四种不同品种西瓜藤化学成分预实验.pdf

时珍国医国药 2 0 1 2 年第 2 3 卷第2 期L I S H I Z H E N M E D I C I N E A N D M A T E R I A M E D I C A R E S E A R C H 2 0 1 2 V O L 2 3 N O 2 四种不 同品种西瓜藤化 学成分预 实验 王 硕 ， 龚小妹。 ， 周小雷 ， 戴航 ( 1 广西药用植物研究所姚新生院士重点实验室 ， 广西 南宁5 3 0 0 2 3 ； 2 广西 医科大学 ， 广西 南宁5 3 0 0 2 1 ； 3 广西 中医学院 ， 广西 南宁5 3 0 0 0 1 ) 摘要 ： 目的 采用系 统预试法对4 种不同品种西瓜藤可能的化学成分进行预实验， 初步探索4种不同品种西瓜藤的化学 成分。方法 采用试管反应法、 层析法， 对西瓜藤的水、 9 5 乙醇、 石油醚提取物进行研究， 通过多种指示剂和显色剂的沉 淀反应或颜色反应， 对 4种不同品种西瓜藤可能含有的化学成分进行初步研究。结果 4种不同品种西瓜藤中可能含有 糖类、 有机酸、 皂苷、 黄酮类、 生物碱、 甾体等化学成分。结论 初步确定4种不同品种西瓜藤含有多种有效成分， 为西瓜藤 的进一步开发利用提 供 了实验基础。 关键词 ： 西瓜藤； 预实验； 化学成分 D O I 标识 ： d o i ： 1 0 3 9 6 9 i i s s n 1 0 0 8 - 0 8 0 5 2 0 1 2 0 2 0 6 2 中图分类号 ： R 2 8 4 2 文献标识码 ： B 文章编号 ： 1 0 0 8 -08 0 5 ( 2 0 1 2 ) 0 2 -03 9 0 -02 西瓜藤为葫芦科 ( C u c u r b i t a c e a e ) 植物西瓜 C i t r u l l u s l a n a t u s 粉碎成粗粉即为实验品粗粉。 ( T h u n b ) Ma t s u m u e t N a k a i 的藤茎。在我国南北各地资源非常 丰富， 笔者研究发现其具有良好的抗炎、 镇痛等作用 。目前国 内外对西瓜藤化学成分的研究暂处于基础研究阶段， 未见有西瓜 藤化学成分研究的文献报道， 仅见李培 对西瓜藤中黄酮类化 合物提取工艺优化的初步研究。因此， 本实验首次对 4种不同品 种西瓜藤的化学成分进行了预实验， 以明确其中可能的化学成 分 ， 为以后的研究和开发利用提供依据。 1 材料与仪器 1 1 药材 4种不同品种西瓜藤( 茎、 叶) 采 白海南省文昌市龙楼 镇全美村 ， 经广西药用植物园马小军研究员鉴定为成熟西瓜 c r u U u s l a n a t u s ( T h u n b ) Ma t s u m u e t N a k a i 的茎、 叶， 品种分别为小蕙 兰 、 黑美人 、 无子瓜 、 风光 。 1 2 试剂 9 5 乙醇 A R， 成都市科龙化工试剂厂产品， 批号 2 0 1 1 1 0 3 0 3 ； 石油醚 A R， 成都市科龙化工试剂产品； 去离子水 ( 自制) ； 其余试剂 ： 茚三酮试剂， 双缩脲试剂， F e h l i n g 试剂， 一萘 酚， 氯化钠明胶试剂， 三氯化铁试液， 碘化汞钾试液， 碘化铋钾试 液， 硅钨酸试液， 苦味酸试剂 ， 盐酸 一镁粉试剂， 三氯化铝试液， 醋 酸镁试液， 3 ， 5一二硝基苯甲酸， 亚硝酰铁氰化钠试剂 ， 异羟肟酸 铁试液等( 自配) 。 1 3 仪器 H H一 6型， 数显恒温水浴锅， 国华电器有限公司产 品； 1 0 1 A一 2 E T恒温电热鼓风干燥箱 ， 上海实验仪器厂有限公 司 产品； H X 5 0 2一T型电子天平， 慈溪市天东衡器厂产品； Z F一 2型 三用紫外仪， 上海市安亭电子仪器厂产品； U P KI 型优普超纯水 机， 成都超纯科技有限公司产品； 超声机， 曙峰企业产品。 2 方 法与 结果 将西瓜藤经样品制备后采用试管、 层析预试法进行实验。根 据供试液可能含有的化学成分类型， 选择各类成分特有的化学反 应如颜色反应、 沉淀反应等做一般定性预试。 2 1 试 管法 2 1 1 样品制备 取一定量的4种不同品种西瓜藤 ， 自然晒干 ， 收稿 日期 ： 2 0 1 1 -0 5 3 1 ； 修订 日期 ： 2 0 1 1 1 0 1 0 基金项 目： 广西壮族 自治区科技厅资助项 目( N o 1 0 1 2 4 0 0 81 2 ) 作者简介 ： 王硕( 1 9 7 3 - ) ， 男( 汉族) ， 甘肃会 宁人 ， 现 任广 西药用植物研 究所助理研 究员， 广西医 科大学在读博士研究生， 主要从事中药药理和新 药开发工作 通 讯作者简 介： 戴航 ( 1 9 7 4 - ) ， 女( 汉族) ， 广西南宁人 ， 现任 广西 中医学 院副教授， 硕士研究生导师， 硕士学位， 主要从事天然药物化学研究工作 3 9 0 2 1 2 水供试液的制备 称取4种不同品种的西瓜藤粗粉各 3 0 g ， 分别置具塞锥形瓶中， 加入蒸馏水 3 0 0 ml ， 不时振摇 ， 浸渍 2 4 h ， 再超声提取 2 h ， 滤过 ， 即得水供试液。 2 1 3 乙醇供试液的制备 称取 4 种不同品种的西瓜藤粗粉各 3 0 g ， 分别置具塞锥型瓶中， 加入 9 5 乙醇 3 0 0 m l ， 不时振摇， 浸 渍 2 4 h ， 再超声提取2 h ， 滤过， 滤液回收乙醇至无醇味， 取 1 3量 浓缩液， 加9 5 乙醇 3 0 m l 溶解， 供做甲项试验。剩余的浓缩液 加 5 盐酸3 O m l ， 充分搅拌 ， 过滤， 滤液部分供做乙项试验。酸 水不溶部分加醋酸乙酯 3 0 m l 溶解， 醋酸乙酯液用 5 N a O H溶 液 3 O m l 振摇洗涤 2次， 弃去碱水层， 醋酸乙酯层再用蒸馏水洗 2 次， 至水洗液呈中性反应 ， 弃去水洗液， 置水浴锅上蒸发除去醋酸 乙酯 ， 残留物用9 5 乙醇 l 5 m l 溶解， 供做丙项试验。 2 1 4 石油醚供试液制备 称取 4种不同品种 的西瓜藤粗粉 各 3 0 g ， 分别置具塞锥形瓶中， 加入石油醚 3 0 0 m l ， 不时振摇 ， 浸渍 2 4 h ， 再超声提取 2 h ， 滤过 ， 滤液置于蒸发皿中浓缩后即 得 。 2 2 纸色谱法 称取4 种不同品种的西瓜藤粗粉各 3 0 g ， 分别置 具塞锥形瓶中， 加入9 5 乙醇 3 0 0 m l ， 不时振摇， 浸渍2 4 h， 再超 声提取 2 h ， 滤过， 滤液供实验备用。展开剂： 9 5 乙醇。显色剂 ： 间苯二胺试剂 、 0 1 溴酚蓝乙醇液、 2 三氯化铝乙醇试剂、 间二 硝基苯试剂、 改良式碘化铋钾试剂。取直径 1 2 5 e m的普通圆形 滤纸四张， 分别在各滤纸中心打-I b T L ， 插入滤纸芯备用。0 1 5 m 1 乙醇提取液小心滴加在距中心约 1 c m处， 点样后， 将小滤纸 芯插入滤纸的中 b d , L ， 移至剩有展开剂的直径为 1 4 c m的培养 皿中， 进行层析。溶剂的前沿达到滤纸边缘后， 取出滤纸 ， 将滤纸 剪为5份 ， 分别喷以不同显色剂 ， 从滤纸上出现的颜色斑点， 进一 步确定样品成分。 2 3 化学成分预实验 2 3 1 水提取液预实验 水供试液氨基酸、 多肽、 蛋白质、 糖 、 多 糖、 苷类、 鞣质 、 有机酸、 皂苷等检查。结果见表 1 。 2 3 2 乙醇提取液预实验 甲项实验： 黄酮、蒽醌、 酚、 鞣质、 植物甾醇、 三萜； 乙项实验 ： 生物碱； 丙项实验： 香豆素、 内酯、 强心苷等检查。结果见表 2 。 2 3 3 石油醚提取液的预实验 石油醚供试液的挥发油、 油脂、 甾体检查。结果见表3 。 2 3 4 滤纸层析 纸层析糖类、 黄酮、 有机酸、 甾体、 生物碱检查。 结果见表4 。 L I S H I Z H E N M E D I C I N E A N D M A T E R I A M E D I C A R E S E A R C H 2 0 1 2 V O L 2 3 N O 2 时珍国医国药 2 0 1 2年第 2 3卷第 2期 表 1 水提取液预实验 结果 成 分 类 别 反 应 名 称 正 反 应( + ) 指 示_ 熏 要 些 而 “+ ” 示有此反应； “+ ” 示此反应显著； “一 ” 示无此反应 3 讨论 、 以上化学成分预实验结果表明， 4种不同品 种西瓜藤中所含成分基本相同， 都可能含有糖 、 有 机酸、 皂苷、 黄酮类、 生物碱和甾体等化学成分。 其中无子瓜所含黄酮类成分较多 ， 小蕙兰所含植 物甾醇、 三萜类成分较多， 黑美人所含生物碱较其 他三种较少， 小蕙兰、 风光所含糖类、 多糖 、 苷类较 其他两种品种较多。 我国是世界上西瓜生产大国， 南北各地具有 种植， 拥有大量西瓜藤废弃物， 但都没有很好的利 用， 对这些农作物废弃物进行深入的研究 ， 明确其 药理作用的有效成分或有效部位， 将其变废为宝， 具有十分重要的意义。因此 ， 本文首次对西瓜藤 进行了化学成分预实验， 初步确定了其可能的含 有的化学成分， 为进一步进行该植物生物活性成 分的确定、 提取、 分离、 纯化研究提供了研究基础。 参考文献： 1 J i ag a n g D E N G ， S h u o WA N G， L i c h e n g G U O E x t r a c t s f r o m wa t e r me l o n r o o t s a n d l e a v e s h a v e p r o - t e e t i v