UUO大鼠肾组织IGF1表达及其与肾间质纤维化的相关性研究

学校代码：10114 分 类 号： 硕 士 学 位 论 文 UUO大鼠肾组织IGF-1表达及其与肾间质纤维化的相关性研究 研 究 生：何俊花 指导教师：马 宏 教授 专业名称：儿科学 研究方向：小儿肾脏病学 学位类型：科学学位 所在学院：第一临床医学院 中国 山西 二一三年三月十五日 分类号： 单位代码：10014 密 级： 学 号：20113011005 UUO大鼠肾组织IGF-1表达及其与肾间质 纤维化的相关性研究 研 究 生： 何俊花 指 导 教 师： 马宏教授 申请学位门类级别： 科学学位 专 业 名 称： 儿科学 研 究 方 向： 小儿肾脏病学 所 在 学 院： 第 一 临 床 医 学 院 二一三年三月 学位论文独创性声明 本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果： 1、交回学校授予的学位证书； 2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报； 3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。 4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。 论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名： 日期： 年 月 日 指导教师签名： 日期： 年 月 日 （本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用） 目 录 缩略词表 中文摘要 英文摘要 论 文1 前 言1 材料方法3 结 果8 讨 论12 结 论16 附 图 一17 附 图 二19 附 图 三22 参考文献26 综 述29 正 文29 参考文献37 个人简历42 致 谢43山西医科大学硕士学位论文 I 缩 略 词 表 缩写 英文全称 中文全称 -SMA -smooth muscle activating protein -平滑肌动蛋白 CTGF connective tissue growth factor 结缔组织生长因子 ESRD end-stage renal disease ESRD 终末期肾功能衰竭 ECM extracellular matrix 细胞外基质 EMT epithelial-mesenchymal transformation 上皮细胞间充质细胞转变 FN Fibronectin 纤维连接蛋白 GH Growth Hormone 生长激素 GHIS Growth hormone insensitivity syndrome 生长激素不敏感综合IGF-1 insulin-like growth factor 胰岛素样生长因子 LN 1aminin 层粘连蛋白 MMP-2 matrix metalloproteinase -2 基质金属蛋白酶-2 MyoF Myofibroblast 肌成纤维细胞 PTC platelet-derived growth factor 近端肾小管上皮细胞 RIF renal interstitial fibrosis 肾间质纤维化 TGF-1 Transforming growth factor-1 转化生长因子1 TIF tubulointerstital fibrosis 肾小管间质纤维化 TIMPs tissue inhibitor of metralloproteinase 组织型基质蛋白酶抑制剂 TNF- tumour necrosis factor 肿瘤坏死因子 VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 UUO unilateral ureteral obstruction 单侧输尿管梗阻 山西医科大学硕士学位论文 II UUO大鼠肾组织IGF-1表达及其与肾间质纤维化的相关性研究 摘要 目的：本实验旨在研究单侧输尿管结扎（UUO）模型中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达趋势及其与肾间质纤维化的相关性研究，以及用胰岛素增敏剂曲格列酮治疗后的干预效果。 方法：采用单侧输尿管结扎（UUO）模型，将3-4周龄90只幼年SD雄性大鼠，随机平均分为3组，即：假手术组（行手术分离但不结扎左侧输尿管）、模型组（手术结扎左侧输尿管近肾盂段）和曲格列酮治疗组。分别在术后1、3、7、14天每组各取6只大鼠处死，HE染色观察肾小管受损的程度，用免疫组织化学法检测IGF-1和MMP-2在肾间质纤维化中的表达及其相关性，探讨IGF-1在肾间质纤维化中的作用，用SPSS17.0统计软件进行统计学处理。 结果:（1）常规HE和Masson染色：正常对照组肾脏结构无明显病理改变；模型组术后第1天可见轻微的肾小管扩张，肾间质轻度水肿；术后3天可见各级肾小管扩张，少量炎症细胞浸润；术后7天肾小管明显扩张，间质内有大量的炎症细胞浸润，少量纤维素渗出，部分肾小管变性坏死；术后14天时肾间质纤维化严重，肾小管萎缩，间质有细胞增生，细胞外基质堆积，纤维素大量渗出，与对照组相比各时间点均有显著性差异(P0.05)；模型干预组各时间点肾间质病变程度较模型组减轻，但仍高于对照组(P0.05）。模型组：IGF-1蛋白术后1天在肾小管上皮细胞的表达逐渐增加，随着实验时间的延长，表达强度逐渐增强，在第7天达到了表达的高峰，14天时的表达反而有所下降，但仍强于对照组（P0.05）。MMP-2术后7天部分肾小管上皮细胞胞浆中有弱阳性表达，随着肾间质山西医科大学硕士学位论文 III 病理损伤程度加重，MMP-2表达呈递减趋势，术后第14天表达明显减弱。IGF-1 和 MMP-2 表达明显高于对照组，各时间点组比较差异有显著性（P0.05）。模型干预组：IGF-1的表达各时间点明显低于模型组，但高于对照组，各时间点比较差异有统计学意义（P0.05）；MMP-2 的表达各时间点明显高于模型组，但低于对照组，差别具有统计学意义（P0.05). Compared with control group, the level of expression of IGF-1 was increased gradually, in tubule epithelial cellular, also in tubulointerstitial regions. IGF-1 came to peak at day 7, and gradually decreased at day 14, but still more than that of the control group(P0.05). The expression of MMP-2 was decreased gradually, with the experimental session continuing it becoming less and less. Much more intensive expression of IGF-1, MMP-2 were observed than the control group（P0.05）.At each time point the difference in UUO groups was significant(P0.05). The tendency of IGF-1 expression was decreased than model of the untreated group (P0.05), but still higher than control group(P0.05). The tendency of MMP-2 expression was increased than model of the untreated group (P0.05), but still lighter than control group(P0.05). The significant difference were observed between treated and untreated group in different time points (P0.05). (3) Correlation analysis: Negative correlations were observed among IGF-1 and MMP-2 (P0.05). Conclusion: In the course of tubulointerstitial lesions with young rats, the up-regulated expression of IGF-1 exhibit a great s