液体复合酶对草鱼生长、养分消化率及体组成的影响.pdf

- 3 4 中国饲料 2 0 1 1 年第 2 3期 液 体 复 合 酶 对 草 鱼 生 长 养 分 消 化 率 及 体 组 成 的 影 响 武 汉 工 业 学 院 武汉新华扬生物股份有限公司 王 辅 臣黄峰汪华丁斌鹰 周金 敏张伟 【 摘要】以蛋 白质含量 3 5的配合 饲料 作为基础 日粮 ( C A组) ， 在基础 日粮 中直接添加 0 2 0 mL k g液体复合酶 ( C E组) 。 调整配方使饲料蛋 白质含量降至 3 3左右( I组) ， 在 I 组基础上分别添加 0 2 0 mL k g和 O 3 0 mL k g液体 复合 酶 ( 和 组 ) ； 再调 整 配方使 饲料蛋 白质含 量降至 3 2左 右( 组 ) ， 在 组基础 上分 别添加 0 2 0 mL k g和 O 3 0 mL k g液体复合酶( V和组) 。以相应的配合饲料饲养体重 4 6 g左右的草鱼 8 4 d 。结果表 明： C E组草鱼 的增 重率、 特定生长率 、 蛋 白酶和 淀粉酶 活性均 大于 C A组 ， 组和组、 V组和组的增重率 、 特 定生长率 、 蛋 白酶和淀 粉酶 活性 分别大于 I 组和组 。 、 、 V和组草 鱼的增重率、 特 定生长率、 淀粉酶 活性 、 前肠蛋 白酶活性还大于 C A组 ， V和组草鱼的后肠和肝胰脏蛋 白酶活性大于 C A组。各试验组草鱼体 组成差异不显著( P0 0 5 ) 。草鱼对 各试验饲料的干物质、 粗蛋 白质、 粗脂肪和粗灰分 的表观 消化率差异不显著( P0 0 5 ) 。结果说明 ， 在 同一蛋 白质水 平的饲料 中直接添加 0 2 O0 3 0 mL k g 的液体酶均可在一定程 度上提 高草鱼的生长速度 ，促进草鱼的 内源性蛋 白 酶和淀粉酶等消化酶的分泌。添加 O -2 00 3 0 mL k g的液体酶制 剂可适 当降低饲料蛋 白质含量 23， 并不影 响草鱼 生长速度和体 组成 。 f 关键词1 液体复合酶 ； 草鱼 ； 生长； 消化 酶 【 中图分类号 $ 9 6 3 【 文献标识码J A 文章编号 1 0 0 4 3 3 1 4 ( 2 0 1 1 ) 2 3 0 0 3 4 - 0 4 【 A b s t r a c t T h e s t u d y w a s c o n d u c t e d t o d e t e r m i n e e ff e c t s o f l i q u i d m u l t i e n z y m e a d d i t i v e o n g r o w t h p e rf o r ma n c e ， b o d y c o mp o s i t i o n a n d d i e t s d i g e s t i b i l i t y o f g r a s s c a r p ( C t e n o p h a r y n g o d o n i d e l l u s) T h e b a s a l d i e t c o n t a i n e d 3 5 c r u d e p r o t e i n d e fi n e d a s g r o u p C A B a s e d o n C A a d d i n g 0 2 0 mU k g l i q u i d mu l t i - e n z y me t o d i e t wa s d e fi n e d a s g r o u p C E T h e d i e t c o n t a i n i n g l o w e r c r u d e p r o t e i n 3 3 ， w i t h o u t l i q u i d mu l t i - e n z y me ， w a s d e fi n e d a s g r o u p I Ba s e d o n g r o u p I， a d d i n g 0 2 0 mL k g a n d 0 3 0 mL k g l i q u i d mu l t i e n z y me t o d i e t 1 I a n d 1 1 r e s p e c t i v e l y w e r e d e fi n e d a s g r o u p 1 a n d m S i mi l a r t r e a t me n t t o g r o u p I V， V a n d V I ， t h e c r u d e p r o t e i n s o f d i e t s we r e 3 2 ， w i t h 0， 0 2 0 mL k g a n d 0 3 0 mUk g l i q u i d mu l t i e n z y me r e s p e c t i v e l y Gr a s s c a rp wi t h t h e i n i t i a l w e i g h t a b o u t 4 6 g h a d b e e n f e d t w i c e a d a y f o r 8 4 d T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t w e ig h t g a in r a te ， s p e c ifi c g ro w th r a t e o f g r o u p C E w e r e h ig h e r t h a n t h o s e o f g r o u p C A W e ig h t g a i n r a te ， s p e c i fi c g o w th r a t e ， p r o t e a s e a n d a my l a s e a c t i v i t y o f g r o u p l I， m a n d g r o u p V ， V 1 w e r e h i g h e r t h a n t h o s e o f g r o u p I a n d IV ， r e s l J e e t i v e l y We i g h t g a i n r a t e ， s p e c i fi c g r o wt h r a t e ， p r o t e a s e a c t i v i t y a n d a my l a s e a c t i v i t y i n f o r e g u t o f g r o u p I I，m a n d V 1 we r e h i g h e r t h a n t h o s e o f g r o u p CA Me a n wh i l e ， g r o u p V ，I V h a d h i g h e r a c t i v i t y o f p r o t e a s e i n t h e h i n d g u t a n d h e p a t o p a n c r e a s o f g r a s s c a rp t h a n t h o s e o f g r o u p CA Th e r e wa s s i g n i fi c a n t d i f f e r e n c e i n t h e b o d y c o mp o s i t i o n o f gra s s c a rp a mo n g t r e a t me n t g r o u p s ( P 0 0 5) L i q u i d mu t l i e n z y me s u p p l e me n t d i d n o t s i g n i fi c a n t l y i n fl u e n c e t h e a p p a r e n t d i g e s t i b i l i t y o f d r y ma t t e r s ， c r u d e p r o t e i n ， c r u d e f a t ， c r u d e a s h a n d p h o s p h o r u s o f t h i s fi s h ( P0 0 5 ) T h e r e s u l t s s u g g e s t e d t h a t a d d i n g 0 2 0 0 3 0 mL k g l i q u i d mu l t i - e n z y me t o t h e d i e t s o f d i f f e r e n t p r o t e i n l e v e l c o u l d i mp r o v e g r o wt h p e rfo rm a n c e a n d p r o mo t e d i g e s t i v e e n z y me a c t i v i t i e s o f g r a s s c a rp Mo r e o v e r t h e l o we r p r o t e i n l e v e l b u t a d d i n g O 2 0 0 3 0 mUk g l i q u i d mu l t i - e n z y me t o d i e t c o u l d ma k e t h e s i mil a r gro wth p e r f o rm a n c e o f g r a s s c a rp w h i c h f e d h i g h e r p r o t e i n l e v e l d i e t K e y w o r d s 】 l i q u i d mu l t i e n z y m e ； C t e n o p h a r y n g o d o n i d e l l u s ； g r o w t h ； d i g e s t i v e e n z y me 饲料 中添加酶制剂可有效提 高饲料 的利用 率 ， 降低饲料成本 ， 提高养殖效益( 陈喜斌 ， 2 0 0 3 ) 。 目前 ， 在水产酶制剂 的相关研究中， 大多采用直接 添加固态酶制剂 但调质和制粒时的高温可能会 使添加的酶失活 ， 从而影响酶制剂的添加效果。 本 研究以草鱼为研究对象 ，采用后喷涂方式在饲料 2 0 1 1年第 2 3期 中国饲料 中喷涂不同水平的液体复合酶 研究其对草鱼生 长、 养分消化率及体组成的影响， 旨在为液体复合 酶制剂在水产饲料 中的应用提供试验依据。 1 材 料 与方 法 1 1 试验鱼和试验 复合酶 试验用草鱼购 自武 汉东西湖渔场 ， 初始体重 4 6 g左右 。试验前将草 鱼集 中暂养 于 2 mx 1 5 mx 1 5 m的暂养池 中 ， 投 喂基础 日粮驯化 1 周。 挑选体质健康 ， 大小一致的 试验鱼 ， 经药物浸洗后随机分为 9组 ， 每组设 3个 重复 ， 每个重复 3 5尾鱼 ， 随机放入已经消毒的室 内圆形水族箱 ( 直径 8 0 0 a m， 高 6 0 0 c m) 中进行 饲养 ， 试验期为 8 4 d 。 试验用酶制剂为液体水产专用复合酶 ，由武 汉新华扬生物股份有限公司提供。液体复合酶组 成 ： 木聚糖酶 6 0 0 0 I U m L 、 葡聚糖酶 1 O O O U mL 、 甘 露聚糖酶 2 0 0 0 0 U m L和纤维素酶 2 0 0 0 0 U m L 。 1 2试验设计试验采用梯度法 ， 以粗蛋白质含 量 3 5左右的配合饲料作 为基础 日粮 ( C A组) ； 在基础 日粮 中直接添加 O 2 0 mL k g液体复合 酶 ( C E组 ) ； 调整基础 日粮 的大宗原料配方 ， 使饲料 蛋 白质含量降至 3 3左右(I 组 ) ； 在 I组基础上 分别 添加 0 2 0 mL k g和 0 3 0 m L k g液体复合 酶 ( I I 和 组 ) ；再调整配方使饲料蛋白质含量降至 3 2左右( 组 ) ；在组基础上分别添加 0 2 0 m L k g和 0 3 0 m L k g液体复合酶( V和组) 。 各组 日粮组成及营养水平见表 1 。饲料原料 粉碎后 以倍增法充分混合 ，制成 2 m m粒径 的配 合饲料 。采用后喷涂方法将液体酶制剂添加到饲 料 中， 晾干后于低温干燥处保存 ， 备用。 1 3 饲养 管理 采 用循环水 养鱼 ， 2 4 h充气 增 氧 ， 每天投 喂 2次 ， 时间分别为 9 ： 0 0和 1 6 ： 0 0 ， 投 喂率为鱼体重 的 2 3随着鱼体生长调整 投喂量 。每 3 d换水一次 ， 换水量为 1 41 3 ， 保 持水中溶解氧大于 6 m g L ， 试验期间水温 2 5 q C 左 右 ， p H 7 07 5 。 1 4生 长性 能 指 标 测 定 试 验 开 始 前 以及 试 验 结束时 将试验鱼饥饿 2 4 h， 每缸称重。根据采食 量计算增重率、 特定生长率和饵料系数 。 基金 项 目： 武汉市 2 0 1 0年科技供需对 接计 划项 目“ 高效环 保混养草鱼饲料关键技术产业化 ” ( 2 0 1 0 5 1 8 2 4 5 6 6 ) 通讯作者 表 1 饲 料配方及 营养水平 注： ( 1 ) 每 千克 鱼用 多 维含： 维 生素A 7 0 I U ， 维生 素D 3 3 5 万IU ， 维 生素K 3 5 g ， 维生 素E 1 6 g ， 维生 素B - 3 5 g ， 维生 素 7 g ， 维 生 素B 7 g ， 维 生 素B n 0 O o 7 g ， 叶 酸l l6 g ， 泛 酸钙1 6 g ， 肌 醇3 5 g ， 烟 酸3 5 g ，生物 素0 0 3 g ， 维 生素C 3 5 g 。 ( 2 ) 每千 克 鱼 用多 矿 含：M g S 魄 H 20 7 4 5 g ,F e S 0 4 H 20 1 2 5 g ， 痕量 元 素混 合物8 0 g ， 淀 粉或 石 粉5 0 g ； 每 千克 痕 量元 素 混合 物 含： Z n S 0 4 7 H 2 0 3 5 3 g ， M n S O 5 1 6 2 g , C u S 0 4 5 H 2 0 3 1 g ， A l C I3 6 H ： O 1 0 ， C o G 2 6 H 20 1 g , K 1 0 3 3 g 石 粉 或 淀 粉4 4 0 g 。 存活率 = 成活草鱼尾数 投放草鱼尾数； 增重率 = ( 试验末鱼均重一 试验初鱼均重 ) 试 验初 鱼均 重X 1 0 0 ： 特定生长率 = ( 1 n试验末鱼均重一 l n试验初 鱼 均重 ) 试 验 天数x l O 0 ： 饲料系数= 摄取的饲料总重量 ( 试验末鱼总 体重+ 试验 中死亡鱼体重一 试验初鱼总体重 ) 。 1 5 表观消化率测定 以 C r 2 0 为指示剂 ，用虹 吸法 收集粪便 ，采用二 苯碳 酰二肼丙酮法测定 C r 2 0 ， 含量 ( 高民和冯宗慈 ， 1 9 9 3 ) ， 凯 氏定氮法测 定粗蛋 白质含量 ( 杨胜 ， 1 9 9 1 ) ， 计算饲料干物质 、 粗蛋白质、 粗脂肪的表观消化率。 干物质表观 消化率 = ( 1 一 饲料 C r 2 0 含量 中国饲料 2 0 1 1 年第 2 3 期 粪便 C r 2 0 含量 ) x l 0 0 ； 某养分表观消化率 =1 0 0 一 O 。 。 粪便 C r 1 含量 饲料某养分含量 u u 。 1 6 消化酶 活性 的测 定 每个重复随机抽取 3 尾鱼 于冰盘中处死 ， 取出全部的肠道 剥除肠道 外的脂肪和结缔组织 ，用冷冻去离子水洗净肠道 中的内容物 ， 滤纸吸干水分， 称重。 加入 1 O倍冷冻 去离子水 ， 于 4冰浴中匀浆 ， 离心 1 5 m i n ( 4、 1 2 0 0 0 r mi n ) ， 所得上清液即为消化酶粗酶液。酶 液于 4保存 ， 2 4 h内检测酶活。 蛋 白酶活力测定采用福林一 酚试剂法( 朱俭 ， 1 9 8 1 ) 。 蛋 白酶活力单位定义 ： 在 3 0 o C， p H 7 5 ， 底 物酪蛋 白浓度为 2的条件下 ， 1 rai n内 1 g 组织 中蛋 白酶分解酪蛋白产生 1 I x g酪氨酸为一个活 力单 位 ( Ix g mi n g ) 。 淀粉酶活力测定采用 3 ， 5 一 二硝基水杨酸显色 法( 陈毓荃， 2 0 0 2 ) ， 淀粉酶活力单位定义 ： 在 3 0， p H 7 5 ， 1的可溶性淀粉作为底物条件下 ， 1 m i n 内 1 g组织中的淀粉酶能完全水解淀粉产生 1 mg 麦芽糖为一个活力单位 ( mg m i n g ) 。 1 7 数据处理用 S P S S l 6 0软件对试验数据进 行处理和统计学分析。 若 异达到显著 ， 则进行多 重 比较 ， 显著性水平设为 0 0 5 。 2结 果与分 析 2 1 液体 复合 酶对 草鱼 生长性 能 的影响从 表 2 可 以看 出 ， C E组 草鱼的增重率和特定生长率大 于 C A组 ， 和 组草鱼的增重率 、 特定生长率均 大于 I组 ， V和组 草鱼的增重率 、 特定生 长率 也大于组。表明在同一蛋 白质水平的饲料 中直 接添加 0 2 00 3 0 m L k g的液 体酶均可在一定 程度上提高草鱼的生长速度。但是 I 组草鱼的增 重率 、特定生长率低于 C A组 ，组草鱼的增重 率 、 特定生长率又低于 I组 ， 表 明降低饲料 蛋 白 质含量 2 3会减缓 草鱼的生长速度 。但 是 ， 、 、 V和组草鱼 的增重率 、 特定生长率 大于 C A组 ，表明适 当降低饲料蛋 白含量的同时 添加 0 2 00 3 0 mL k g的液体酶制剂会 改善草 鱼的生长性能 。此外 。 第 组的饲料系数显著小 于其他各组 ， 说 明添加液体复合酶在降低草鱼饲 料系数方面也具有一定的效果。 2 2 液体复合酶对草鱼饲料表观 消化率的影响 表 2 液体复合酶对草鱼生长性能的影响 拄： I司 列数据屑标不舍相同小写罕母表不差异显著( P 0 0 5 ) 。此外 ， 当饲料蛋 白质含量为 3 3左右( I、 、 组) 时， 随着液体酶制剂添加量的升高 ， 草鱼 鱼体粗蛋白质含量呈上升趋势，粗脂肪含量呈降 低趋势 。 结果表明 ， 在饲料中使用液体酶制剂不会 影响草鱼的体组成。 2 4液体复合酶对草鱼 内源性 消化酶 活性的影 响 从表 5可以看出， C E组蛋 白酶和淀粉酶活性 高于 C A组 和组蛋白酶和淀粉酶活性均大于 I 组 ， V和组蛋白酶和淀粉酶活性也大于组 。 并且在前肠达显著水平( P0 0 5 ) 。V i e l ma等( 2 0 0 0 ) 研究了植 酸酶 对虹蹲成鱼体组成的影响 ， 结果表明 ， 添加外源酶 没有显著改变鱼体的粗灰分含量 ，对鱼体组成无 显著影响， 与本试验结论一致 。 4小 结 试验结果表明，在饲料中直接添加或适 当降 低饲料蛋 白质含量 的同时添加 0 2 00 3 0 m L k g 液体酶 ， 均可在一定程度上改善草鱼的生长性能 ， 促进草鱼的内源性蛋 白酶和淀粉酶等消化酶的分 泌 而且不会影响草鱼的体组成。 参 考文献 1 1陈毓茎 生物化学试验方法和技 术 北京 ： 科学出版社 ， 2 0 0 2 8 38 6 【2 】陈喜斌 饲料学【 M】 北京 ： 科 学出版社 ， 2 0 0 3 3 】 邓岳松 耐高温酶制剂对草鱼生长的影响D 内陆水产， 2 0 0 5 ， 3 0 ( 6 ) ： 4 5 4 6 【 4 冯定远 非淀粉 多糖酶在饲料 中应 用的作 用机理及 其影响 因素U 科技 致富向导 2 0 0 5 8 ： 16 5 】高春 生 ， 刘忠虎 ， 肖传斌 木聚糖 酶对草鱼 生长性 能和消化率的影 响田 饲料研 究， 2 0 0 6 。 8 ： 4 84 9 【 6 】 高民 ， 冯 宗慈 一种 改进的铬的测定方 法U 内蒙古 畜牧科 学， 1 9 9 3 ， 3 ： 4 2 4 3 7 】 韩庆 ， 夏维福 ， 罗玉双， 等 酶制剂对黄颡鱼生 长性 能的影响叩 水产 学杂 志， 2 0 0 2， 1 5 ( 1 ) ： 8 48 7 【 8 】 黄峰 ， 施培松 ， 文华 ， 等 外源酶对草鱼鱼种生长及饲料表观 消化 率的影 响 安徽 农业科 学， 2 0 0 8 ， 3 6 ( 3 ) ： 1 0 5 71 0 5 9 【 9 李尚坤 ， 计 成， 刘永 刚， 等 复合酶制剂对 肉种鸡 生产性 能和繁 殖性 能的 影响 】 中国畜牧 杂志， 2 0 0 7 ， 4 3 ( 3 ) ： 1 92 2 【 1 o 刘文斌 饲料中添加酶制荆对异育银 鲫消化和增 重影响U 南京农业大 学学报 ， 1 9 9 9， 2 2( 3) ： 5 76 O f 儿1罗有文， 蒋正宇 ， 周岩 民， 等 酶制剂对饲喂 不同蛋 白和能量水平 日粮生 长猪生产性 能和养分消化率的影响U 家畜生态学报， 2 0 0 6 ， 2 7 ( 6 ) ： 7 8 8 2 f 1 2 】王 爱民 ， 刘文斌 外源酶 对异育银鲫鱼种 生长及表观 消化 率的影 响研 究 饲料 工业 ， 2 0 0 6， 2 7 ( 2 ) ： 2 62 9 f 1 3 王 纪亭， 万文 菊， 康明江 ， 等 复合酶制剂对草鱼生长性能、 饲料养分消 化率及免疫力的影响 J 大连水产学院学报 ， 2 0 0 9 ， 2 4 ( 5 ) ： 4 1 74 2 2 【 1 4 余丰年 ， 王道 尊， 徐 洪杰 纤维素酶 对团头鲂生长及饲料利用的影响U 上海水产大学学报 ， 2 0 0 1 ， 1 0 ( 1 ) ： 9 O9 2 1 5 】杨胜 饲料 分析 及饲料质量检测技术 北京： 中国农 业 出版社 ， 1 9 9 1 1 6 1钟 国防 ， 周洪琪 木 聚糖 酶和复合酶 制剂 P s对尼 罗罗非 鱼生长性能 、 非特异性免疫能 力的影响 J 海洋渔业