油茶籽壳总黄酮的提取及抗氧化研究.pdf

第 l 0卷 2 0 1 O 第 1期 年2 月 中 国 食 品 学 报 J o u r n a l o f C h i n e s e I n s t i t u t e o f F o o d S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y Vo 1 1 0 No 1 Fe b 2 0 1 O 油茶籽 壳总黄酮的提取及抗氧化研究 姜天 甲 应铁 进 陈秋平 康 海权 沈建 福 ( 浙江大学生物 系统工程与食 品科 学学院 杭 州 3 1 0 0 2 9 ) 摘要研究油茶籽壳 中总黄酮类物质的提取工艺 ， 探讨 影响提取 率的主要 因素 通过 正交试验确定最佳提取工 艺。通 过 D P P H 法 、 F RAP法 、 OH 清 除 能 力 3个体 系对 不 同溶 剂 提 取 物 的 体 外 抗 氧 化 能 力进 行 研 究 试 验 结 果 表 明 ：在 3 0倍样 重 的 6 0 乙醇 中浸 泡后 ， 4 0下超声 波辅 助萃取 4 5 m i n 油茶 籽 壳中的 总黄 酮提 取 率为 1 7 1 。此外 ， 不 同溶剂提取物 中黄酮提 取率差异很 大。在 D P P H体 系中， 油茶籽 壳 6 0 乙醇提 取物的 I C 为 7 8 1 g mI ，清除能 力强于其它溶剂提取物与对照品竹叶提取物( I C 5 0为 1 0 2 5 tx g m I ，主要成分 为竹 叶黄 酮) ( P 料 液 比 提 取 温 度 提 取 时间 。 通 过 正交试 验 、 方差 分 析及 各个 处理 间 差异显著性检验 ， 4种因素的最佳组合为A ： B C D ， 即 6 0 乙 醇 ， 温 度 4 0 ， 料 液 比 1 ： 3 0 ， 超 声 波 提 取 4 5 mi n 。在此 条件 下 测得 油 茶壳 中总黄 酮 的提 取率为 1 7 1 。 表 1 正 交 试 验 因素 水 平 表 L 9 ( 3 ) T a b l e 1 F a c t o r s a n d l e v e l s o f o r t h o g o n a l e x p e r i me n t 表 2正 交试 验 设 计 及 结 果 T a b l e 2 T h e d e s i g n a n d r e s u l t s o f o r t h o g o n a l e x p e r i me n t 2 2油茶 籽 壳 不 同 溶 剂提 取 物 中的 总 黄 酮 提 取 室 从 表 3可 以看 出 ，不 同溶 剂 提取 的总 黄酮 含 量差 异 很大 。 对 于油 茶壳 ， 采 用 6 O 乙醇提 取 的黄 酮 提 取率 为 1 6 0 ， 其 次 是水 提 取 液 、 乙醇提 取 液 和石油醚提取液 。采用石油醚提取的黄酮提取率 仅 为 0 2 3 ，约为 6 0 醇提 取 液 的 1 7 。此外 ， 6 0 乙醇提 取 物干 基 黄 酮含 量 为 4 2 ，显 著 高于 其 它 溶剂 的提 取物( P 纯 乙醇 提 取物 竹 叶提取 物 水 提取 物 石油醚提取 物 ，其 中 6 0 乙醇提取物在 清除 D P P H 的试验中表现出良好 的效果 ，其 I C 铀值为 7 8 1 Ix g mL ， 低 于对 照竹 叶提 取 物 ( 1 0 2 5 I x g mL ) ， 且 明显 低 于其 它 各 提取 物( P 6 0 乙醇 提取 物 水 提取 物 纯 乙醇 提取 物 石 油醚 提取 物 。其 中竹 叶提取 物 与油 茶籽 壳 6 0 乙醇 提 取 物 的还 原性 相 当 ，与 D P P H 体 系 的试 验结 果相 同 说 明极性 偏 大 的溶 剂提 取 物也具 有 一定 的抗 氧化效 果 。 9 8 中 国 食 品 学 报 2 0 1 0 年第1 期 2 5清除羟自由基( OH) 的试验结果 由图 6可 知 ，油茶 籽壳 的各溶 剂提取 物 与竹 7 ( 】 叶提取 物对羟 自由基均 有一定 的清 除作用 。样 品 6 0 浓度对油茶籽壳纯乙醇提取物和竹叶提取物清除 骷5 0 羟基 自由基的能力影响很大。 随浓度的升高 ， 它们 蜒4 0 清除羟基 自由基 的作用增 油茶籽壳纯乙醇提 9 3 0 取 物与 竹 叶提 取 物在 样 品 ： 度 为 5 0 0 I g m L 2 0 时 清 除率相 当 ， 分 别 为 3 9 1 0 9 ， 高于 油茶 1 o 籽壳水 提物 ( 2 2 9 ) ( 尸 0 0 5 ) 。这 与 D P P H、 F R A P n 体系试验结果一致。 3结 论 通过单因素及正交试验得出油茶籽壳总黄酮 的最佳提取工艺条件 ： 在 3 0倍于样重的 6 0 的乙 醇溶 液 中浸 泡 3 0 mi n ， 4 0 c c 下 超声波 提取 4 5 m i n ， 油 茶 籽 壳 中 总 黄 酮 类 化 合 物 提 取 率 最 高 达 1 7 1 。 通 过 D P P H法 、 F R A P法 与清除 羟 自 基 3 个试验体系研究油茶籽各提取物 的抗氧化性 ， 结 果表 明 ：油茶 籽壳 各提 取物 的抗 氧化能 力与其 浓 2 0 0 5 0 0 1 0 0 0 样品质量浓度 g m L 图 6油茶籽壳不 同提取物对 OH的清除效果 F i g 6 OH s c a v e n g i n g c a p a b i l i t y o f d i f f e r e n t c a me l l i a s h e l l e x t r a ct s 度 相关 。在 3个试验 体 系 中油 茶籽壳 6 0 乙醇提 取 物 、纯 乙醇提取 物显 示 出 良好 的抗 氧化 与清 除 自由基 能力 ， 与对照 品竹 叶提 取物 相 当。 因此 ， 油 茶籽壳提取物作为一种有效的 自由基清除剂 ， 具 有很 好 的应 用前 景 。 参 考 文 献 1 】黎先胜我国油茶资源的开发利用研究 湖南科技学院学报， 2 0 0 5 ， 2 6 ( 1 1 ) ： 1 2 7 1 2 9 2 】李振纪油茶【 M】 北京 ：农业 版社 ，1 9 8 0 ： 4 9 3 T o s h i k a z u S ，J i r o A，A t s u k o Y，e t a 1 r W o fl a v o n o l g l y c o s i d e s f r o m s e e d s o f c a me l l i a s i n e n s i s【 J 】 _ P h y t o c h e m i s t r y ， 1 9 9 1 ， 3 0( 3) ： 9 9 1 9 9 5 4 吕晓玲 ， 邱松山， 孙 晓侠 ， 等油茶总皂苷的抗氧化及清除 自由基能力初步研究 J 食品科学 ， 2 0 0 5 ， 2 6 ( 1 1 ) ： 8 6 8 9 5 刘雳 ， 赵正惠茶籽毛油中极性抗氧化物质的研究 J 】中国粮油学报 ， 2 0 0 2 ， 1 7 ( 3 ) ： 4 9 6 潘国庆 ， 梁永欣黄酮类化合物结构与抗氧化活性关系研究 研究与开发 ， 2 0 0 5 ， 1 2 ( 3 ) ： 2 8 3 0 i 7 J S 6 n c h e z Mo r e n o C ，L a r r a u r i J A ，S a u r a C a l i x t o F A A p r o c e d u r e t o m e a s u r e t h e a n t i r a d i c a l e ? c i e n c y o f p o l y p h e n o l s 【 J J _ J o u rna l o f t h e S c i e n c e o f F o o d a n d A g r i c u l t u r e ，l 9 9 8 ， 7 6 ( 2 ) ， 2 7 0 - 2 7 6 8 8 B e n z i e I F F ，S t r a i n J J T h e f e r r i c r e d u c i n g a b i l i t y o f p l a s m a a s a m e a s u r e o f a n t i o x i d a n t p o w e r ：t h e F R A P a s s a y 第 1 0 卷 第 1 期 油茶籽 壳总黄酮的提取及抗氧化研究 f J 1 A n a l y t i c a l B i o c h e mi s t r y ，1 9 9 6 ，2 3 9 ( 1 ) ： 7 0 7 6 【 9 N i c h o l a s S m i m o ff，Q u i n t o n J C u m b e s H y d r o x y l r a d i c a l s c a v e n g i n g a c t i v i t y o f c o m p a t i b l e s o l u t e s J I P h y t o c h e m i s t r y ， 1 9 8 9，2 8 ( 4) ： 1 0 5 7 1 0 6 0 To t a l Fl a v o n o i d s a n d An t i o x i d a n t Ac t i v i t y o f Di ffe r e n t S o l v e n t Ex t r a c t s f r o m S h e l l s o f Oi l t e a ( C a me l l i a o l e if e r a )S e e d J i a n g T i a n j i a Y i n g T i e j i n ( C o g e o f B i o s y s t e m E n g i n e e r i n g a n d C h e n Q i u p i n g K a n g Ha i q u a n S h e n J i a n f u F o o d S c i e n c e ，Z h e j i ang U n i v e r s i t y ，H ang z h o u 3 1 0 0 2 9 ) Abs t r ac t The e x t r a c t i n g t e c h no l o g y a n d t he e f f e c t o f ma i n f a c t o r s o n t he e x t r a c t i n g r a t e o f t o t a l fla v o ne s f r o m t he s h e l l o f o i h e a( C a me I l i a o l e r a )s e e d s we r e s t u d i e d ，t h e o p t i mu m c o n d i t i o n s w e r e d e t e r mi n e d t h r o u g h o r t h o g r a p h i c e x p e r i me n t s T h e s o l v e n t e x t r a c t s we r e s c r e e n e d f o r t h e i r p o t e n t i a l a n t i o x i d a n t a c t i v i t i e s u s i n g t e s t s s u c h a s 1 1 - d i p h e n y l 2 一 p i c r y l h y d r a z y l ( DP P H) ，OH，a n d F RA P i n v i t r o mo d e l s y s t e ms Th e r e s u l t s s h o we d t h a t 3 0： 1 o f 6 0 e t h a n o l wi t h u 1 t r a s o n i e t r e a t me n t l a s t f o r 4 5 mi n c o u l d g e t fla v o n e s a s h i g h a s 1 7 1 I n DP P H s y s t e m t h e 6 0 e t h a n o l e x t r a c t h a d a g o o d a n t i o x i d a n t a c t i v i t y， i t s I C5 0 w a s 7 8 1 z g mL， l o we r t h a n b a mb o o e x t r a c t w h i c h I C5 o w a s 1 0 2 5 Ix g mL， a n d o b v i o u s l y l o w e r t