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物理学论文- 分子生物学中钾离子通道研究进展 .doc物理学论文- 分子生物学中钾离子通道研究进展 .doc -- 2 元

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物理学论文分子生物学中钾离子通道研究进展摘要钾离子通道是植物钾离子吸收的重要途径之一。近年来,已从多种植物或同种植物的不同组织器官中分离到多种钾离子通道基因,包括内向整流型钾离子通道基因如OsAKT1,DKT1,Ktrrl,KIll,KZM1,ZMK2等和外向整流型钾离子通道基因如CORK,PTORK,STORK等。文章分别从结构、功能以及相关基因等三方面综述了关于植物钾离子通道的分子生物学研究进展,并对应用生物工程技术改良植物的钾营养性状进行了讨论。关键词钾离子通道结构基因离子通道ionchanne1是跨膜蛋白,每个蛋白分子能以高达l08个/秒的速度进行离子的被动跨膜运输,离子在跨膜电化学势梯度的作用下进行的运输,不需要加入任何的自由能。一般来讲,离子通道具有两个显著特征一是离子通道是门控的,即离子通道的活性由通道开或关两种构象所调节,并通过开关应答相应的信号。根据门控机制,离子通道可分为电压门控、配体门控、压力激活离子通道。二是通道对离子的选择性,离子通道对被转运离子的大小与电荷都有高度的选择性。根据通道可通过的不同离子,可将离子通道分为钾离子potassiumion,K通道、钠离子natriumion,Na通道、钙离子calciumion,Ca2通道等。其中,K通道是种类最多、家族最为多样化的离子通道,根据其对电势依赖性及离子流方向的不同,可把K通道分为两类①内向整流型K通道inwardrectifierKchannelKin,②外向整流型K通道outwardrectifierKhannelKout。K是植物细胞中含量最为丰富的阳离子,也是植物生长发育所必需的唯一的一价阳离子,它在植物生长发育过程中起着重要的作用,具有重要的生理功能。植物中可能存在K通道,这一点早在20世纪6o年代植物营养学界就有人提出,而一直到80年代才被Schroeder等人23证实,他们利用膜片钳patchchmp技术,首先在蚕豆V/c/afaba的保卫细胞中检测出了K通道钾离子通道的结构单个钾离子通道是同源四聚体,4个亚基subunit对称的围成一个传导离子的中央孔道pore,恰好让单个K通过。对于不同的家族,4亚基有不同数目的跨膜链membrane。span。ningelement组成。两个跨膜链与它们之间的P回环porehelixloop是K通道结构的标志2TM/P,不同家族的K通道都有这样一个结目前从植物体中发现的K通道几乎全是电压门控型的,如保卫细胞中的K外向整流通道等,其结构模型如图2一a所示。离子通透过程中离子的选择性主要发生在狭窄的选择性过滤器selectivityfilter中图2一b,X射线晶体学显示选择性过滤器长1.2nIll,孔径约nIll,K钾离子通道的作用.有关K通道在植物体内的作用研究并不多。从目前的结果来看,认为主要是与K吸收和细胞中的信号传递尤其是保卫细胞有关。小麦根细胞中过极化激活的选择性内流K通道的表观平衡常数Km值为8.8mmol/L,与通常的低亲和吸收系统Km值相似。近年来,大量K通道基因的研究表明,K通道是植物吸收转运钾离子的重要途径之一。保卫细胞中气孔的开闭与其液泡中的K浓度有密切关系。质膜去极化激活的K外向整流通道引起K外流,胞质膨压降低,导致气孔的关闭。相反,质膜上H.ATPase激活的超极化hyperpolarization促使内向整流钾离子通道Kin的打开,引起K的内流,最终导致气孔的张开钾离子通道相关基因及其功能特征迄今,已从多种植物或同种植物的不同组织器官中分离得到多种K通道基因图3,根据对其结构功能和DNA序列的分析,可以把它们分为5个大组工,Ⅱ,Ⅳ组基因属于内向整流型通道m组属于弱内向整流型通道weaklyinwardAKT1ArabidopsisKTransporter1是第一个克隆到的植物K通道基因,采用酵母双突变体互补法从拟南芥cDNA文库中筛选出来cDNA序列分析表明,AKT1长2649bp,其中的阅读框为2517bp,编码838个氨基酸残基组成的多肽,相对分子质量约为95400Da。AKT1编码的K通道,对K有极高的选择性,其选择性依次是KRbNaLi。Northernblot分析表明,AKT1组织特异性较强,主要在根组织中表达ZMK1ZeamaysKchannel1是从玉米胚芽鞘中分离出的K通道基因,在皮层表达。在卵母细胞中的表达表明,ZMK1编码的K通道是通过外部酸化激活的。有研究表明,蓝光对ZMK1通道在玉米胚芽鞘中的分布有一定影响32l。1组KAT1组基因编码内向整流钾离子通道,其与AKT1组基因产物结构上的最大区别是在COOH端没有锚蛋白相关区枷nrelateddomain,ANKY。KAT1组基因主要包括KAT1,KST1,SIRK,KZM1,KPT1等。KAT1ArabidopsisinwardrectifierKchannel1是与AKT1同时从拟南芥cDNA文库中筛选出来的植物K通道基因。KAT1基因的阅读框含有2031个核苷酸,编码的多肽由677个氨基酸残基组成,相分子质量约为78000Da。KAT1的表达具有组织特异性,KAT1在拟南芥植株中的主要表达部位是保卫细胞,在根和茎中也有少量的表达。人们认为KAT1通道可能参与了气孔开放,并向维管组织中转运K,而不是直接从土壤中吸收KJ。以KAT1为探针,又能从拟南芥cDNA文库中筛选出KAT2等功能类似的内向整流型K通道基因通过基因工程技术,人们已相继开展了将KATI和AKTI基因导人到拟南芥、烟草和水稻的研究,并获得了一些转基因植株。比如,施卫明等利用根癌农杆菌介导法已成功地把KAT1和AKT1导人拟南芥和野生型烟草中,并获得了转基因植株及其纯合株系,发现转基因植株的吸钾速率和对K的累积能力都比对照的有明显的提高,而且,经过分子检测,也证实711和AKT1基因在转基因植株中得到了整合和表达。因此,运用现代分子生物学手段和基因工程技术筛选高效利用钾的作物品种或利用现有的钾离子通道基因改良作物品种,从而提高作物本身的钾吸收利用能力应该是目前主要的研究方向。可以相信,随着分子生物学技术、基因工程技术和有关分析测试技术的发展和应用。随着研究工作的不断深入,有关钾离子通道基因的分离、克隆和利用会取得更大的进展。参考文献1.JLangerK,AcheP,GeigerD,eta1.PolarpotassiumⅡalIspclnerscapableofcontrollingKhomectasisandK一dependent圳0gmesislJJ,ThePlantJournal,2OO2,329971009.2.SchroederJI,HedrichR.PotassiumselectivesinglechannelsinguardcellprotoplastsofViciabaJ.nature,1984,312361363.3.JacquelineMG,DeclanAD.PotassiumchannelstructuresdotheycomformJ.CurrentOpinioninStructuralBiology,20O4,14440446.4.MackinnonR,ZhouYF.TheoccupancyofionsintheKselectivityfilterchsebalanceandcouplingofionbindingtoaproteinconformationalchangeundediehishconductionratesJ.JMB,2003,333965975.5.MackinnonR,ZhouM.AmutantKcsAKchannelwithalteredconductionpropertiesandselectivityfilteriondistributionJ.JMB,2O04,338839846.6.ElideF,SerenaV,AlexC,eta1.DKT1,anovelKchannelfromcarrot,formsfunctionalheteromericchannelswithKDC1JJ.FEBSLetters,20O4,57361677.SentenacH,BormeaadN,MinerM,eta1.CloningandexpressioninyeastofaplantpotassiumiontransportsystemJ.Science,1992,256663.
编号:201312171152302050    大小:10.60KB    格式:DOC    上传时间:2013-12-17
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docin上传于2013-12-17

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