准 溶液 的制 备和标准 曲线 的绘 制 精确称取 l 0 mg已烘干至恒重的芦丁标样 ，以6 5 乙醇溶液溶解并定容至 5 0 m l 摇匀即得浓度为 0 2 mg m l 标 准 储 备液 。 收稿 日期：2 0 0 4 1 0 0 8 作者简介 ：曹艳萍( 1 9 5 8 一 ) ，女 ，副教授 ，主要从事药物分析 和有机化学研究 。 维普资讯 工艺技术 最 晶 着 i ； 1 2 0 0 5 , V o L 2 6 , N o 3 9 9 取芦丁标准储备液 2 o 0 ml 于 l O n d容量瓶中，以6 5 乙醇溶液定容，用 T u 1 9 0 l 双光束紫外可见分光光度 仪，在 l 9 0 4 0 0 n m范围内以2 n m光谱带宽，0 5 n m采 样间隔进行吸光度扫描，2次扫描重复平均，确定最大 特 征吸收 峰 。 分别移取 O 、0 5 0 、1 O 0 、1 5 0 、2 O 0 、2 5 0 ml 于 l 0 ml 容量瓶中，6 5 乙醇溶液定容，测定最大特征吸 收波长处 的吸光度 。 1 4 2 苦养麦麸皮总黄酮含量测定 取烘至恒重的养麦麸皮粉末 1 0 0 g ，加入 1 0 0 0 ml 体积 分数 6 0 的乙醇 ，室温浸提 6 h，并同时搅拌，过滤， 二 级提取 ，合并滤液减压浓缩 ，真空干燥 ，得棕黄色 固体物 4 5 g 。取干燥的提取物 4 0 mg ，用 6 5 的乙醇 溶 解并定容至 l 0 ml ，取 l ml 稀释至 2 5 ml ，测定 入 处的 吸光度 ， 由回归方程计算黄酮含量 。 取烘至恒重的荞麦麸皮 l g ，按表 l 和表 2中的要求 浸提，提取液过滤，定容至 1 0 ml 。取 l ml 稀释至 2 5 ml ， 按 “ 标 准 曲线 制作 ”项下操作 ，测 定吸光度 ，根据 回归方程 ，计算被测样品中黄酮类物质 的含量。 2 结果与讨论 2 1 芦丁最大特征吸收峰 按 “1 4 1 ”项 下操作 ，结果见 图 1 。 2 1 5 l 萋 O 5 O 2 0 o 2 5 O 3 0 o 3 5 0 4 0 0 波长 Wa v e l e n g t h ( m ) 图 1 芦丁标样紫外吸收谱 F i g 1 U l t r a v i o le t a b s o r p t io n c u r v e o f r u t i n 结果表明芦丁标样在2 4 0 4 0 0 n m存在两个特征吸收 峰，最大特征吸收峰波长为 2 6 8 n m，所以选 2 6 8 n m 为 测 定 波 长 。 2 2 工作曲线及线性回归方程 按 “ 1 4 1 ”项下操作 ，在 2 6 8 a m 波长下测定吸 光度 A，以标准芦丁浓度 c为横坐标，吸光度 A为纵 坐标 ，绘制标准 曲线 。见图 2 ，得 回归方程 A= 0 0 6 C + 0 0 0 6 6 ，相关系数 r = 0 9 9 9 3 。 2 - 3 交实验 为系统考察乙醇提取法的工艺参数，根据 已有的资 料及实际情况 ，选用乙醇体积分数、提取温度、提取 时间和料液比作为考察因素，以测得的浸提样品中总黄 3 A= o 0 6 C+o 0 I ) 6 2 5 9 9 9 3 2 1 5 l 0 5 O 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 芦丁含量Co n t e n t o f f I I 血( mg ) 图2 芦丁标样测定点与线性回归曲线 F i g 2 Sp o t t in g a n d l in e a r r e g r e s s io n c u r v e o f r u t i n s a mp l e 酮( 芦丁) 含量为考察指标 ，选用 b( 3 ) 正交表设计 ，因 素、水平见表 l ，L 9 ( 3 4 ) 正交试验设计及结果见表 2 。 表 1 因素水平表 T a h i e 1 F a c t o r s t a n d a r d 表2 ( 正交实验设计及结果表 T a b l e 2 ( 3 ) o r t h o g r a p b i c e x p e me n t d e s ig n a n d r e s u l t ( n - 3 ， is 。 ) 相同实验条件同一批次，同一批 次平行 3份样 品。 按 “ 1 、 4 2”项下测定各提取液中总黄酮的含量。实验 结果及统计学分析结果见表 2、表 3 。 从以上结果可知，各试验因素及因素水平对苦荞麦 麸皮黄酮类物质提取量大小的影响不完全相同，在所选 因素水 平 下 4种 因 素的最 佳 组合应 为 A Bt C， D， ，即用 6 5 的乙醇溶液，料液比为 l ： 3 0 ，6 0 6 5 条件下浸提 6 h，总黄酮浸 出率最 高。 由方差分析可知，在正交设计表中的实验条件下， 各 素影响的次序为乙醇体积分数浸提时间浸提温 度料液比。乙醇浓度对提取率有显著影响，浸提时 f I 鲁。扫 o 维普资讯 1 0 0 2 0 0 5 , V o 1 2 6 , N o 3 晨窆 品 雨 i I 学 工艺技术 表 3 苦荞麦麸皮中总黄酮乙醇提取方差分析 T a b l e 3 An a l y s i s o f v a r i a n c e of t o t a l f l a v o n e s i n b it t e r b u c k wh e a t b y et hon al e x t r a c t i on 问有一定的影响，而提取温度和料液比在所选水平范围 内 影 响 较 小 。 2 4 提 取级 数的选择 称取 l O g 苦养麦麸皮粉末，加入 l O O m l 6 5 的乙醇， 室温下浸提 6 h，过滤 ，在同样条件下进行多次提取 ， 按“ 1 4 2 ”项下进行测定，由回归方程计算各级提取 得 率 ， 结 果 见 表 4 表 4 各级提取过程中苦荞麦麸皮中总黄酮的得率 T a b l e 4 Ra t e of t o t a l f l a v o n e s i n b it t e r b u c k wh e a t p e e r s a t d i ff e r e n t e x t r a c t i o n s t a g e 以上实验结果表明，经过二次提取，苦养麦麸皮 总黄酮的提取率达到 9 1 ，提取产品得率 3 2 。 3 结 论 3 1 试 验因素 A、D影 响均不显 著，其 水平可 以任 选， 但从经济高效等角度考虑，可以选择 A- B- C ， D- ，即以 料液比 1 ： 1 0 、6 5 乙醇为溶剂，在室温( 2 5 3 O ) 下提 取 6 h，提取 效果最佳 。 3 2 在最佳提取条件下进行二级提取，提取率 9 0 以 上 ，产品得率 3 2 ，纯度 6 5 。 参 考 文献 ： 1 中草药编写组 中药大辞典【 Z 】 上海： 上海人 民出版社， 1 9 9 3 1 5 9 5 1 5 9 6 【 2 】 林红梅， 韩淑英， 奕新段， 等 甜荞麦种了提取物镇痛抗 炎作用的实验研究 J 华北煤炭医学院学报， 2 0 0 3 ， 5 ( 3 ) ： 2 9 0 _ 2 91 【 3 】 刘淑梅， 韩淑英， 崔国金， 等 甜荞麦叶总黄酮降糖降脂 作用及机制 J 第四军医大学学报， 2 0 0 3 ， 2 4 ( 1 9 ) ： 1 8 1 5 1 81 7 4 4 朱瑞， 高南南， 陈建民 苦荞麦的化学成分和药理作用 J 中国野生植物资源， 2 0 0 3 ， 2 2 ( 2 )