笃斯越橘果汁澄清方法的研究.pdf

第 2期 ( 总第 5 7 期 ) 中国林副特产 2 0 0 1 年 5月 Qu a r t e r l y 0 f F o r e s t B yP r o d u c t a n d S p e i a l l t y i n C h in a N o 2 r NO 5 7 J M a 2 001 笃斯越橘果汁澄清方法的研究 殷丽君 孔书敬 殷力 ( 1 中国农业大学食 品工程研究所 ， 北京 1 0 0 0 8 3 ； 2 东北林业大学 ) 摘要 ： 果胶 酶 一明腱 一 硅腱 一膨润土复台 澄清法能 够有 效的澄 清葛斯越搞 果汗， 最佳蹬清条件为 ： 茑斯越搐 果计 中添 加 0 0 3 4 的果胶酶 ， 在 5 0 T 下保 温 2 h ； 每 1 0 0 L果 汗加入 l o g明腱 、 3 0 的明硅腱 溶液 3 7 5 m l 以噩 7 5 g 膨滑 土对果 计 进行 澄清。 澄清的果计于室温下贮藏 1 8 0天后 ， 折保持清澈透明 无沉淀。 美键词 ： 茑斯越搞 果汁； 澄清 ； 果胶酶 ； 明腱 ； 硅胶 ； 晦润土 A b s t a c t ： T h e t t a U n e n t o f p e e t i n a s e g e l a t i n s i l i c a蹦 一b e n t o n i t e h a s t h e b e s t c l a r i fi c a t i o n e ff e c t o n V a c i h u m v h g i n o u m i u i c e A d d 0 0 3 4 p e r c e n t o f p e e t i n a s e t o t h e j u l e e ， a n d t h e j u i c e i s i n c u b a t e d 5 0 “ C f o r 2 h o u r s T h e n ， g e l a t i n a n d s i h c a g e l a d d e d t o th e t r e a t e d j u i c e i n p r o p o r t i o n a s l O g g e l a t i n a n d 3 7 5 m l s i l l i c a g e l a n d 7 5 g b e n t o n i t e p e r 1 0 0 L j u i e e T h e d e a r j u ic e i s o b t a i n e d wi t h o u t s edi me n t a f t e r s t o r a g e f o r 1 8 0 d a y s Ke y wo r d s ： V a c c i h i u m v h g i n o m m J u i c e； da r i g l e a t i o n ； pe c t i n - , ； g e l a t i n ； s i l i c a g e l ； b e n t o n i t e 0前言 笃斯越橘 ( V a c c l n i u r a v I i g i n o s u m L ) ， 俗称红豆 、 甸果、 牙 疙瘩 广泛分布 于黑龙 江 、 吉林 及 内蒙古东部 山区， 是 当地 一 种优 良的野 生浆果。 笃斯越橘营养丰富， 果实酸甜昧美 ， 含糖 4 5 、 总酸 2 1 、 蛋白质 O 2 4 、 果腔 1 9 、 单宁 0 2 5 、 每 1 0 0 g 果实 中含维生 索 c 5 3 ra g ， 果 汁出汁率 可达 8 5 是 良好 的果汁原 料。 目前 ， 太兴 安岭地 区有多家 骂斯 越橘果 汁的生产盘业 ， 但 是大多数产 品销 路不畅 ， 主要原 因是 由于笃斯越橘果 汁在运 输 、 锖售 、 存贮期 间易于产生沉淀 。 固此 ， 对笃斯越橘 果汁进行 澄清 是提高其质量 的关键工序。 本文根据 笃斯越橘 的 自身 特点 结台 当前林 区经济贫 困 的现状 ， 并采用简便易行 的方法 ， 研究 了笃斯越 橘果汁的澄清 方法 ， 为澄清型笃斯越橘果 汁的生产提世参考。 J 材料与设备 1 1 原村抖与试卉 0 原材料 ： 笃斯越橘果汁 ( 大 安岭盘古林 坜) ； 试剂 ： B E 3 一L型果胶酶 、 明腔 ( 食品级 ) 、 单宁 ( 分析级 ) 9 5 乙醇 ( 分析级 ) 1 2仪 器设 备 7 2 2 光栅分光光度计 ( 上 海第三分析仪器厂) ， p i t J O B型 数字酸度计 萧 山市分析仪器 厂) WY型手持 式糖 量计 上海 大庆光学仪器厂) ， L D一 2 A型离心机 北京医用离心讥厂) 。 2原理 果腔 酶分解果汁 中的果腔物 质 ， 破坏果汁 的胶体系统 ， 使 果 汁悬浮微粒失去 保护而倾 向于沉淀 ； 另外 ， 果汁 中存在的蛋 白质 、 淀 粉等大分子颗粒 也在存贮期 间沉淀而使果计 浑浊 明 胶可与笃斯越橘果汁中单宁等多酚物质反应形成较大的浑浊 物质 ， 然后凝 聚并吸附其 它浑浊物成分澄清果 汁 ； 硅腔可作用 过量的 明腔 ； 膨 润土 吸附其 它悬 浮物质 及过量的色素， 并迅速 凝结形成致密沉淀 ， 从 而达到 澄清笃斯越橘果汁的作用。 3实验 内容 3 1 B E 3 一L型果胶酶对 茑新越橘 果汁澄清的影响 将笃斯越橘加热 至 9 0 ， 保温 5 ra i n 后 用双层沙布过滤 分别 量取 2 0 t r d果 汁置 于具塞刻度 管中， 然后分别加入一定量 的果胶酶液 并用蒸馏水补充至总体积一致 ， 再放于5 0 “ C。 恒 温水 浴 中保 温 2 h ， 取 出后迅 速冷却 ， 测定果 汁粘度及 透光率 ( 测 定政 长 6 4 0 ri m) 。 实验结果见袁 l 。 表 1 果肢酶用量 与澄清效果 的关系 当加入 0 0 3 4 的果胶 酶时 果汁粘 度明显下降 ， 醇沉实 验亦为阴性 ， 这表明果腔 物质 因分解而含量下降 ， 但 是果计 的 透明度提高 并不显著 ， 仍然不符合 要求。 因此 ， 必 须添加有 其 它的辅助澄清剂进行澄清。 笃斯越橘果 汁中单宁含量较高 ， 本 表 2正交实验结果 本 研 究 得到 东 北 林 业 大学 森 林 植 物 生 态 学 ( 教 育 部 放_ 究 开放 j 收稿 日期 ： 2 0 0 01 22 5 维普资讯 第 2期 ( 总第 5 7期) 2 0 0 1年 5月 中国林副特产 Q u a r t e r l y o f F o r e s t B y P r o d u c t a n d s p e c j l y i n C h l u a N o 2 r G S N O , s 7 ) 2 J 紫外一 可见分光光度法定量测定沙棘果实中水溶性色素 王静 睢薇 睦冰 ， 王睛 ( 东北农业 大学 生命科学与生物技术研究 中心 ， 东北农业大学 园艺学院， 哈尔滨 1 5 O 0 3 0 ) 摘要 ： 类黄翻化 夸物结构 中的酚羟基厦 一吡喃环能与目兰 B试 剂或 z ， 发 生显 色反应 ， 本研 完利 用此性质 采用紫 外 一可见分光光度 击定量 测定了沙棘果 实中水溶性 色素， 并对其进行 了薄层层析荧光扫描 分析。 美键词 ： 紫外 一可见分光光度法 ； 沙棘果 实； 水溶性 色素 ； 定量测定 沙棘 ( Hip p o p r h a me to Me s L ) 其果实呈黄色。 沙棘广泛 分布在欧亚大陆 ， 在我国也有大面积种植 。 近年来 ， 随着现代化 测试仪器及分析方法的日臻完善 ， 研究水平的不断提高。 抄棘 的营养价值和药 用价值 已越来越受人们 的关注 ， 一股研究抄棘 的热潮正一 浪高过一浪 “ 无废料沙 棘” 的研究方兴未艾。 类 黄酮化台物 是一 大类 几乎无处不在的使植物多呈浅黄 色乃至无色 、 偶尔 呈橙 黄色的水溶性化台物 ， 多以甙 的形式广 泛分布于植物组织中。 尽管这类化台物单独存在时有时颜色 很浅 ， 但和其它 主要呈色色素共同存在 时 ， 其辅助着色的作用 不可忽视 ， 而其生理活性及药用价值更 是毋庸置疑 的。 这类化 合物大 多具有酚羟基结掏及 吡哺环 能和许多金属 和试剂 发生显 色反应 ， 利 用这一性 质可 对总 多酚类 ( 含多个 酚羟 基) 及总类黄酮化合物定量。 关 于这方面的研究还未见报道 。 1实验音 B 分 1 1仪 嚣与 试 剂 美 国 B e c k m a n D U一7紫外 一可见光分光 光度计 ； 去离子 水 ； 其它试荆均为分析 纯或优级纯 。 1 2材料 沙棘果 实 ： 采摘大果无刺秒棘鲜 果( 东北农业大学园艺试 验站 ) ， 品种 为“ 巨人” 、 “ 楚 伊” 、 “ 丰产 。 将鲜果洗净 、 控水 、 称 重 ， 置于低温 一3 O 冰箱 中速冻保 存。 1 3 实验方法 1 3 1 抄棘果实水溶性色素的提取 称取抄棘果样品 l o g ， 加 少量 石英砂研磨 5 ra i n ， 加 2 0 m l 丙 酮做提取剂 ， 在 4 0 水浴中提取 9 0 ra i n ， 过滤 ， 残渣用丙酮按每 2 0 m l 洗 涤 ， 共 4次 ， 滤液定容在 l O O m l 容量瓶 中 ， 取此粗提 液 于分液精斗 中 ， 加 入石 油醚 ( 3 0 6 o ) 、 2 氯化 纳水溶液 进 行液液分配 ， 比例 为粗提 液： 石油醚： 水 = 4 0 ： 6 0 ： 4 0 ， 收集下层 “ 水相” ， 定容至 2 5 0 m l 备用 。 1 3 2 水相溶液中总类黄酮及总酚类 化合物的定量检出 1 3 2 1 总酚类化合物的定量检出 标准 曲线 的制 作 ： 准确称 取 4 5 ra g槲皮 素和 5 m g芦 丁于 1 0 O r a l 容 量瓶 中 ， 用 甲醇定 窑 ， 从 中取 l O m l ， 用 甲醇稀 释 至 1 0 O r a l ， 此混合标准溶液浓度为5 0 m g L 取 6只试管分别加上 述标准溶液 0 1 、 0 2、 0 3 、 13 4 、 13 5 、 13 6 m l ， 再分别加 2 9 、 2 s 、 2 7 、 2 6 、 2 5 、 2 4 m l 甲醇 ， 使体积均为 3 n d ， 再 向上述溶液中加 入 13 5 m l 固兰 B试剂 ( 1 0 0 ra g固兰 B溶干 6 0 n d甲醇 ， 过滤 ， 滤 液 备用 ) ， 摇匀 ， 放置 1 0 m i n后 用紫外 一可 见分 光光 度计 在 5 0 8 n m测 定吸光度 ， 同时测 试剂空 白 ( 3 m J 甲醇加 0 5 m l 固兰 B溶 液) 建立浓度 一吸光度 回归方程。 总酚类化合物 的测定 ： 平行取 1 m l 水相 ” 液( 1 O g 鲜果提取 后， “ 水相” 定容至 2 5 0 m 1 蒸去溶剂 ， 再用 甲醇定容至 2 5 O r a 1 ) 两 份 ， 分别 加 3 r a l 甲醇 ， 加 0 5 m l 固兰 B溶 液 ， 摇匀 ， 放 置 l O m i n ， 在 5 0 8 n m测其吸光度 。 代人 回归方程 ， 计算 出总 酚类化合物 的 含量。 l _ 3 2 2总类黄酮化合物 的检出 标准 曲线 的制 作 ： 取 6只试 管分别加 1 3 2 1中的标 准 溶 液 0 2 、 0 3 、 0 4 、 0 5 、 0 6 、 0 7 m l ， 再分别 加 1 8 、 1 7 、 1 6 、 1 5 、 1 4 ， 1 3 m l甲醇使体 积 均 为 2 m l ， 再 向上 述溶 液 中加 入 2 氯氧化锗甲醇溶液2 m l ， 摇匀 在4 3 7 n m测定吸光度同时做 试剂空 白( 2 m l 甲醇加 2 m l 氯氧化锆 溶液 ) 。 建立浓度 一吸光度 回归方程 。 总类黄酮化合物的测定： 平行取 l m 1 1 3 2 1中的 水相 ” 液两份 ， 加 2 m l 甲醇 ， 2 ml 氯氧化 铬溶液 ， 摇 匀。 在 4 3 7 n m铡 其 吸光度并代人 回归方程 计算出总类黄酮化合物 的含量。 -k： 酚类化合 物和 固兰 B试 剂反应生 成重氨化合 物在 5 0 8 n 渡长有是大吸收 。 -k- k： 类黄酮化台 物和 z 一 形 成的络台 物在 4 3 7 n m 波长有最 大吸收 。 1 3 2 3 水相 溶液中总类黄酮化台物 的薄层分析 样品制备： 取一定量“ 水相” 液蒸去溶剂， 加 1 ： 1的甲醇 2 m o l L盐酸溶液 ， 在 沸水浴 中水解 6 0 ra i n ， 使类黄酮甙水解成 研究确定适用 于笃斯越橘果 汁的辅助澄清剂有 明胶 、 硅胶和膨 润土 。 3 2 果胶酶 一明肢 一硅肢 一膨润 土蹬清笃斯果 汁的研 究 笃斯越橘果汁经果腔酶处理后， 玲却至室温， 添加 3 0 硅 胶溶 液混匀 ， 再添加 明胶溶液混 匀 ， 静 置澄清 6 0 ra i n 后进行