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文档简介

皮肤科免疫荧光技术,河北医科大学第二医院皮肤科郭兵申,免疫荧光技术概述,原理 将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。分类直接法：将荧光素标记的抗体与标本中的抗原直接结合进而荧光反应。间接法：将荧光素标记的抗抗体与相应的特异性抗体抗原复合物反应，形成抗原-抗体-抗抗体复合物体系，进检测的一种特异性荧光反应。,免疫荧光原理示意图,临床常用荧光素染料,异硫氰酸荧光素（FITC）吸=490-495nm 、发=520-530nm、黄绿色荧光 四乙基罗丹明（RIB200）吸=570nm、 发=595600nm、呈橘红色荧光四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）吸=550nm、 发=620nm、呈橙红色荧光,皮肤直接免疫荧光检测,适应症：非感染性大疱性皮肤病天疱疮、类天疱疮、疱疹样皮炎、线状IgA大疱性皮病、获得性大疱性表皮松解等结绨组织病：如红斑狼疮等各种血管炎皮肤肿瘤某些感染性皮肤病,皮肤间接免疫荧光检测,适应症：血清中各种抗微生物抗体测定如：梅毒螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、疱疹病毒等血清中各种自身抗体的测定系统性疾病：如红斑狼疮、皮肌炎、硬皮病等大疱性皮肤病：如天疱疮抗体等糖尿病：如抗胰岛细胞抗体等,操作方法及流程,直接荧光患者标本采集,操作方法及流程,冰冻切片、染色、镜检,操作方法及流程,间接免疫荧光染色步骤,操作方法及流程,实验室操作图片,直接荧光组织修材,冰冻切片,实验室操作图片,荧光染色,水浴箱孵育,实验室操作图片,荧光显微镜镜检,免疫荧光镜下天观（天疱疮患者标本）,镜下描述： 镜下可见荧光抗体IgG于表皮棘细胞间呈网状沉积，荧光阳性。,免疫荧光镜下天观（类天疱疮患者标本）,C3补体,荧光镜下： 镜下可见荧光标记的C3补
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