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Bax抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞保护作用Bax抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞保护作用

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Bax一抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞保护作用 摘 要 目的通过检测应用gax一抑制肽对新生鼠缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的 疗效,探讨Bax一抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用。 方法选取200只7日龄新生wjster大鼠为研究对象,随机分为以下三组:假 手术组;对照组;实验组(bax一抑制肽)。对照组与实验组分别通过结扎左侧颈总动 脉以及置于8%的氮氧混合气中2小时建立新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型, 假手术组仅游离左侧颈总动脉,不结扎,不低氧处理。实验组于建立模型后0h、6h、 12h、24h、48h、3d不同时问点侧脑室注射bax-抑制肽5ug(5u1),其余两组予相 同剂量生理盐水于相同时间点侧脑室注射。对照组和假手术组于HIBD模型建立后第 12h、24h、2d、3d、7d及实验组HIBD后第7d每组取2只甲醛灌注后断头取脑海马 组织病理检测,另取6只新鲜脑组织进行蛋白免疫印迹法(Weston blot)检测活性 Caspase一3蛋白、逆转录PCR(RT—PCR)测定Caspase-3mRNA的表达。 结果l、HE染色组织显示:在患侧海马区,实验组及对照组oh、6h、12h、24h、 48h各亚组均有病理性损伤,实验组病理损伤程度低于对照组,在72h亚组实验组 与对照组病理损伤无明显差异。2、Western blot检测Caspase一3蛋白及RT—PCR检 测Caspase一3mRNA:对照组与假手术组比较,对照组在HIBD后oh、6h、12h、24h海 马区Caspase一3及mRNA依次增多,24h达高峰,48h开始下降,7d时达到基础水平。 3、HIBD后7d Western blot检测Caspase-3:实验组与对照组在0h、6h、12h、24h、 48h各亚组比较,海马区Caspase一3明显减少,差异有统计学意义;在72h亚组比 较差异无统计学意义。实验组各亚组间比较,HIBD后越早注射bax一抑制肽, Caspase一3越少,差异有统计学意义。4、HIBD后7d RT—PeR检测Caspase一3mRNA: 实验组和对照组在0h、6h、12h、24h、48h各亚组比较,患侧海马区活性Caspase一3 明显减少,差异有统计学意义;在72h亚组比较差异无统计学意义。实验组各亚组 间比较,HIBD后越早注射
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