水苏糖改善人体肠道菌群作用的人体试食研究.pdf

高 新 技 术 2 0 0 9 NO8 C h i n a Ne w T e c h n o l。o。 g i。e 。s。 。a。n。d P 。r。o。 。d。 。u 。 c ts 水苏糖改善人体肠道菌群作用的人体试食研究 高 鹏 。 黄晓春 杨建武 张朝 熊德鑫 王建勋 ， ( 1 、 西安大鹏生物科技股份有限公司， 陕西 西安 7 1 0 0 7 5 2 、 中华预防医学会微生态分会 ， 北京 1 0 0 0 0 9 3 、 中国人体健康科技 促进 会 ， 北 京 1 0 0 1 0 2 ) 摘要： 【 目 的】 研究水苏糖改善人体肠道菌群的作用， 分析和总结水苏糖对人群的最佳日 摄入量。 【 方法】 采用自 身和组间两种对照设计， 从自 愿参加 的受试者 中选 2 5 0人均分为 5组， 分别给予每 日 服 用水苏糖 0克、 0 L 5克、 3克、 5克、 l O克， 连续试食 6 O天， 其中前 3 0天观察其安全 I生 及功效性指标 ， 后3 0 天观察其安全陆 指标。【 结果】 每日 服用3 克、 5 克、 1 0 克三妇人群服用水苏糖 3 0天后， 肠道内的双歧杆菌数量明显增加， 差异均有统计学意义 ( P n O 5 ) 。 【 结论】 水苏 糖的日 常摄入量为0 5克_ 5 克， 推荐日 摄入量为3 克， 试食水苏 糖对受试者健康无不良 影响。 关键词 ： 水苏糖 ； 肠道菌群 ； 人 体试食 实验 ； 双歧 杆菌； 乳杆 菌 水苏瞎 是天然存在的四糖，由果糖一 葡萄糖 半 乳糖 半乳糖构成 ，分子式 C 2 4 H 4 2 0 2 1，分子量 6 6 6 _ 5 9 ， 具有如图 1 所示的结构。 与该糖结构相类的 有比水苏糖少个半乳糖基的棉子糖( 三糖) 和多 1 个半乳糖基的毛蕊花糖( 五糖) ， 均为低聚半乳糖。 该类糖是优良的双歧因子 ， 主要用作增殖肠道双歧 杆菌， 促进短链脂肪酸增加， 使肠道酸性化， 有抑制 腐败产物生成 ， 抑制胆固醇上升等阻毒 、 排毒 、 解毒 和改善大便性状及提高钙 、 镁等微量元素吸收的功 效。具防病 ， 抗病 ， 美容作用， 并可开发作药物。 图 1水苏糖的化学结构式 1材料和方法 1 1受试样品。水苏糖是从中国特有天然蔬菜 地灵中采用传统提取分离技术精制而成的产品， 产 品形式为白色粉末 ，其中水苏糖含量为 6 5 以上 ， 由西安大鹏生物科技股份有限公司提供。 1 2受试人群的纳入标准和排除标准 1 21受试者的纳入标准 A、 个月内未患过 胃肠疾病者。B、 一个月内 未服用过抗生素者。 1 2 2受试者的排除标准 A、 年龄在 7 0 岁 以上者， 妊娠和哺乳期妇女 ， 过 敏体质者。B 、 合并有心血管、 脑血管、 肝、 肾和造血 系统等严重疾病及内分泌疾病， 精神病患者 。C、 停 服受武佯品或中途加服其他药物， 无法判断或资料 不全者。D、 短期内服用与受试功能相关的物品 ， 影 响到对试食结果的判断者。 l 3研究实验的观察指标 一 般情况 ： 包括精神 、 睡眠 、 饮食 、 大小便及血 压等。 安全性指标 ： 试食者在试食前进行胸透 、 心 电 图、 腹部 B超 、 肝 、 肾功能检查 ； 试食者在试食后进 行血常规、 尿常规、 便常规和血生化检测。 功效性指标 ： 双歧杆菌、 乳杆菌、 肠球菌、 肠杆菌。 1 4试验及分析方法 1 4 1 受试水苏糖的服用剂量及服用方法 从自愿参加的受试者中选取 2 5 0 人均分为 5 组 ， 年龄在 2 0 - 7 0岁之间 ， 分别为 A、 B、 c、 D、 E组 ， 分组时尽可能地考虑影响结果的主要 因素如年龄、 性别、 饮食因素等， 进行均衡性检验， 以保证组问的 可 比性。 A、 B、 C、 D、 E五个组每人每 日服用水苏糖的量 分别是0 克， o j 克， 3 克， 5 克， 1 0 克。 受试者每人每 日早晚各按每人每 日的摄人量的一半服用， 服用时 将受试的水苏糖溶解于 1 0 0 毫升温水中服用， 其中 A组按时服用 1 0 0毫升的温水。 试验期间受试者不 得改变原来的饮食习惯 ， 应正常饮食。受试样品水 苏糖采用同一批号， 受试给予时间为 6 0天。 其中在 试食者试食 3 0天时，按试验所需观察的指标全部 进行观察 以及检验 ，以确定试食的安全性及其功 效 ； 试食 3 0天至 6 0 天 ， 观察一般安全性指标 ， 以确 定试食对人体 自身有无影响。 1 4 2 试验步骤 在受试者受试之前， 采用无 菌取样方式采取受试者粪便 l 10 克， l O 倍稀释， 选 择合适的稀释度分别接种在各培养基上。培养后 ， 以菌落形态， 革兰氏染色镜检 、 生化反应等鉴定计 数菌落 ， 计算 出每克湿便 中的菌数 ， 取对数后进行 统计处理。 最后一次给予水苏糖样品之后 2 4小时 ， 再次检测， 方法同上。 1 4 3 试验中肠道菌群的检验和培养方法 ： 双歧杆菌 ： B B L培养基3 7 4 8 _ 7 2 小时厌 氧培养 乳杆菌： L B s 培养基3 7 C 4 8 小时培养 肠杆菌： E MB培养基 3 7 2 4小时培养 肠球菌：叠氮钠一 结 晶紫一 七叶苷琼脂3 7 o C 4 8 小时培养 2结果 2 1 一般性情况及安全性指标 ：包括精神 、 睡 眠、 饮食、 大小便及血压等， 试验前受试者精神、 睡 眠、 饮食、 大小便及血压情况 良好 ； 血常规 、 便常规 、 血生化和肝、 肾功能各项检测指标均在正常值范围 内； 胸透、 心电图和腹部 B超检查均正常。6 0 天试 食期间 ： A组试食者没任何变化 ； B组 中有 2 0人排 便变规律， 精神有所改善； c组人群全音 # 便规律 ， 精神、 睡眠 、 饮食 、 血压状况 良好 ； D、 E组全部试食 者排便规律 ， 精神、 睡眠、 饮食 、 血压状况正常， 唯有 E组 中有 4人在试食前两周有偶尔 的溺便和排气 现象 ， 而在后期此现象又逐渐消失 ； 未观察到试食 对健康的不 良反应， 试食后试食者的血、 尿和便常 规指标无异常改变。 2 2肠道菌群检测的实验数据的 处理： 将人体 试 食实验结果 3 0天的实验数据采用 t 检验 ，并用 s t s t a 软件进行统计和处理， 结果见表 1 ： 2 3 结果分析 A、 对照 A组( 空 白) 试食前 后 比较 ， 试食者的各指标菌差异 均无统计学意义( P 5 ) 。B 、 与 空 白对照组 A组比较 ， 各组人群 试食前 的各指标菌差 异均无 统 计学意义( P 0 D 5 ) 。c 、 试食者服 用水苏糖后， 试食者肠道内的四 种指标菌 的数量发生 了变化 ： B 组试食者服用水苏糖后， 双歧杆 菌数量明显增加 ， 差异有显著性 ( P 5 ) ； c组试食者 服用水 苏 糖后， 双歧杆菌数量明显增加， 差异有极显著性( P 0 0 5 ) 。 3讨论与结论 通过选取了 2 5 0名受试者分为五组 ， 分别每 日 每 人 给予 0克、 o 5克 、 3克 、 5克、 1 O 克水苏糖 ， 经过 试食6 0 13 后， 通过对一般性安全指标和试食3 0 天 功能性指标的结果分析 ， 可得出以下结论 ： 每 13服 用 o 5克水苏糖 ， 服用 3 0日后 ， 即可增殖肠道内的 双歧杆菌； 每日 服用 3 克水苏糖， 服用 3 0日 后， 肠 道内的双歧杆菌显著增加、 乳杆菌增加； 每日服用 5 克和 l O克水苏糖 ， 服用3 0 13后， 肠道 内的双歧杆 菌、 乳杆菌显著增加 ； 每 13服用 l O 克与每 日服用 5 克及 3 克进行服用 3 0 13的组间比较 ，肠道内双歧 杆菌、 乳杆菌增加不显著 ； 所有试食者服用水苏糖 6 0 天对身体健康无不良影响。 通过以上结论， 我们认为： 水苏糖的最小有效 剂量为 0 5克 日， 最大无作用量为 1 O克 日， 13常适 宜摄取量为 0 5 - -5 0克， 日常推荐摄取量为 3克。 参考文献 l 1 卫生部保健食品功能学评价程序与检验方法 2 1 熊 德鑫 健康从肠内开始 上海科学 技术出版社 2 0 0 5 年 1月第 1 版 1 尤新功能性低聚糖 中国食品添加剂2 0 0 2 ， 4 1 陈瑞娟 肠内茵丛与健康长寿 食品与发酵工 &) 1 9 9 6 ， N o 2 圈张天成 ， 郭书文 ， 唐和平 水苏糖在 乙肝便秘 中的 治疗与体会， 中国实验方剂学杂志) 2 0 0 3 年 l O 月 【6 溶 白双歧杆菌的微生态学及临床意义， 中华儿科 杂志， 1 9 9 5 ， 3 7 ( 5 ) ： 3 1 O - 3 1 2 A 组 ( O 克 日) B 组 5 E t ) C 组 G F I ) D 组 ( 5 克 日 ) E 组 ( i 0 克 ， 日 ) 服用前 服用 后 服用前 服用 后服用前 朋用 后 服用 前 服用 后 服用前 服用后 双歧 &5 6 士 &留士 &曲士 g 3 2 土8 6 2 士 g 8 9 士 8 5 5 士 9 9 7 士 8 6 5 土 9 9 5 士 杆菌 n 3 5 Q 4 2 Q 5 l n国 a茁 a 7 3 Q 5 8 n 8 1 n雨 乳杆 4 3 士 8 3 8 士 & 2 9 土 &7 0 a 3 9 9l 1 士 8 2 5 9 3 6 士 4 8 士 9 4 L 菌 0 8 1 Q 7 5 n 7 2 n n 7 4 Q 4 2 0 7 L Q 5 5 Q B l Q曾 肠杆 4 9 土 7 5 3 6 土 7 3 8 士7 5 5 土 6 2