硫丹对草鱼乙酰胆碱酯酶及抗氧化酶活性的影响.pdf

生态环境学报 2 0 1 1 ， 2 0 ( 1 0 ) ： 1 4 9 6 1 5 0 2 h t t p ： w ww j e e s c i t o m E - ma i l ： e d i t o r j e e s c i c o m 硫丹对草鱼乙酰胆碱酯酶及抗氧化酶活性的影响 武焕 阳 1 ,2 ，O S C A R O r t e g o n ，许莉佳 1 ,2 ， 靳涛 ， 一 ，彭开琴 ，丁诗华 ，一 ，李云 ，2 1 西南大学动物科技学院，重庆 4 0 0 7 1 5 ；2 重庆市水产科学重点实验室，重庆 4 0 0 7 1 5 摘要：研究了硫丹暴露对草鱼肝脏、肌肉抗氧化酶及脑乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明，硫丹 2 4 h暴露可诱导草鱼脑 A C h E活性， 当暴露时间延长或质量浓度升高时， A C h E活性表现为受抑制， 1 2 0 h较高质量浓度组抑制率为 4 1 8 和 5 6 2， 抑制率与暴露时间呈良好的线性相关。硫丹暴露 2 4 h后 ，草鱼肝脏及肌肉 S O D、GS H P x活性受到显著影响，表现出先诱 导后缓慢降低的趋势，1 2 0 h 后 S O D活性显著低于对照组水平，G S H。 P x活性与对照组无显著差异。在抗氧化酶受到影响的 同时，鱼体脂质过氧化 L P O程度不断上升，组织 MDA含量逐渐增大，9 6 h达到最高值。硫丹可影响草鱼 AC h E及抗氧化 酶活性 ，其变化可作为生物标志物，来评价化学污染物对水生动物的生物学效应。 关键词：硫丹；草鱼；乙酰胆碱酯酶( AC H E ) ；抗氧化酶 中图分类号 ：XI 7 1 5 文献标志码 ：A 文章编号 ：1 6 7 4 5 9 0 6( 2 0 1 1 )1 0 1 4 9 6 0 7 随着农业生产的不断发展 ，农药在环境 中的残 留日益严重， 有机氯农药因其具难生物降解和具有 有潜在的生物放大作用 ，已被认 为是最具环境危害 效应的化学物质之一 。 硫丹( E n d o s u l f a n ) ， 一种有机 氯杀虫剂 ，1 9 5 4年 由德国 H o e c h s t 公司研制开发 ， 因其具有 良好的胃毒和触杀作用 ，广泛应用于农业 生产 】 ，目前我国部分地区仍在大量使用【 2 J 。随着 硫丹的大量使用，和其具有潜在的迁移作用，全球 环境中如大气、土壤、沉积物、 水体甚至食物中已 普遍检测出硫丹的存在l 4 J 。硫丹对鱼类及水生无脊 椎动物剧毒，其在水体中的半衰期长达 3 5 1 5 0 d ， 硫丹会潜在威胁到水生生物的生命健康及水生生 态系统 的稳定 J 。 因此研究硫丹对鱼类的毒理学效 应 ， 对正确反映水环境硫丹污染持久性及其对周围 人体健康可能产生的潜在风险具有重要意义。 乙酰胆碱酯 酶( a c e t y l c h o l i n e s t e r a s e s ，AC H E ) 是 生 物神经传导中的一种关 键酶， 维持体 内胆碱能神 经 冲动在神经传导中起着关键作用【 8 。有机氯农药 可抑制动物靶组织 AC h E活性 ，从而影响神经系统 的信息传导，严重时可导致机体功能紊乱 、 行为改 变、 瘫痪甚至死亡 J ， A C h E作为经典的毒理学指 标可以反应水生生物受到农药胁迫的危害程度l 1刚 。 污染物可诱导水生生物细胞内活性氧( r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s ， RO S ) 的形成 ，如 O 2 、OH、H 2 O 2 、 R OO H等【 j “ ，正常情况下 ，细胞 内的抗氧化酶类 ： 超氧化物歧化酶( s u p e r o x i d e d i s mu t a s e ， S O D) 、谷胱 基金项 目： 作者简介： 收稿日期： 甘肽过氧化物酶( g l u t a t h i o n e p e r o x i d a s e ， GS H P x ) 等 可以清除 R O S ，而当 R O S的产生与清除平衡被扰 乱，细胞无法清除过多的 R O S时，就会导致机体 的氧化损伤1 2 - 13 】 。许多研究证明，细胞抗氧化防御 系统是 目前评价污染物对生物机体 的毒性影响应 用较多的生物标志物 ，常被用 以警示性指示环境污 染的变化 1 4 - 1 5 。另有研究表明， 生物体内活性氧的 累积可进而引发或加剧脂质过氧化( 1 i p i d p e r o x i d e s ， L P O) ，丙二醛( ma l o n d i a l d e h y d e ， MD A) 是 L P O的最 终产物 ，常被用作 L P O的指示指标【 1 。 目前硫丹对动物 的毒性 效应研究 国内外 已有 报道， 但实验动物主要集中在高等哺乳动物或部分 鱼类【 J J ， 对草鱼 C t e n o p h a r y n g o d o n id e l l u s 亚急性 暴露条件下 A C h E活性及抗氧化防御系统的影响还 未见报道。本文以草鱼为受试动物 ，研究了硫丹对 草鱼脑 、 肝脏及肌 肉AC h E及抗氧化酶活性 的影响 ， 在一定程度上弥补 了硫丹 的水生生物毒性数 据的 不足 ，同时也为我国渔业资源和水生态系统的保护 提供理论依据。 l 材料 与方法 1 1 试验用鱼 试验用草鱼购 自重庆市北碚歇马鱼种场 ，体长 ( 1 1 2 + 1 0 ) C lT I ，体质量( 4 5 4 4 - 4 8 ) g ，试验前在本实 验室水族箱内驯化 1 0 d以上，驯化期间正常喂食， 自然死亡率 5 mg L 。 国家 自然科学基金项H( 3 0 6 7 0 2 2 6 ) ；重庆市自然科学基金项 H( CS T C ， 2 0 0 7 B B1 3 7 3 ) ( 1 9 8 6年生) ，男，硕士研究生 ，主要从事水生环境毒理方面研究。E - ma i l ： w t t h u a n y a n g 1 6 3 c o rn 通信作者，E ma i l ： s h h d i n g y o o c o rn c n 2 0I 1 0 8 I 4 生态环境学报第 2 0卷第 l 0 期 ( 2 0 1 1 年 1 0月 ) 3 0 _ 25 20 毛 基 1 5 琶 1 0 妲 8 5 0 2 4 48 7 2 9 6 l 2 0 t h 图 3硫丹对草鱼肝脏 S O D活性的影响 Fi g 3 E ffe c t s o f e n d o s u l f a n o ll t h e a c t i v i t i e s o f S OD i n l i v e r s o f Ct e n o ph a r y n g o d o n i d e l l u s 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 0 t h 图 4硫丹对草鱼肌肉 S O D活性的影响 F i g 4 E ffe c t s o f e n d o s u l f a n o n t h e a c t i v it i e s o f S OD i n mu s c l e s o f C t e n o ph a r y n g o d o n i d e l l u s 的影响结果。可以看 出，各暴露组草鱼肝脏和肌肉 S OD活性明显升高 0 0 5 ) ， 4 8h 后含量有所增加 ， 7 2h后除 0 1 8 g 暴露组肌肉 MD A 含量升高不显著外 ，其余 姗 瑚 瑚 如 。 一 _暑 目n 】 ， ( 喜 一 烬x d - H 0 2 0 8 6 4 2 O 一 曲 吕 n) 苣 一 蜒口0 们 舳 柏 加 0 gn ) ， ( 母 0 d 蚶蜒x d _H 0 武焕阳等 ：硫丹对草鱼乙酰胆碱酯酶及抗氧化酶活性的影响 亘 吾 董 电 2 4 48 7 2 9 6 1 2 0 t h 图7硫丹对草鱼肝脏 MD A含量的影响 Fi g 7 Effe c t s o f e n d o s u l f a n o n M DA c o n t e n t s i n l i v e r s o f Ct e n o ph a r y n g o d o ni d e l l u s 口o g g L 嘲o1 8 g L 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 O h 图 8硫丹对草鱼肌肉 MD A含量的影响 F i g 8 Effe c t s o f e nd o s u l f a n o n MDA c o n t e n t s in mu s c l e o f Ct e n o ph a r y n g o d o n i d e l l u s 各处理组MD A含量显著升高 0 0 5 或P 0 0 1 ) 。 随胁迫时间的延长，MD A 的含量逐渐升高。9 6 h 时 0 3 6 和 0 7 1 g L 暴露组肝脏 MDA含量达到最 大值，比对照组分别升高了 2 4和2 2 倍( 尸0 0 1 ) ， 0 7 1 g L 暴露组肌肉 MD A含量达到最高，与对 照组比升高了2 -3 倍( 尸 0 0 1 ) ， 1 2 0 h 后肝脏和肌肉 MD A 含量仍处于高位均明显高于对照组水平 0 o 1 ) 。肝脏和肌 肉 MDA含量持续升高 ，表明组织 细胞受到了过氧化损伤。 3 讨论 3 1 硫丹对草鱼脑 AC h E活性的影响 A C h E在胆碱能传输中起着重要作用，它可以 水解乙酰胆碱( a c e t y l c o h o l i n e ，Ac h ) ，从而 中止神经 冲动传输， A C hE 活性变化可干扰胆碱能神经传导， 影响动物机体运动和平衡及其正常的生命活动 2 7 。研究发现，日 本青鳝 O r y z i a s la t ip e s 和稀有绚 鲫 G o b io c y p r i s r a r u s 在硝基苯 2 4h短期暴露下 ， 脑 AC h E活性均表现出剂量相关 的诱导作用【2 引 。本试 验也发现， 硫丹短期暴露，草鱼脑 A C h E活性明显 升高，这可能是鱼体对损伤性刺激的响应。A C h E 活性增强表明神经递质胆碱水解增强， 动物可通过 增强 A C h E 活性来补偿药物暴露对其产生的胁迫 2 9 0 胡国成等Lj 叫 发现 ，0 1 7 0 7 4 g L 范围内硫丹 对斑马鱼 Da n i o r e r i o脑 A C h E活性具有抑制作用 ， 抑制率 3 4 7 9 ； D u t t a r 等n 。 】研究发现， 1 0 L 硫丹 可抑制 蓝鳃 太 阳鱼 L e p o mis m a c r o c h i r u s脑 A C h E活性，抑制率 3 6 2 3 0 ；B a l l e s t e r o s 等【j l J 研究结果显示 ，雌性 四眼青 J e n y n s i a m u l t id e n mt a 经 0 0 7 2 L 硫丹暴露后， 其肌肉A C h E活f生 受到 明显抑制。本试验暴露时间延长 ，较高质量浓度组 A C h E活1生 大幅下降，表现出良好的线性关系，这 说明随着硫丹暴露时间及质量浓度 的加大 ，草鱼脑 组织受到的神经毒性增大，可能是大量的 R O S抑 制 了酶的活力 ，从而影响了细胞正常产生 AC hE 以 及免疫酶 ，导致其活性下降【3 。本实验结果显示 ， 在不同处理组之间， A C h E抑制率在 0 2 5 6 2 之 间，与已经报道的结果存在差异，导致这种差异的 原因可能是试验鱼品种 、水质及管理条件不 同所致 3 引 。综上所述 ，硫丹暴露下草鱼幼鱼脑组织 AC h E 的活性变化反映了鱼体在不同阶段对硫丹污染的 响应，A C h E可以作为评价硫丹对鱼类毒性影响程 度的潜在生物标志。 3 2 硫丹对草鱼抗氧化防御 系统的影响 氧化损伤是环境 污染 物引起 生物毒性的重要 原因之一 ，化学杀虫剂可诱导 RO S的大量生成， 引 起细胞 内抗氧化物 质的活性或含量发生变化 。 S O D、G S H P x 是水产动物体内重要的抗氧化酶， 正 常情况下 ，两种酶可联合清除活 R OS ，保护动物免 受 R O S的伤害， 在机体防御过氧化损伤过程中起到 关键作用【 3 引 。本实验 中，肌肉组织 的抗氧化酶活力 整体上低于肝脏， 这可能主要是由于它们的生理功 能不同，肌肉主要执行运动功能，而肝脏是解毒器 官 ，也是主要 的靶器官。 S O D是催化 0 2 。发生歧化反应 的一类金属酶 ， 主要分布于细胞胞浆和线粒体的基质中， S O D可将 02 歧化为 H2 02 与 O2 J 。硫丹对水生动物具有很 高的毒性 ，9 6 h L C 5 0 一般在 5 L 以下p J 。在 本实验中， 草鱼暴露于硫丹 2 4 h 后， 各暴露组 S O D 活性均出现了不同程度 的诱导 ，说 明硫丹的暴露已 经对草鱼的肝脏和肌肉产生了明显的氧化胁迫。这 与 Ne e r a j 等【 4 o J的研究结果相似 ， 2 9 L 硫丹对橙 色莫桑 比克罗非鱼 O r e o c h r o m i s mo s s a mb ic u s肝脏 和鳃 S O D具有显著的诱导效应。丁诗华等【4 l J发现， 草鱼暴露与十二烷基硫酸钠初期时 ， 其各组织 S O D 活性表现为诱导， 而当污染物质量浓度升高和暴露 时间延长时，酶活性呈下降趋势。本研究也发现， 加 ：2 m 0 一 二。 目 县 ， ( 鲁 旦 1 5 0 0 生态环境学报第 2 0 卷第 1 0期 ( 2 0 1 1 年 1 O月 ) 硫丹暴露初期草鱼肝脏和肌 肉 S O D 活性表现为诱 导 ， 而 当暴露持续 1 2 0h后 ， 各暴露组 S O D活性显 著低于对照组 ，表现为抑制。这可能是因为硫丹长 时间胁迫下鱼体内大量产生的 ROS ，超过了 S O D 的清除能力，造成组织细胞的损伤，使 S O D 活性 降低。 GS H P x 的 主要 作 用 是 清 除 有 机 过 氧 化 物 f R OO H ) ，并具有清除 H 2 0 2 的功能4 2 o 硫丹胁迫对草 鱼 G S H P x的活性同样有明显的影响。 在暴露初期， 硫丹对草鱼G S H P x 活性有诱导作用， 但随着硫丹质 量浓度的增加和暴露时间的延长，GS H P x活性逐渐 下 降， 提示 草鱼 受到硫丹 轻度 胁迫 时突然 产生 的 R O S对抗氧化酶有诱导作用， 导致 G S H P x活性短 暂升高； 而高质量浓度硫丹胁迫或长期暴露将导致 R O S过度累积， 并对 G S H P x本身造成损伤， 因而 G S H P x活性下降， 但未显著低于对照组，这可能 是由于 G S H P x的防御能力较 S O D高的缘故 J 。 本实验结果与 B a ll e s t e r o s 等 的研究结果类似，四 眼青 暴露于 0 0 1 4 g L 。硫丹 中 2 4 h ，脑 、肠 GS H P x活性表现为诱导 ，当硫丹质量浓度升高至 0 0 7 2 Ix g L 时，各组织 G S H P x 活性均显著降低。 但与本实验结果不同的是 ，四眼青鲻肝脏 GS H P x 活性从硫丹暴露一开始就表现为抑制 ，这可能是 由 于不同物种靶器官对外源污染物的敏感程度不同 所致。 L P O过程是一个产生 R O S和 R OS参与的链式 反应 ，MDA是 L P O的最终产物 ，研究表 明，组织 MD A 的含量与膜质氧化损伤程度密切相关 J 。以 有研究表明 ， 杀虫剂可以导致组织 L P O， 引起 MD A 含量升高【4 6 。K a l e n d e r 等 J发现 ，2 mg k g 硫丹经 口暴露 Wi s t a r 大 鼠 6周后 ，其心脏 MDA含量显著 升高。A t i f 等L4 驯 将翠鳢 C h a n n a p u n c t a t u经硫丹( 5 g L ) 暴露 2 4h 后发现 ， 鳃 、 肝 、肾 L P O程度 明显 升高。本试验结果也表明，MD A 含量均随硫丹胁 迫质量浓度的增加或时间的延长有显著的升高 ，证 实 了一定质量浓度的硫丹胁迫可引起草鱼 的 L P O 水平增高，MD A 含量的变化可作为机体受到氧化 胁迫的指示 。同时 ，本试验发现 ，MD A 含量 与暴 露时间存在一定的时间效应关系 ，较高暴露组和 较低暴露组 MD A含量分别在 9 6 h 和 1 2 0 h 时达到 最高峰，这可能预示着生物体抗氧化酶系统遭到破 坏，S O D、G S H P x 活力在 9 6 h 后的明显下降或许 也反映了这一点 。 4 结论 ( 1 ) 2 4 h 硫丹暴露可以诱导 A C h E活性的升高， 9 6 h 暴露 A C h E活性呈下降趋势， 高质量浓度组表 现 明显 ，抑制率与暴露时间存在 良好 的线性关系。 f 2 ) 硫丹可对草鱼的肝脏和肌 肉产生氧化胁迫 ， 其 S OD、 GS H P活性表现为相似的变化趋势 ，即先 诱导后抑制 ，但 S O D 抑制率在后期表现的更为明 显。 随着硫丹胁迫时间的延长， L P O程度逐渐上升， 并在 9 6 h 后达到最高， 预示硫丹已经对草鱼组织造 成了氧化损伤。 ( 3 ) A C H E、S OD、GS H P x 3种酶活性及 MDA 含量可以作为生物指示指标来衡量水体中化学污 染物对水生动物机体生理机能损伤情况，以及化学 污染物引起水生动物机体组织受损的最低质量浓 度值 。 参考文献 ： 1 】 K UL L MA N S W， MA T S U MUR A F Me t a b o l i c p h wa y s u t i l i z e d b y P h a n e r o c ha e t e c h r ys o s p o r i u m f o r d e g r a d a t i o n o f t h e c y c l o d i e n e p e s t i c i d e e n d o s u l f a n J A p p l i e d a n d E n v i r o n me n t a l Mi c r o b i o l o g y , 1 9 9 6 ， 6 2 ( 2 ) ： 5 9 3 6 0 0 2 2 李 富根，张文君，王 以燕， 硫丹 的使用风险和管理动态【 J 农药， 2 0 0 9 ， 4 8 ( 7 ) ： 5 4 2 5 4 4 L I F u g e n ，Z H A NG We n j u n ， WA NG Y i y a n A p p l i c a t i o n R i s k a n d L a t e s t Ma n a g e me n t D e v e l o p me n t o f E n d o s u l f a n J A g r o c h e mi c a l s ， 2 0 0 9 ， 4 8 ( 7 ) ： 5 4 2 5 4 4 3 】 任南琪，张晓丹， 周广红， 等 硫丹致生精细胞凋亡及其机制研究 J 环境科学， 2 0 0 8 ， 2 9 ( 2 ) ： 3 8 6 - 3 9 0 REN Na n q i ，ZHANG Xi a o d a n，ZHOU Gu a n g h o n g ，e t a 1 I n d u c e d a p o p t o s i s and me c h a n i s m o f e n d o s u l f a n i n m o u s e g e r m c e l l s J ， En v i r o n me nta l S c i e n c e ， 2 0 0 8 ， 2 9 ( 2 ) ： 3 8 6 3 9 0 4 MI L E S C J ， P F E U F F E R R J P e s t i c id e s i n c ana l s o f S o u t h F l o ri d a J Ar c h i v e s o f E n v i r o n me n tal Co n t a mi n a t io n a n d T o x i c o l o gy , 1 9 9 7 ， 3 2 ( 4 ) ： 3 3 7 - 3 4 5 5 S U NDE R A M R I M， C H E NG D M H， T HO MP S O N G B T o x i c i t y o f e n d o s u l f a n t o n a t i v e and i n t r o d u c e d fi s h i n Au s tr a l i a J E n v i r o nm e n t a l T o x i c o l o g y and C h e mi s t r y , 1 9 9 2 ， 1 1 ( 1 O ) ： 1 4 6 9 1 4 7 6 【 6 】 H AN S R K， G U P T A R C ， B E G M U T o x i c ity a s s e s s me n t o f f o u r i n s e c t i c i d e s t o e a r t h wo rm P h e r e t i m a p o s t h u m a J B u l l e t i n o f E n v i r o n me n ta l C o n tam i n a t i o n a n d T o x i c o l o gy, 1 9 9 0 ， 4 5 ( 3 ) ： 3 5 0 - 3 6 4 7 R O ME O F QU I J A N O M D Ris k a s s e s s me n t i n a t h i r d wo r l d r e a l i ty ： a ll e n d o s u l f a n c a s e h i s t o r y , I n t J Oc c u p J E n v i r o nm e n t a l H e a l t h P e r s p e c t i v e s ， 2 0 0 0 ， 6 ( 4 ) ： 3 1 2 3 1 7 8 F U L T O N M H， K E Y P B A c e tyl c h o l in e s t e r a s e i n h i b i t i o n i n e s t u a r in e fi s h an d i n v e r t e b r a t e s a s i n d ic a t o r o f o r g an o p h o s p h o r u s ins e c t i c id e e x p o s u r e and e ff e c t s J E n v ir o nm e n tal T o x i c o l o g y and C h e mi s t ry, 2 0 0 1 ， 2 0 ( 1 ) ： 3 7 - 4 5 9 NA Q VI S M， V A I S N A V I C B i o a c c u mu l a t i v e p o t e n t i a l a n d t o x i c i t y o f e n d o s u l f a n i n s e c t i c i d e i n n o n - t a r g e t ani m a l s 【 J J C o mp a r a t i v e B i o c h e mi s t r y a n d P h y s i o l o g y , 1 9 9 3 ， 1 0 5 ( 3 ) ： 3 4 7 3 6 1 1 0 DU T T AR H M，A R E N DS D A E ff e c t s o f e n d o s u l f a n o n b r a i n a c e t y l c h o l in e s t e r a s e a c t i v i ty i n j u v e n i l e b l u e g i l l s u n fi s h J E n v i r o nm e n ta l R e s e a r c h ， 2 0 0 3 ， 9 l ( 3 ) ： 1 5 7 - 1 6 2 【 1 1 】V A L A V A NI DI S A，V L A HO G I A NN I L DA S S E NA K I S M，e t a 1 M o l e c u l ar b i o ma r k e r s o f o x i d a t iv e s t r e s s i n a q u a t i c o r g a n i s ms i n r e l a t i o n t o t o x i c e n v i r o nm e n t a l p o l l u t a n t s J E c o t o x i c o l o g y and E n v i r o nm e n t a l S a lty , 2 0 0 6 ， 6 4 ( 2 ) ： 1 7 8 1 8 9 1 2 】 B AG C HI D ， B AG C HI M， EH AS S O UNA ， e t a 1 n v i tr oandi n v i v o g e n e r a t i o n o f r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s ，DNA d a ma g e a n d l a c t a t e d e h y d r o g e n a s e l e a k a g e b y s e l e c t e d p e s t i c i d e s J 】 T o x i c o l o g y ,1 9 9 5 ， 武焕阳等：硫丹对草鱼乙酰胆碱酯酶及抗氧化酶活性的影响 1 5 0 1 1 【 ) 4 ( 1 ) ： 1 2 9 - 1 4 0 1 3 H AL L I WE L L B ， GU T T E R I DG E J M C F r e e R a d i c a l s i n B i o l o g y a n d Me d i c i n e M O x f o r d ： O x f o r d U n i v e r s i t y P r e s s ， 1 9 9 9 ， 5 4 3 【 1 4 】 K L U MP P G F UR L A N C M， DO MI N GOS M， e t a 1 R e s p o n s e o f s t r e s s i n d i c a t o r s a n d g r o h pa r a me t e r s o f T i b o u c h i n a pu l c h r a Co g n e x po s e d t o a i r an d s o i l p o l l u t i o n n e a r the i n d u s t r i a l c o mp l e x o f C u b a t a o ， Br a z i l J S c i e n c e o f t h e T o t a l E n v i r o n me n t ， 2 0 0 0 ， 2 4 6 ( 1 ) ： 7 9 9 1 【 1 5 A NA E C E C I L I A I L ， O L G A L A， e t a 1 A n t i o x i d a n t r e s p o n s e s t o a z i n p h o s me t h y l an d c a r b a r y l d u r i n g t h e e mb r y o n i c d e v e l o p me n t o f the t o a d R h i n e H a( B u f o )a r e n a r u m Hans e l J A q u a t i c T o x i c o l o g y , 2 0 0 9 ， 9 3 ( 1 ) ： 3 7 - 4 4 1 6 】MO R A L E S A E ，P E R E Z J I ME N E Z A，HI DA L O G M C ，e t a 1 Ox i d a t i v e s t r e s s an d an t i o x i d an t d e f e n s e s a f t e r p r o l o n g e d s t a r v a t i o n in De n t e x d e n t e x l i v e r J C o mp a r a t i v e B i o c h e mi s t r y a n d P h y s i o l o g y T o x i c o l o g y&P h a r ma c o l o g y ： C B P , 2 0 0 4 1 3 9 ( 1 ) ： 1 5 3 1 6 1 1 7 】罗义， 施华宏，王晓蓉， 等 2 ， 4一二氯苯酚诱导鲫鱼肝脏 自由基的 产生和脂质过氧化 J 环境科学， 2 0 0 5 ， 2 6 ( 3 ) ： 2 9 3 2 LUO Yi ， S HI Hu a h o n g ， WANG Xi a o r o n g ， e t a 1 F r e e Ra d i c a l Ge n e r a t i o n an d L i p i d Pe r o x i d a t i o n I n d u c e d b y 2 ， 4 一 Di e h l o r o p h e n o l i n L i v e r o f C a r a s s i u s a u r a t u s J E n v i r o nm e n t a l S c i e n c e ， 2 0 0 5 ， 2 6 ( 3 ) ： 2 9 3 2 【 l 8 】张漾，周显青 硫丹对小鼠红细胞免疫功能的影响 J 动物学杂志， 2 0 1 0 ， 4 5 ( 1 ) ： 5 0 - 5 8 ZHANG Me n g ，Z HOU Xi an q in gE ffe c t o f e n d o s u l f an o n i mmu n e f u n c t i o n o f e r y t h r o c y t e s i n mic e J C h i n e s e J o u r n a l o f Z o o l o g y , 2 0 1 0 ， 4 5 ( 1 ) ： 5 0 5 8 【 1 9 A MA R DE E P J ， VI P A N K M S U DH E E R K， e t a 1 5 - A mi n o s a l i c y l ic a c i d r e v e r s e s e n d o s u l f a n - i n d u c e d t e s t i e u l a r t o x i c i ty i n m a l e r a t s J Mu t a t i o n R e s e a r c h ， 2 0 0 5 ， 5 8 5 ( 1 ) ： 5 0 - 5 9 【 2 O 】C H I U S N q DI E T R I C H P K NU T - E RIK e t a 1 As s e s s in g t h e s e n s i t i v i ty o f A t la n t i c s a l mo n( S a l m o s a l a r )t o d i e t a r y e n d o s u l f an e x p o s u r e u s in g t i s s u e b i o c h e r n i s t r y and h i s t o l o gy J A q u a t ic T o x i c o l o gy, 2 0 0 7 ， 8 4 ( 3 ) ： 3 46 - 3 5 5 2 1 AN A M C ， A NT O NI O F MAR I A A R Ni l e t i l a p i a( O r e o c h r o mis n i l o t i c u s ) ，l iv e r m o r p h o l o gy, C Y P1 A a c t i v i t y and t h y r o i d h o r mo n e s a f t e r and o s u l f a n d i e t a r y e x p o s ure J P e s t ic i d e B i o c h e mi s t r y and P h y s i o l o gy, 2 0 0 7 ， 8 9 ( 3 ) ： 2 3 0 - 2 3 6 【 2 2 】韦进宝， 吴峰， 钱沙华，等 环境监测手册【 M 北京：化学工业 出 版社， 2 0 0 6 ： 2 4 6 2 5 0 WE I J i n g b n o ，WU F e n g ，QI A N S h a h u a ，e t a 1 E n v i r o nm e n t a l Mo n i t o ri n g Manu a l M B e ij i n g ：C h e mi c a l I n d u s t r y P r e s s ，2 0 0 6 ： 2 4 6 2 5 0 2 3 李龙，陈家垫 现代毒理学实验技术原理与方法 M 北京： 化学 工业出版社， 2 0 0 5 ： 1 4 5 1 4 6 L I L o n g ， CHEN J i a k u n P r i n c i p l e s o f M o d e m Ex p e r i me n t a l T e c h n i q u e s a n d Me t h o d s o f T o x i c o l o gy M B e ij i n g ：C h e mi c a l I n d u s tr y P r e s s ， 2 0 0 5 ： 1 4 5 1 4 6 2 4 】 H A B I G W H ， P A BS T M J ， J A C OB Y W B Gl u t a t h i e n e S - tr ans f e r a s e s ， t h efi r s t e n z y ma t i c s t e pi nt h eme r c a p t u r i c a c i df o rm a t i o n 【 J J o u r n a l o f B i o l o gy C h e mi s t r y , 1 9 7 4 ， 2 4 9 ( 1 ) ： 7 1 3 0 - 7 1 3 9 2 5 李合生植物生理生化实验原理和技术 M 北京：高等教育出版 社 2 0 0 3 ： 1 6 4 1 6 9 L I He s h e n g Pl a n t Ph y s i o l o g i c a l a n d Bi o c h e mi c a l P r i n c i p l e s an d E x p e ri me n t a l T e c hni q u e s M B e ij i n g ： H i 曲e r E d u c a t i o n P r e s s ， 2 0 0 3 ： 1 6 4 1 6 9 2 6 B R ADF O R D M M A r a p i d and s e n s i t i v e me t h o d f o r t h e q u a n t i t a t i o n o f mi c r o g r am q u a n t i t i e s o f p r o t e i n u t i l i z i n g t h e p ri n c i p l e o f p r o t e i n d y e b i n d i n g J A n a l y t i c a l B i o c h e mis t r y , 1 9 7 6 ， 7 2 ( 1 ) ： 2 4 8 2 5 4 2 7 B R E T AU D S ， T O UT A N T J P ，S AG L I O P E ff e c t s o f c ar b o fur an， d i uro n ，and n i c o s u l f u r o n o n a c e tyl c h o l i n e s t e r a s e a c t i v i t y i n g o l d fi s h ( C a r a s - s i u s a u r a t u s ) J E e o t o x i c o l o gy and E n v i r o n me n t a l S a f e t y , 2 0 0 0 ， 4 7 ( 2 ) ： 1 1 7 - 1 2 4 【 2 8 】周群芳， 傅建捷， 孟海珍，等 水体硝基苯对 日本青鳓和稀有纳鲫 的亚急 性毒理 学效应 J 中 国科学 B 辑：化 学，2 0 0 7 ，3 7 ( 2 ) ： l 9 7 2 0 6 Z HO U Q u n f ang ， F U J i ang i i e ， ME NG Ha i z h e n ， e t a 1 S u b a c u t e t o x i c i ty o f n i tr o b e n z e n e o n O r y z i a s l a 和 e s a n d G o b io e y p r is r a r u s i n w a t e r J S c i e n c e i n C h i n a( S e ri e s B ： C h e m i s t r y ) ， 2 0 0 7 ， 3 7 ( 2 ) ： 1 9 7 2 0 6 2 9 MI R O N D S ， C R E S T A NI M， S H E T T I N GE R M R ， e t a 1 E ff e c t s o f t h e h e r b i c i d e s c l o ma z o n e ， q u i n c l o r a c an d me t s u l f u r o n me t h y l o n a c e t y l c h o l i n e s t e r a s e a c t i v i ty i n the s i lv e r c a t fi s h( R h a m d i a q u e l e n ) ( H e p t a p t e r i d a e ) J E c o t o x ic o l o g y and E n v i r o n me n ta l S a f e ty ,2 0 0 5 ， 6 l ( 3 ) ： 3 9 8 - 4 0 3 3 O 胡国成，甘炼，吴天送，等 硫丹对斑马鱼的毒性效应 【 J 】 动物学 杂 志， 2 0 0 8 ， 4 3 ( 4 ) ： 1 - 6 HU Gu o c h e n g ，GAN Li an ， W U T i a n s o ng ， e t a 1 T o x i c o l o g i c a l e ffe c t s o f e n d o s u l f an o n D a n i o r e r i o f J C h i n e s e J o u r n a l o f Z o o l o gy, 2 0 0 8 ， 4 3 ( 4 ) ： 1 - 6 【 3 1 B A L L E S T E R OS M L ，D UR A ND O P E ，NO R E S M L ，e t a 1 E n d o s ulf a n i n d u c e s c h a n g e s i n s p o n t a ne o u s s wi mmi n g a c t i v ity a n d a c e t y l c h o l in e s t e