N亚苄基橙皮素腙及类似物的合成与细胞活性

有机化学 Chinese Journal of Organic Chemistry DOI：1 06023qoc201 304028 八亚苄基橙皮素腙及类似物的合成与细胞活性 刘志平 韦万兴 甘春芳6 黄燕敏6 刘 盛 周 敏 崔建国6 广西大学化学化工学院南宁530004) ( 广西师范学院化学与生命科学学院南宁530001) NOTE 摘要 以天然橙皮素(1)为原料，与水合肼反应得到了橙皮素腙(2)，2分别与各种取代的芳香醛反应首次合成了8个- 苄基橙皮素腙310及6个类似物1116所合成产物通过NMR，IR，HRESIMS方法进行了结构确证MTT(噻唑 蓝)蛋白染色法体外抑制肿瘤增值活性测试发现化合物5，7，10，l6对胃癌细胞SGC一7901有显著的抑制活性 关键词 橙皮索；橙皮索腙；_ 苄基：细胞活性 Synthesis and Cytotoxicity of NBenzylidene Hesperitin Hydrazones and Analogues Liu，Zhiping。， Wei，Wanxing 。 Gan，Chunfang Huang，Yanmin Liu，Sheng。 Zhou，Min Cui，Jianguo ( College ofChemistry and Chemical Engineer，Guangxi University，Nanning 530004) ( College ofChemistry andLe Science，Guangxi Teachers Education University，Nanning 530001) Abstract Hesperitin hydrazone(2)was generated by the reaction of natural hesperitin f11 as raw material with hydrazine hydrateEight N-benzylidene hesperitin hydrazones 310 and six analogues 11l6 were synthesized by the reaction 0f 2 with various aldehydes，respectivelyThe structures of al1 reaction products were confirmed bv NMRIR and HRMS tech niquesAnd the cytotoxity against human cancer cell SGC一7901 ofthe synthesized compounds was also evaluatedThe results showed 571 0 and 16 exhibiting distinct cytotoxity against SGC一790 1 Keywords hesperitin；hesperitin hydrazones；N-benzylidene；cytotoxicity 橙皮素在芸香科植物柑橘、柑桔、柠檬等的果皮中 广泛存在，具有降低胆固醇、提高免疫力、抑菌、抗病 毒、抗氧化等多种功效l1 ，但其开发利用率较低，未有 高端的深加工产品上市因此有必要探索增值化利用天 然橙皮素的可行路径，提 该产品的经济价值，而以天 然农产品为原料经简单化学转化半合成具有高药用价 值的药物具有原料多、步骤少、生态友好等特点， 期 以来一直是化学和药学工作者的研究热点之一一如单杨 等【4l、l哿橙皮苷通过水解、脱氢、选择性甲基化等步骤合 成了具有多种生理活性的桃皮素、木犀草素、香叶木素 等衍生物；汪秋安等【5 J以橙皮苷为原料半合成了具有 生物活性的山萘酚、黄酮醇、橙酮、香叶木素及其衍生 物；Bernini等【7l利用甲基三氧化铼作催化剂，合成了具 有抑制人淋巴瘤细胞株增值活性的C环橙皮素内酯 腙及其衍生物是一类具有有抗茵l8 、抗病毒_1、 抗肿瘤I1 1以及除草I1 】等多种生理活性的物质，而且具 有较强的配位能力以及多样的配位形式，在农药、医药 和分析试剂等方面有着广泛的应用1 3,141近年来，有文 献报道在黄酮母体上引入腙基含氮基团，可引起黄酮类 化合物的生物活性发生显著变化如Hussain小组lJ 5_合 成了具有较好抗菌作用的2，4二硝基苯腙黄酮类化合 物：Bak等【】6l在柚皮素母体上改造合成了5，7二乙酰基 柚皮素苯肼腙，具有显著的抑制肺癌NCIH460和A549 增殖活性，可以诱导肺癌肿瘤细胞在G 前期凋亡为 E-mail：chewxweiyahoocorncn ReceivedApril 1 8，2013；revisedMay 22，2013；published onlineMay 31，2013 Project supposed by the National Natural Science Foundation of China(No8 1 06026 1)and the Natural Science Foundation of Guangxi Province(No 201 IjjD20002) 国家自然科学基金(Yo81060261)11广西科学自然科学基金重点(No201ljjD20002)资助项目 1988 http： 0c_journallcn 固 2013Chineseche micalS0c_ety&SIOC，CAS Org e，n201333 19881993 Chinese Journal of Organic Chemistry 此，我们将具有多种药效的腙基片段引入到橙皮素中， 通过改变腙上取代基团的类型考察结构与细胞活性之 问的构效关系，从而挖掘该产品潜在的应用价值 本研究以丰富易得的橙皮素为原料，以4位羰基为 改造位点，与水合肼作用合成橙皮素腙基，并在腙基础 上与不同类型的醛缩合设计合成了一系列新型M亚苄 基橙皮素腙3l0及类似物1116，MTT蛋白染色法体 外抑制肿瘤细胞增殖活性测试发现化合物5，7，l0，16对 SGC7901细胞株具有显著的细胞活性系列N-亚苄基 取代橙皮素腙类化合物的合成路线见Scheme 1，该合成 路线步骤短、操作简捷、目标产物活性显著，可为进一 步利用橙皮素资源、开发抗肿瘤药物提供依据 1结果与讨论 在制备4腙基橙皮素(2)时，先在醋酸催化下用2倍 物质的量的水合肼回流反应，得到了黄色难溶性固体， 点板成分较为复杂，柱层析也难以分离主要原因为水 合肼较少、反应温度较高时可能有双缩橙皮素腙等副产 物生成此外，橙皮素腙与原料点的风值基本相等，也为 判别反应的进程造成了困难通过多次条件优化得出橙 皮素腙的合成最佳条件为过量的水合肼、60乙醇中反 应4 h，低温减压蒸干，加适量水溶解过量水合肼，并用 乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤可得到纯的化 合物2鉴于化合物2的稳定性较弱，不宜长时间放置 在后续实验中均从原料1开始制备化合物2，新制备的2 直接参与下一步_亚苄基取代物的合成，化合物316 的产率以原料1为基准计算目标产物_亚苄基橙皮素 腙及类似物3l6中形成了ArC=NN=CHAr的长共轭 结构而呈现黄色，分了结构趋于稳定 OH o 1 NH2NH2H20 EtOHreflUX 亚苄基橙皮素腙3l6中4一位碳原子fC=N)、亚 苄基碳原子(CH=N)及氧代芳香碳原子的化学位移相 近，处于5 145168之间，碳原子的归属较为困难为 此，我们测定了多个化合物的cH远程相关，从 HMBC的相关信号中归属了每个碳原子其中4位碳原 子(c=N)的化学位移位于 163168，亚苄基碳原子 fCH=N)的化学位移位于 153159之间 化合物1中3位CH2(H 和Hh)分别与2一位H 分别 呈反式SH Jil式(图1)，这可从 值的大小加以判别3一Ha ( 309，j_-174，129 Hz)与H 呈反式， 值大；3一Hh( 279， =174，30 Hz)与H。呈顺式， 值小；而当1转化成 3时，3H 和3一Hh的 发生明显的不同变化，3一Hh( 393， =174，30 Hz) 显著向低场移动，而3一H ( 310， = 174，120 Hz) 基本无变化这是因为腙基上“ArCH= N”结构上N原子与3-Hb距离较近，N原子对3Hb的吸 电子作用使H 明显向低场移动所有_亚苄基腙及类 似物316均存在相似的电子效应 3 图1化合物1和3的结构 Figure 1 Structures of compounds of 1 and 3 OH 、， ArCHO OH NNH2 2 EtOHreflux O ， ， 。 ， 。 ， 。，-,丫 OCHH ， ， ， (1。4I O C，H 3 O，C H OCH， 3 ChinJOrg-Chem2013，33，19881993 2013 Chinese Chemical Society&SIOCCAS http：sioc-journal cn 1989 R 6 = H 3 H O 有机化学 采用MTT(噻唑蓝)蛋白染色法，以胃癌细胞株 SGC一7901作为筛查对象，并与顺铂为阳性对照，对化 合物316进行了抗肿瘤活性评估(表11结果显示所合 成的目标化合物比底物具有更好的抗肿瘤细胞增殖活 性，化合物5，7，10，16对SGC7901细胞株具有显著的 抑制活性，IC50值分别位为106，69，98，96 gmolL， 活性比顺铂稍弱；4，6，15对SGC7901细胞株有中等程 度的抑制活性初步的构效关系显示亚苄基结构上连有 活泼的OH，NH有利于细胞活性的增强，而亚苄基结构 为亲脂性萘、甲氧基苯结构时细胞活性明显减弱，这为 设计合成新型的抗肿瘤药物以及此类化合物的构效关 系研究提供有用参考 表1化合物3l6对SGC7901细胞株的半数抑制浓度(IC50) Table 1 Half-inhibitory concentration(ic501 of compounds 3 16 against SGC一790 1 cell lines 2实验部分 21试剂与仪器 熔点在X4型显微熔点仪上测定，温度未校正； NMR用BrukerAvIII300型核磁共振仪测定(TMS为 内标)；高分辨率质谱用Waters Xevo G2 QT质谱仪；红 外用Nicolet Avater FTIR 360傅立叶红外光谱仪：柱 层析用硅胶(青岛海洋化工厂产品)橙皮素购买白陕西 锦泰生物工程有限公司所用试剂为化学纯、溶剂为分 析纯 22 4腙基橙皮素(2)的合成 在100 mL烧瓶中将橙皮素(302 mg，100 mmo1)溶 解于20 mL 95乙醇中，在搅拌下加入过量的80水合 肼(20 mL 48 mmo1)，油浴升温至60搅拌反应4 h， 旋转减压蒸干，加适量水，乙酸乙酯萃取3次，有机层 依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸 干得浅棕色固体275 mg产率870，mP216-218 ； H NMR(C2D60，300 MHz) ：287(dd， =174，120 Hz，1H，3aH)，367(dd， ：1 74，30 Hz，1H，3bH)，386 (s，3H，OCH3)，51l(dd， =120，30 Hz，1H，2一H)，598 (d，J=24 Hz，1H，8一H)，602(d，J=24 Hz，1H，6-H)， 696(s，2H，5，6一H)，703(d， =15 Hz，1H，2-H)，784(s， 1H，3OH)，918(s，1H，7-OH)，1325(s，1H，50H)；IR (KBr)v：3441，3018，2981，1620，1589，1522，1437，1351， l271 1235，1 154 cm_。：HRESIMS calcd for C16H17N20 M+Hr 3171137，found 3171115 23-亚苄基橙皮素腙及类似物31 6的合成 合成通法：将新制备的橙皮素腙2溶解于装有1 5 mL乙醇的100 mL烧瓶中，加入各种取代的芳香醛(1o0 mmo1)，油浴升温至70搅拌反应26 h，反应过程中 原料点逐渐消失 并伴有黄色固体生成冷却减压抽 滤、乙醇洗涤得黄色粉末状固体部分反应冷却未出现 沉淀，将反应液蒸干，硅胶柱层析分离 石油醚)： 乙酸乙酯)：4：12：1，得黄色粉末状固体 N-(2 氯亚苄基)橙皮素腙(3)：黄色粉末状固体328 mg，产率750mP273275； H NMR(C2D60， 300 MHz) ：310(dd =174，120 Hz，1H，3bH1 388 (s，3H，OCH3)，393(dd， =174，30 Hz，1H，3aH)，5-21 (dd， =120，27 Hz，1H，2-H)，602(d， =21 Hz，1H， 8-H)，605(d， =24 Hz，IH，6-H)，700(s，2H，5，6l_H)， 708(s，1H，2-H)，7-38753(m，3H，ArH)，819(dd， 一 87，15 Hz，1H，ArH)，893(s，lH，N=CH)，1297(s，1H， S-OH)；IR(KBr) ：3424，2970，2901，1646，1434，1315， 1l 72 cm ；HR-ESIMS calcd for C23H2oC1N205M+HI 4391061，found 4391 148 N-(2羟基亚苄基)橙皮素腙(4 ：淡黄色粉末状固体 296 mg产率705mP249251：。H NMR (DMSO-d6，300 MHz) ：358(dd， =171，120 Hz，1H， 3bH)，404(dd， =171，30 Hz，1H，3aH)，433(s，3H， OCH3)，568(dd， =12-3，30 Hz，1H，2-H)，1322(s，1H， 5一OH)，648(d，J=21 Hz，1H，8-H)，652(d，J=24 Hz， 1H，6-H)，7-38745(m，5H，ArH)，750(s，2H，2-H)， 781787(m，1H，ArH)，800(dd， =78，15 Hz，1H， ArH)，928(s，1H，N=CH)，1322(s，1H，5-0H)；IR(KBr) ：3436，2949 2843，1638，1613，1577，1442，1356，1283， 1241，1201，1 148 cm ；HRESI-MS calcd for C23H21N2O6 M+H 4211400，found 4211496 X-(3羟基亚苄基 橙皮索腙(5)：黄色粉末状固体 327 mg 产率778mP256258。C； H NMR fC2D6O，300 MHz) ：307(dd， 一174，120 Hz，1H， l990 http：sioc-journa1cn 2013ChineseChemicalSocietySIOC，CAS Chin OrgChem2013，33，19881993 Chinese Journal of Organic Chemistry 3bH)，391(dd，l，一171，30 Hz，1H，3aH)，519(dd， = 120，30 Hz，1H，2-H)，601(d，J=24 Hz，2H，6一H)，604 (d，J=24 Hz，2H，6一H)，695699(m，1H，ArH)，701(s， 2H，5，6-H)，709(s，1H，2f_H)，731-742(m，2H，ArH)， 853(s，1H，N=CH)，1308(s，1H，5-OH)；IR(KBr)V： 3440，3023，2971，2933，1622，1589，l520，1437，1364， 1279，1237，1155，113l cm ：HRESIMS calcd for C23H21N206M+H】十4211400，found 4211490 -(4羟基亚苄基)橙皮素腙(6)：黄色粉末状固体 304 mg产率724mP249251： H NMR (C2D60，300 MHz) ：305(dd， =174，120 Hz，1H， 3bH)，387(s，3H，OCH3)，391(dd， =174，30 Hz，1H， 3a-H)，517(dd， 一120，30 Hz，1H，2-H)，600(d，J=24 Hz，2H，6一H)，604(d，J=24 Hz，2H，6-H)，693(d， = 87 Hz，2H，ArH)，700(s，2H，5，6 -H)，708(s，1H，2一H)， 776(d， =87 Hz，2H，ArH)，850(s，1H，N=CH)，1317 (s，1 H，50H)；IR(KBr)v：3432，328 1，2966，2945，1 597， l515，1450，1374，1307，1286，l】56 cm ：HRESIMS calcd for C23H21N206M+H 4211400，found 4211494 X-(3一甲氧基一4羟基亚苄基)橙皮素腙(7)：黄色粉末 状固体297 mg，产率658mP262264；。H NMR (DMSO一 ，300 MHz) ：309(dd， =174，117 Hz，1H， 3b-H)，374(dd， 一171，27 Hz，1H，3a-H)，379(s，3H， OCH3)，379(s，3H，OCH3)，517(dd， =l17，27 Hz，1H， 2-H)，589(d， 一24 Hz，lH，8一H)，593(d， =24 Hz， 1H，6-H)，684696(m，4H，ArH)，7_30(dd，l，一81，15 Hz，1H，ArH)，741(d， =18 Hz，1H，Ar-H)，850(s，1H， N=CH)，909(s，1H，OH)，973(s，1H，3OH)，1015(s， 1H，7一OH)，1324(s，1H，5-0H)；IR(KBr)v：3444，2909， 1659，1642，1626，1454，1430，1270，1160 cm ：HRESI Ms calcd for C24H23N207M+H十4511505，found 4511546 N-(3，4一二甲氧基亚苄基)橙皮素腙(8)：浅黄色粉末 状固体372 mg，产率802mP263265： H NMR (C2D60，300 MHz) ：3II(dd， 一l74，1 170 Hz，1H， 3b-H)，374(dd， =l74，30 Hz，1H，3a-H)，378(s，3H， OCH3)，378(s，3H，OCH3)，38(s，3H，0CH3)，518(dd， =l17，30 Hz，1H，2-H)，589(d，J=24 Hz，1H，8一H)， 593(d，J=21 Hz，1H，6一H)，688-692(m，3H，ArH)， 704(d， =84 Hz，lH，5-H)，740(dd，=84，15 Hz， 1H，Ar-H)，744(d， =15 Hz，1H，ArH)，855(s，1H，N= CH)，909(s，1H，5-OH)，1018(s，1H，5一OH)，1323(s， 1 H，5一OH)；IR(KBr)v：3436，2970，29 1 7，2848，1 650， 1634，1601，1511，1438，1377。1274 1 1521123 cm ： HRESIMS calcd for C25H25N207M+H 4651 662， found 4651648 N-(3，4，5一三甲氧基亚苄基)橙皮素腙(9)：浅黄色粉 末状固体393 mg，产率789mP247249 oC：。H NMR(C2060，300 MHz) ：309(dd， =174，120 Hz， 1H，3bH)，379(s，3H，OCH3)，387(s，3H，OCH3)，387 (s，3H，OCH3)，390(s，3H，OCH3)，391(dd，L，=174，30 Hz，lH，3aH)，517(dd， 一120，30 Hz，1H，2-H)，599 (d，J=24 Hz，1H，8-H)，604(d，J=21 Hz，1H，6-H)， 699(s，2H，5，6-H)，707(s，1H，2-H)，722(d， =84 Hz， 2H，ArH)，851(s，1H，NCH)，1315(s，1H，5-0H)；IR (KBr)v：3456，2994，2929，2835，1646，1621，1593，1503， 1458，1409，1315，1278，1237，ll55，1131 cm ：HR ESI MS calcd for C26H27N2OsM+H 4951767，found 4951881 (4一，_二甲基亚苄基)橙皮素腙(10)：腙色粉末 状固体252 mg，产率565mP160162： HNMR (C2D60，300 MHz) ：302(dd， =171，l23 Hz，1H， 3bH)，307s，6H，N(CH3)2，387(s，3H，OCH3)，392 (dd， =171，30 Hz，1H，3aH)，515(dd，l，=120，30 Hz， 1H，2-H)，599(d，J=21 Hz，1H，8一H)，603(d，J=21 Hz，1 H，6-H)，677(d， ：87 Hz，2H，ArH)，699(s，2H， 5，6-H)，708(s，1H，2-H)，771(d，J=87 Hz，2H，ArH)， 843(s，1H，N=CH)，1327(s，1H，5-0H)；IR(KBr)v： 3444，2974，2917，2852，1642，1626，1556，1434，1409， 1360，1290，1 180，1 155 cm ；HRESIMS calcd for C25H26N305M+H+4481872，found 4481968 N-(3吡啶亚甲基)橙皮素腙(11)：黄色粉末状固体 222 mg，产率548mP119121： H NMR (DMSO- ，300 MHz) ：312(dd， 一174，120 Hz，1H， 3bH)，388(s，3H，OCH3)，395(dd， =174，30 Hz，1H， 3a-H)，522(dd， =120，30 Hz，1H，2-H)，601(d，J=21 Hz，1H，8-H)，604(d， =24 Hz，1H，6一H)，700(s，2H， 5，6-H)，708(s，1H，2-H)，748(dd，l，=78，48 Hz，1H， ArH)，830(dd， =78，15 Hz，1H，ArH)，866(dd， 一 48，15 Hz，IH，ArH)，869(s，1H，N=CH)，903(d， = 18 Hz，1H，ArH)，1300(s，1H，5一OH)；IR(KBr)v：3456， 2962，913，2847，1654，1642，1454，1429，1368，1343 1 278，1 1 60 cm_。；HRESIMS calcd for C22H20N3O5M+ Hr 4061403found 4061479 X-(3噻吩亚甲基)橙皮素腙(12)：黄色粉末状固体 323 mg，产率788mP200202： H NMR (C2D60，300 MHz) ：306(dd， =174，120 Hz，1H， 3bH)，388(s，3H，OCH3)，389(dd，L，=17，4，30 Hz，1H， 3aH)，518(dd， =120，30 Hz，1H，2-H)，600(d，J=21 ChinJ OrgChem201 3，33，1 9881 993 201 3 Chinese Chemical SocietySIOC，CAS http：sioc-journal cn 1 99 1 有机化学 Hz，1H，8一H)，603(d，J=21 Hz，1H，6一H)，700(s，2H， 5，6一H)，708(s，l H，2-H)，755(dd， =78，27 Hz，1 H， ArH)，764(d，=51 Hz，1H，ArH)，775(s，1H，3-OH)， 802(d， =30 Hz，1H，ArH)，864(s，1H，N：CH)，912 (s，1H，7-OH)，1308(s，1H，5-0H)；IR(KBr) ：3456， 2970，2917，2852，1642，1614，1561，1462，1434，1373， 1279，l151 ClTI一 HRESIMS calcd for C21H1iN2o S M+Hr 4l11015，found 4l11082 N-(1萘亚甲基)橙皮素腙(13)：黄色针状固体307 mg，产率676mP195197； H NMR(C2D60， 300 MHz1 ：32l(dd， =1 74，120 Hz，1H 3bH)，395 (s，3H，OCH3)，397(dd， =l 74，30 Hz，1 H，3aH)，526 (dd， ：1 17，27 Hz，1H，2-H)，603(d， =15 Hz，1H， 8一H)，607(d，_，=15 Hz，1 H，6一H)，702(s，2H，5，6一H)， 71l(s，1 H，2-H)，757766(m，3H，ArH)，777(s，1 H， ArH)，801(d， =75 Hz，1H，ArH)，807(d，J=21 Hz， 1H，ArH)，816(d，J=72 Hz，1H，ArH)，903(d， =81 Hz，1H，ArH)，918(s，1H，OH)，9-30(s，1H，N=CH)， l315(s，1H，5-0H)；IR(KBr)v：3432，2974，2917，2848， 1626，l605 1544，1520，1442，1356，1287，1254，l156， l l31 cm ；HRESI-MS calcd for C27H23N205M+Hr 4551607found 4551721 N-(6甲氧基一3萘亚甲基)橙皮素腙(14)：黄色粉末 状固体340 mg，产率70_3mP294296； H NMR(DMSO一 ，300 MHz) ：314(dd， ：174，120 Hz， 1H，3bH)，379(s，3H，OCH3)，390(s，3H，OCH3)，382 (dd， =174，30 Hz，1H，3a-H)，520(dd，t，=117，27 Hz， 1H，2-H)，591(d，J=24 Hz，1H，8一H)，595(d，J=24 Hz，1H，6-H)，693698(m，3H，arn)，722(dd，=87， 24 Hz，1H，ArH)，738(d，J=21 Hz，1H，2一H)，785(d， l，=87 Hz，1H，ArH)，792(d，=90 Hz，1H。ArH)，80 (dd，J=84，12 Hz IH，ArH)，873(s，1H，ArH)，874(s， 1H，N=CH)，911(s，1H，3-OH)，1022(s，1H，7-OH)， 1322(s，1H，5-0H)；IR(KBr)v：3456，3199，2966，2937， 2900，1695 16261597，1516，1442，1348，1282，11 85， l151 crn-。；HRESIMS calcd for C28H25N206M+H 4851713found 4851799 _(4喹啉亚甲基)橙皮素腙(15)：黄色粉末状固体 297 mg，产率652mP192194： H NMR (CaD6O，300 MHz) ：323(dd， =174，120 Hz，1H， 3b-H)，388(s，3H，OCH3)，398(dd，L，：174，30 Hz，1H， 3aH)，527(dd， =120，30 Hz，lH，2一H)，604(d，J=24 Hz，1H，8-H)，607(d，J=21 Hz，1H，6一H)，702(s，2H， 5，6H1，767784(m，2H，ArH，710(s，1H，2一H)，804 (d，J=45 Hz，1H，ArH)，815(d， =81 Hz，1H，ArH)， 889(d， =87 Hz，1H，ArH)，907(d，J=45 Hz，1H， ArH)，937(s，1H，N=CH)，1299(s，1H，50H)；1R(KBr) v：3448，2974，2929，2864，1638，1622，1573，1422，1356， 11 60 cm ；HRESI-MS calcd for C26H22N3O5M+H十 4561559，found 4561608 L(3吲哚亚甲基)橙皮素腙(16)：黄色粉末状固体 300 mg，产率678il1P224226j H NMR (C2D60，300 MHz) ：320(dd， =174，l17 Hz，1H， 3bH)，389(s，3H，OCH3)，397(dd， =l71，30 Hz，lH， 3aH)，523(dd， =117，30 Hz，1H，2一H)，601(d，t，=24 Hz，IH，8-H)，604(d， =24 Hz，1H，6一H)，699726 (m，5H，ArH)，752(d， =81 Hz，1H，ArH)，795(d， = 27 Hz。1H，=CH)，829(d， =78 Hz，1H，ArH)，881(s， 1H，N=CH)，1091(br，1H，NH)，1342(s，1H，5-OH)；IR (KBr)1，：3444，2974，291 7，2856，1650，1634，1 552，1438， l417，1372，1282 1242，1 155 cm：HRESIMS calcd for C25H22N305【M+H4441 559，found 4441 594 24细胞活性测试 采用MTT f噻唑蓝1蛋白染色法【” 对合成的化合物 316进行体外抗肿瘤细胞SGC7901(胃癌细胞)的活性 筛选 References 1】Choi，EM；Lee，YSCel1Immuno12010，264，1 21 Zarebczan，B；Pinchot，SN；Kunnimalaiyaan，M；Chen，HAm Surgery 2011，201，329 【3】Choi，EJLifeSci2008，82，1059 4Shan，Y；Li，GY；Wang，QA；Li，ZHChin OrgChem 2008，28，1024(in Chinese) (单杨，李高阳，汪秋安，李忠海，有机化学，2008，28，1024) 5Cai，SL；Wu，Z=Wu，J；Wang，QA；Shan，YChin Org Chem2012，32，560(in Chinese) (